DB22∕T 3316-2021 滞育松毛虫赤眼蜂生产技术规程

ICS65.020

CCSB15

DB22

吉林省地方标准

DB22/T3316—2021

滞育松毛虫赤眼蜂生产技术规程

CodeofpracticeforproductionofdiapauseTrichogrammadendrolimi

2021-11-26发布2021-12-15实施

吉林省市场监督管理厅发布

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的

规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。

本文件起草单位：吉林农业大学。

本文件主要起草人：张俊杰、杜文梅、阮长春、张雪。

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滞育松毛虫赤眼蜂生产技术规程

1范围

本文件确立了滞育松毛虫赤眼蜂（TrichogrammadendrolimiIshii）生产的程序，规定了前期准

备、赤眼蜂繁育、精选与储存等阶段的操作指示，描述了记录档案等追溯方法。

本文件适用于利用柞蚕卵繁育的滞育松毛虫赤眼蜂工厂化生产。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

滞育诱导diapauseinduction

利用持续低温诱导松毛虫赤眼蜂稳定进入滞育状态的一个过程。

3.2

滞育持续期diapausemaintenance

赤眼蜂进入稳定滞育到解除滞育前的阶段。

3.3

滞育解除diapausetermination

通过条件控制，使赤眼蜂结束滞育期，继续发育至羽化出蜂的过程。

4滞育赤眼蜂生产程序

滞育松毛虫赤眼蜂生产分为3个阶段。程序流程图如图1所示：

图1滞育松毛虫赤眼蜂工厂化生产流程

5生产前准备

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5.1厂房及规模

按照150亿头滞育松毛虫赤眼蜂生产规模应包括：

a)蜂种繁育室不低于20m2；

b)暖茧车间不低于300m2；

c)采卵室不低于50m2；

d)洗卵室不低于20m2；

e)消毒及晾干室不低于25m2；

f)接种室不低于10m2；

g)暗室不低于50m2；

h)发育室不低于50m2；

i)保鲜冷藏室不低于100m2；

j)物品保存库不低于20m2。

5.2设备

低温生化培养箱、药品保存箱、搅拌器、脱水机、烘干机、柞蚕卵色选机、空调、排风机、电暖气、

加湿器、温湿度自控仪、电脑及打印机、发育盘架、手推运输车。

5.3常用药品及材料

5.3.125g/L～30g/L苯扎溴铵溶液（新洁尔灭消毒液）。

5.3.2孔径为0.15mm的纱网。

5.3.3孔径为2.00mm的纱网。

5.4蜂种

5.4.1蜂种采集

生产前1年的7月下旬至8月初，在自然条件下未放蜂玉米田采集玉米螟卵块，以半山区近水

边为宜。

5.4.2蜂种纯化

采集的玉米螟卵块带回室内发育培养，将寄生变黑的卵块单独装入试管，羽化出蜂后引单头雌蜂，

放入装有100粒米蛾卵的试管（10mm×70mm）转接寄生。发育条件为（25±1）℃、RH（75±5）%、

光照16h、黑暗8h。

5.4.3松毛虫赤眼蜂鉴定

根据雄性赤眼蜂外生殖器的形态特征进行种类鉴定，参照附录A执行。

5.4.4蜂种滞育保存

鉴定纯化的松毛虫赤眼蜂，经3代～5代筛选繁殖，建立实验种群后保存使用：

a)将纯化的松毛虫赤眼蜂蜂种在(25±1)℃、RH(75±5)%条件下，按蜂卵（柞蚕卵）比2:1接

种24h后去除种蜂；

b)接蜂后发育36h～46h到幼虫中期，置入12℃、RH(75±5)%的条件下，滞育诱导30d，

赤眼蜂滞育；

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c)将滞育持续期的赤眼蜂置入(3±1)℃、RH(75±5)%的条件下，进行滞育解除60d～90d；

