T∕HBIQA 0001-2025 蜂蜜中13种硝基咪唑类药物及其代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

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T/HBIQAT/HBIQA0001—202513液相色谱-串联质谱法Determinationof13nitroimidazolesandmetabolitesresiduesinhoneyLiquidchromatography-tandemmassspectrometry2025-11-13发布 2026-01-01实施河北省检验检疫学会发布T/HBIQA0001—2025T/HBIQA0001—2025前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由河北省检验检疫学会提出并归口。本文件起草单位：石家庄市疾病预防控制中心、河北医科大学。本文件主要起草人：马玲、连靠奇、王宁、聂嘉媛、赵伟、王可、吕蔚、苏霞、陈佳静。T/HBIQA0001—2025T/HBIQA0001—2025PAGEPAGE113液相色谱-串联质谱法范围本文件规定了蜂蜜中13种硝基咪唑类药物及其代谢物残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。42--4-13（GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法本文件没有需要界定的术语和定义。原理试样中的13种硝基咪唑类药物及代谢物用0.1%甲酸乙腈溶液提取，提取液经分散固相萃取净化，氮吹浓缩后用甲醇复溶，液相色谱-串联质谱仪测定，基质外标法定量。试剂除另有规定外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。乙腈（CH3CN）甲酸（CH2O2）甲醇（CH4O）（MgSO4）。（NaCl）。0.1%200μL200mL标准品4-2-甲基-4-1398.0%AA.1。（10013mg（精确至0.1mg）于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，-18℃避光可保存3个月。（1μg/mL）：（5.4.1）各0.10mL10mL418.18.2（5.4.2），（5.4.3）0.5μg/L2μg/L10μg/L20μg/L50μg/L100μg/L200μg/L材料乙二胺-N-（PSA）：40µm~60µm。0.22µm。-（ESI）10000r/min。6.6 0.01g0.00001。蜂蜜样品搅拌均匀后置入样品瓶中，密封，并做上标记。4℃避光保存。提取1.0050mL2mL14mL0.1%52.2000n305gNCl14下0000n离心5min。将上清液移出，待净化。净化10mL0.1g0.4g15mL14℃10000r/min5min7mL351mL甲醇复溶，经0.22μm尼龙滤膜过滤，供液相色谱-串联质谱测定。-（100mm×3.0mm，2.6µm）A0.1%B1；0.3mL/min；d)40；e)进样量：3µL。表1 梯度脱件时间（min）A（%）B（%）0.080202.580202.670303.570303.65955.55955.680208.08020（ESI+）；（MRM）；其他参考质谱条件见附录A中的表A.1。-±0.1min±40%。8.3.18.3.2-13质量色谱图见附录B。取空白试样，除不加标准溶液外，采用与试样相同的测定步骤进行平行操作。试样中硝基咪唑类药物及其代谢物的含量按标准曲线或公式（1）计算：式中：

X=A×Cs×V1×1000As×V2×m×1000

…………（1）X——试样中被测物的含量，单位为微克每千克（μg/kg）；A——试样溶液中被测物的峰面积；Cs——标准溶液中被测物浓度的数值，单位为纳克每毫升（ng/mL）；V1——提取液总体积的数值，单位为毫升（mL）；As——标准溶液中被测物的峰面积；V2——用于氮吹的上清液体积，单位为毫升（mL）；m——试样质量的数值，单位为克（g）。灵敏度本方法对蜂蜜中13种硝基咪唑类药物及其代谢物的检出限为0.5μg/kg，定量限为1.5μg/kg。准确度131.5µg/kg~100.0µg/kg80%~105%。精密度本方法相对标准偏差≤20%。T/HBIQA0001—2025T/HBIQA0001—2025PAGEPAGE5附 录 A（资料性）参考质谱条件参考质谱条件1)：4000V；325℃；10L/min；45psi；350；L/min。表A.113CAS中文名称英文名称CAS号保留时间（min）离子对（m/z）碎裂电压（V）碰撞能（eV）4-硝基咪唑4-nitroimidazole3034-38-62.215114.0/68.1*8018114.0/96.98022羟基甲硝唑Hydroxymetronidazole4812-40-22.461187.9/125.6*9517187.9/122.695102-甲基-4-硝基咪唑2-methyl-4-nitroimidazole696-23-12.782128.0/82.0*7517128.0/110.87517羟甲基甲硝咪唑Dimetridazole-2-hydroxy936-05-03.016157.9/139.9*8012157.9/55.18019甲硝唑Metronidazole443-48-13.221172.0/128.1*7517172.0/82.17520洛硝达唑Ronidazole7681-76-73.484201.0/139.8*7010201.0/55.07017二甲基硝咪唑Dimetridazole551-92-84.232142.0/96.1*8517142.0/86.18525塞克硝唑Secnidazole3366-95-84.870186.0/127.9*8512186.0/59.08515替硝唑Tinidazole19387-91-84.955247.9/121.0*9515247.9/127.89518奥硝唑Ornidazole16773-42-55.353219.9/127.9*7515219.9/82.07528羟基异丙硝Hydroxyipronidazole35175-14-55.377186.9/167.9*85151)AAgilent1290-6470B中文名称英文名称CAS号保留时间（min）离子对（m/z）碎裂电压（V）碰撞能（eV）唑186.9/122.08520异丙硝唑Ipronidazole14885-29-15.504169.9/109.0*9026169.9/124.09018苯酰甲硝唑Benzoylmetronildazole13182-89