T∕HBIQA 0002-2025 蜂蜜中28种大环内酯类和林可酰胺类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

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T/HBIQA河北省检验检疫学会团体标准T/HBIQA0002—202528液相色谱-串联质谱法Determinationof28macrolidesandlincosamidesinhoneyLiquidchromatography-tandemmassspectrometry2025-11-13发布 2026-01-01实施河北省检验检疫学会发布T/HBIQA0002—2025T/HBIQA0002—2025前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件起草单位：石家庄市疾病预防控制中心、河北医科大学。本文件主要起草人：郭爱静、田会方、赵伟、王宁、王可、连靠奇、高沛雨、吕蔚、杨洁。T/HBIQA0002—2025T/HBIQA0002—2025PAGEPAGE128液相色谱-串联质谱法范围本文件规定了蜂蜜中28-Ⅰ、9S-A奇霉素、竹桃霉素、替米考星、红霉素、泰乐菌素、维吉尼亚霉素M1、脱水红霉素A、克拉霉素、吉A28（GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法本文件没有需要界定的术语和定义。原理28-0.1%试剂除另有规定外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。乙腈（CH3CN）。甲醇（CH4O）（CH2O2）0.1%50μL505.2.2 乙腈-0.1%（28:72,v/v）：36mL0.1%（5.2.1）14mL标准品Ⅰ9S-AM1、脱水红霉素AA2894.1%，具体信息见附录AA.1。（10028mg（0.1mg）于100mL-18（1.0μg/mL）（5.4.1）0.10mL10mL容量瓶中，2℃~8℃8.18.2（5.4.2），（5.4.3）0.5μg/L2μg/L5μg/L10μg/L20μg/L50μg/L100μg/L200μg/L材料（C18）：40µm~60µm。0.22µm。-（ESI）8000r/min。6.6 0.01g0.00001。蜂蜜样品搅拌均匀后置入样品瓶中，密封，并做上标记。4℃避光保存。提取1.000.0150mL1mL12mL乙腈，以2000r/min涡旋振荡2min，于4℃下8000r/min离心5min，将上清液移出，待净化。净化取9L0.3gC85.5.的15L18000n离心5，移取6mL上清液至另一离心管中，于40℃下氮吹至近干，加入1mL乙腈-0.1%甲酸水溶液（5.2.2）复溶，经0.22μm尼龙滤膜过滤，供液相色谱-串联质谱测定。-（100mm×3.0mm，2.6μm）A0.1%B1；0.3c)40；3µL。表1 梯度脱件时间（min）A（%）B（%）072280.572280.668324.068324.165355.065355.155459.055459.1257512.0257512.1722816.07228（ESI+）；（MRM）；其他参考质谱条件见附录A中的表A.1。-±0.1min±40%。8.3.18.3.2-28子质量色谱图见附录B。取空白试样，除不加标准溶液外，采用与试样相同的测定步骤进行平行操作。试样中大环内酯类和林可酰胺类药物的残留量按标准曲线或公式（1）计算：式中：