d)经10℃48h、15℃24h过渡后，按光照16h，(25±1)℃、RH(75±5)%；黑暗8h，(20

±1)℃、RH(75±5)%，变温发育至出蜂。

5.5柞蚕茧

5.5.1备茧

5.5.1.1备茧时期

在生产前一年的11月～12月份开始按预定计划备茧。

5.5.1.2茧质要求

5.5.1.2.1健康雌茧率≥90%；

5.5.1.2.2雄茧率≤7%；

5.5.1.2.3死伤茧率≤3%；

5.5.1.2.4割口茧率≤8%；

5.5.1.2.5发育蛹和嫩蛹≤5%；

5.5.1.2.6茧层率≥10%，无薄皮茧、瘪茧；

5.5.1.2.7茧干燥，未在-3℃以下低温储存。

5.5.1.3备茧数量

按每繁150亿头松毛虫赤眼蜂用茧15000kg计算。

5.5.2蚕茧保存

5.5.2.1保存温度(3±1)℃、RH(60±5)%。

5.5.2.2适当通风换气，保持空气含氧量。

5.5.2.3防止接触有毒有害物质。

5.5.2.4储存时间不低于45d。

6工厂化生产

6.1灭菌消毒

在生产前1周，将所有繁蜂车间及繁蜂工具，进行集中消毒。消毒方法为如下：

a)首先对消毒对象进行清水或0.5%～1%氢氧化钠、1%的漂白粉水冲洗；

b)用生石灰或石灰水对繁蜂车间喷刷覆盖；

c)将繁蜂工具等置于繁蜂车间内，用毒消散或硫磺等熏蒸消毒。保持室温24℃以上，RH75%以

上，时间24h。

6.2蜂种复壮与扩繁

6.2.1复壮

根据生产计划，定期对松毛虫赤眼蜂蜂种，以米蛾卵和柞蚕卵交替繁育复壮：

a)接蜂比例：米蛾卵蜂卵比1：200，柞蚕卵蜂卵比1:1；

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b)接蜂时间：24h；

c)发育条件：(25±1)℃、RH(75±5)%、光照16h、黑暗8h；

d)复壮周期：30d。

6.2.2扩繁

以柞蚕卵为寄主，将蜂种扩繁2代～3代：

a)接蜂比例：1：30（蜂种寄生柞蚕卵：新鲜卵）；

b)接蜂时间：24h；

c)接蜂条件：全黑暗，(25±1)℃、RH(75±5)%；

d)发育条件:同6.2.1c)；

e)将末1代蜂种发育至幼虫中后期置于(3±1)℃、RH(75±5)%条件下冷藏，冷藏时间≤15

d。

6.3寄主卵

6.3.1暖茧发蛾

暖茧室保持18℃～22℃，RH(70±5)%，20d～25d后柞蚕茧羽化出蛾。

6.3.2收蛾

在柞蚕蛾羽化期内，随时采收刚羽化（展翅前）雄蛾，避免交尾，次日清晨人工收雌蛾，用于当天

繁蜂或储存在(3±1)℃的冷库中备用。

6.3.3剖腹取卵

用人工方法将柞蚕雌蛾腹部与头胸部分离，剖腹取卵。

6.3.4洗卵

用搅拌器将卵与蛾腹内杂物搅拌分离，漂净杂物，然后反复用清水冲洗至卵粒无杂质。

6.3.5卵面消毒

将清洗干净的新鲜卵用0.1%的苯扎溴铵溶液浸泡10min。

6.3.6脱水晾卵

消毒后的新鲜卵用纱网袋装好，用脱水机进行初步脱水，然后用烘干机烘干，温度不超过25℃～

28℃。

6.3.7清除绿卵

烘干的新鲜卵用色选机等专用设备清除绿卵后，再用于接蜂，绿卵率≤4%。

6.4接蜂

蜂种卵与新鲜柞蚕卵按1:25～1:30比例进行接蜂。当蜂种羽化25%～30%时，将种蜂卵均匀

撒在接蜂盘中，铺上孔径为2mm的纱网，再将新鲜卵平铺到纱网上，送入(25±1)℃、RH(75±5)%

的暗室内产卵寄生，36h~48h后，去除蜂种，标明日期送入发育室发育。

6.5培养发育

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接蜂后的寄生卵分批次送入(25±1)℃、RH(75±5)%，自然光照条件下的发育室，继续发育12

h~24h，镜检至幼虫中后期。

6.6滞育诱导

将发育到幼虫中后期的松毛虫赤眼蜂，在10℃～12℃、RH(75±5)%的全暗条件下，平铺在

卵盘内，卵厚3cm～4cm，每天翻动两次，诱导25d～30d后，赤眼蜂滞育。

6.7滞育解除

诱导滞育结束后即进入到滞育持续期，将滞育的赤眼蜂转入(3±1)℃、RH(75±5)%的黑暗条件

下滞育解除，时间70d～90d。

6.8变温发育

滞育解除后的赤眼蜂采用分步渐变加温的方式进行发育：

a)在(10±1)℃、RH(75±5)%全暗条件下加温48h；

b)在（15±1）℃、RH(75±5)%全暗条件下加温24h；

c)在日间25℃下16h、夜间20℃下8h，RH(75±5)%室内条件下发育至蛹后期。

7精选与储存

7.1精选

将发育至蛹后期的赤眼蜂寄生卵，用绿卵色选机去除未寄生卵、劣质卵、绿卵及其它杂质。

7.2储存

将精选后的赤眼蜂转入(3±1)℃、RH(75±5)%的保鲜冷藏室储存备用，储存时间≤7d。

8记录档案

建立滞育松毛虫赤眼蜂工厂化生产档案，对整个生产过程进行详实记录，保存2年以上，做到可

追溯：

a)每天的温湿度记录；

b)每批次滞育赤眼蜂的生产日期；

c)每批次滞育赤眼蜂的滞育率和解除滞育率；

d)每批次滞育赤眼蜂的加温日期。

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