X=A×Cs×V1×1000As×V2×m×1000

…………（1）X——试样中被测物残留量的数值，单位为微克每千克（μg/kg）；A——试样溶液中被测物的峰面积；Cs——标准溶液中被测物浓度的数值，单位为纳克每毫升（ng/mL）；V1——提取液总体积的数值，单位为毫升（mL）；As——标准溶液中被测物的峰面积；V2——用于氮吹的上清液体积，单位为毫升（mL）；m——试样质量的数值，单位为克（g）。灵敏度本方法对蜂蜜中28种大环内酯类和林可酰胺类药物的检出限为0.5µg/kg，定量限为1.5µg/kg。准确度本方法对蜂蜜中28种大环内酯类和林可酰胺类药物在1.5µg/kg~100.0µg/kg添加浓度的回收率为70%~110%。精密度本方法相对标准偏差≤20%。T/HBIQA0002—2025T/HBIQA0002—2025PAGEPAGE5附 录 A（资料性）参考质谱条件参考质谱条件1)：5500V；550℃；50psi；40psi；55psi。表A.128CAS中文名称英文名称CAS号保留时间（min）离子对（m/z）去簇电压（V）碰撞能（eV）林可霉素Lincomycin154-21-21.74407.3/126.2*111.131.5407.3/359.2130.225.39S-红霉胺(9S)-9-Amino-9-deoxoerythromycin26116-56-32.67735.5/158.2*115.146.1735.5/577.6127.037.1新螺旋霉素ⅠNeospiramycinI70253-62-23.01699.4/174.2*86.930.8699.4/142.116.851.7阿奇霉素Azithromycin83905-01-53.60749.5/158.2*233.149.8749.5/116.1232.747.8阿奇霉素AAzathramycin76801-85-93.69735.5/577.4*145.948.3735.5/158.193.426.9克林霉素Clindamycin18323-44-93.72425.3/126.2*95.934.2425.3/277.3137.626.9螺旋霉素Spiramycin8025-81-83.96422.5/174.2*112.128.9422.5/101.376.122.4竹桃霉素Oleandomycin3922-90-56.62688.4/544.5*102.823.0688.4/158.2106.934.91)非商业性声明：附录A所列参考质谱条件是在ABSCIEX5500型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。中文名称英文名称CAS号保留时间（min）离子对（m/z）去簇电压（V）碰撞能（eV）替米考星Tilmicosin108050-54-07.07869.6/696.5*70.959.7869.6/174.067.458.3红霉素Erythromycin114-07-87.59734.5/158.2*11.138.1734.5/576.610.527.6泰乐菌素Tylosin1401-69-08.16916.7/173.9*49.947.1916.7/772.570.741.6维吉尼亚霉素M1VirginiamycinM121411-53-08.49526.4/337.0*151.030.6526.4/133.0172.934.3脱水红霉素AAnhydroerythromycinA23893-13-28.76716.5/558.4*88.122.5716.5/158.3107.038.1克拉霉素Clarithromycin81103-11-99.75748.5/158.1*104.035.7748.5/590.4116.127.1吉他霉素Sineptina1392-21-89.79772.5/174.3*113.142.1772.5/214.986.039.1罗红霉素Roxithromycin80214-83-19.88837.6/679.5*109.330.2837.6/158.2119.140.2红霉素A烯醇醚ErythromycinAenolether33396-29-19.99716.5/558.4*101.724.3716.5/158.2106.038.1麦迪霉素Midecamycin35457-80-810.73814.5/174.2*82.842.6814.5/201.281.240.0醋竹桃霉素Oleandomycintriacetate2751-09-910.98772.4/158.2*124.230.7772.4/586.4127.327.0交沙霉素Josamycin16846-24-511.83828.6/174.0*85.342.9828.6/229.161.741.6依普菌素Eprinomectin123997-26-212.41914.5/186.0*200.223.2914.5/330.2164.120.6泰万菌素Acetylisovaleryltylosintartrate63428-13-712.491042.5/814.5*7.846.81042.5/174.316.851.7中文名称英文名称CAS号保留时间（min）离子对（m/z）去簇电压（V）碰撞能（eV）阿维菌素Avermectin71751-41-212.64890.5/305.1*84.034.5890.5/567.399.919.3多拉菌素Doramectin117704-25-312.84916.5/331.3*80.734.3916.5/593.395.119.4伊维菌素Ivermectin70288-86-713.20892.7/569.5*97.220.1892.7/307.0101.030.8塞拉菌素Selamectin220119-17-513.21770.5/608.5*14.128.1770.5/626.014.024.1埃玛菌素Ememectin119791-41-213.39886.4/158.2*65.942.1886.4/126.165.940.1莫西菌素Moxidectin113507-06-513.50640.3/528.4*30.912.6640.3/498.06