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文档简介
《达乌里秦艽种子检验规程》编制说明工作简况立项情况2025年10月内蒙古蒙草草业科技有限公司向内蒙古标准化协会提出《达乌里秦艽种子检验规程》团体标准立项申请。2025年11月,内蒙古标准化协会“关于下达2025年第10批2项团体标准制修订项目的通知”(内标协(2025)040号),批准《达乌里龙胆种苗质量分级》立项。提出单位:内蒙古农业大学归口单位:内蒙古标准化协会起草单位:内蒙古农业大学、内蒙古蒙草草业科技有限公司、蒙草生态环境(集团)股份有限公司、内蒙古亿赫本草生物科技有限公司、武川县汇德兴业林业生态开发有限公司。起草人:花梅、林世纪、王俊杰、张晓明、李晓杰、张跃华、高若凡、高守舆、刘思泱、孟兴业。制定标准的目的和意义种子质量检验是对种子生理、遗传、健康、纯度等质量特性进行评价的方法和程序。种子质量检验的目标是确保种子达到或超过某一最低标准,在质量检验的环节中保证了种子可靠良好的繁殖能力,保障了从业人员对生产、加工、收售环节中对种子质量的把控。达乌里秦艽(GentianadahuricaFischer)又名小秦艽、达乌里龙胆,为龙胆科(Gentianaceae)龙胆属(Gentiana)多年生草本植物,多生长与向阳山坡、田边、路旁、河滩、水沟旁等。作为中药秦艽的基原植物,收载于《中国药典》2015年版,以其干燥根入药,具有祛风湿、退虚热、止痛的功效。《蒙药正典》《藏药志》等经典著作中收载,其干燥花分别作为蒙药“呼和—珠勒根—其木格”和藏药“吉解那保”,具有清热解毒、止咳祛痰的功效,主治肺热咳嗽、咽喉热、咽喉肿痛、毒热、瘟热等。随着对达乌里秦艽的化学成分和药理效应的深入研究,其使用量逐步上升,导致野生资源被过度开采,大部分药材以采收后直接进行加工炮制或干燥处理,这使得其野生资源处于非常危险的状态,远不能满足市场的需求。现阶段,关于龙胆科植物的研究主要聚焦于其化学成分和药用价值。研究表明不同地区的秦艽种子在净度、含水量、发芽率和千粒重等方面有明显的差异。达乌里秦艽的种子体积小,不能有效地储存养分,自然环境下的萌发率相对较低,因此对野生种质进行保护与开发迫在眉睫。制定《达乌里秦艽种子检验规程》的目的是规范达乌里秦艽种植企业的种源质量控制和规范种子生产企业的产品质量控制,提高企业生产效益和质量监督水平,提高药材产量,降低生产成本、强化药材和种子产品的质量控制等诸多方面具有重要的实际意义。本标准实施后对全国从事达乌里秦艽种植企业的种源质量控制、从事达乌里秦艽种子生产企业的产品质量控制以及市场流通的种子质量技术监督具有指导和规范作用,对促进达乌里秦艽药材规范化生产和产业发展,提高药材产量和质量,推动达乌里秦艽药材基地建设等多方面具有重要作用。编制过程(一)分工情况内蒙古农业大学接到立项批准后,组建了专门工作组,明确了负责人和业务能力强、工作责任心强的参编人员组成课题组,进行指标验证及标准技术内容编制,开展起草标准基础稿的工作。表1标准参与编写人员及其所做的工作姓名工作单位职称主要工作内容花梅内蒙古农业大学中级项目主持人,负责项目统筹。林世纪内蒙古农业大学其他起草人,负责标准编写和修订。王俊杰内蒙古农业大学教授主要起草人,负责项目制定统筹协调。张晓明内蒙古农业大学中级主要起草人,负责标准编写、验证和修订。李晓杰内蒙古农业大学中级起草人,参与标准的指标验证张跃华内蒙古蒙草草业科技有限公司畜牧师主要起草人,负责标准编写、验证和修订。高若凡内蒙古蒙草草业科技有限公司助理工程师起草负责人,负责标准编写、验证和修订、起草等全过程。高守舆内蒙古蒙草草业科技有限公司其他主要参加人,参与方案设计、标准编写、指标验证和修订刘思泱蒙草生态环境(集团)股份有限公司中级起草人,参与标准的指标验证孟兴业武川县汇德兴业林业生态开发有限公司其他主要参加人,参与标准指标验证起草阶段内蒙古农业大学和内蒙古蒙草草业科技有限公司根据达乌里秦艽植物生长实际情况,对龙胆科种子检验的主要技术参数进行充分调查研究、综合分析和反复验证,召开标准编制部署会,由内蒙古农业大学、内蒙古蒙草草业科技有限公司等标准起草组成员合作完成编写工作,进行了必要的文字修改并判定标准的具体内容。邀请了有关专家进行了审稿和咨询,形成了本标准的预审定稿。2025年10月提出《达乌里秦艽种苗质量分级》团体标准制定申请,编写形成标准草案,报送内蒙古标准化协会,立项评审会通过立项。征求意见阶段2025年11月,编制单位按照立项审查的意见进行了修改,形成了《达乌里秦艽种子检验规程》征求意见稿,报送内蒙古标准化协会进行网上公示征求意见。送审阶段2025年X月,编制组征求了相关领域内XXX、XXX、XXX等X家单位的X位专家的意见和建议。编制组按照专家们的意见,对标准征求意见稿进行了进一步修改。编制组共收到X条修改意见,其中X条予以采纳,X条未采纳,完成征求意见稿的修改,形成送审稿。报批阶段2025年XX月XX日,由内蒙古标准化协会组织召开《达乌里秦艽种子检验规程》地方标准审查会,审查委员会听取标准起草组介绍标准编制说明,对标准文本逐条审查,并形成会议纪要。工作组认真听取审查意见,仔细整理会议纪要和修改意见,完善送审材料,形成报批稿,报送内蒙古标准化协会审批发布。四、制定标准的原则和依据,与现行法律、法规、标准的关系(一)原则和依据(1)科学性原则本标准的制定是在大量试验研究和技术集成的基础上完成,并且本文件的编写内容与格式严格按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规则起草。本标准注重检验指标、检验方法、评价方法等技术方法以及名词术语使用和操作规程描述的科学性。(2)实用性原则本标准的制定充分考虑了种子检验的可操作性,注重每项检验指标和操作规程的实用性以及检验方法的针对性,力求专业检验机构和企业质检部门使用本标准的实用性。(3)先进性原则本标准的制定充分考虑了达乌里秦艽种子的生产现状和技术水平的发展趋势,注重技术手段的先进性和标准的引导和指引作用,积极推荐应用现代技术,力求标准具有前瞻性。2、编制依据依托内蒙古科技计划项目《珍惜濒危药材小秦艽人工繁育关键技术研究与示范》和课题《小秦艽野生栽培驯化及种子繁育关键技术研究》进行种子检验试验,参照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》、《牧草种子检验规程》(GB/T
2930.1-2001)、《中华人民共和国药典》指导标准技术指标编制。与现行法律、法规、标准的关系本标准制定符合《中华人民共和国标准化法》《地方标准管理办法》等相关法律、法规、政策的规定,属于内蒙古地区首次提出制定,不存在与相关法律法规相抵触之处,也不与其他标准相冲突。本标准制定属于首次提出制定,不存在与其他标准相冲突,经全国标准信息公共服务平台检索,目前国内外均无达乌里秦艽种子检验规程。检索词序号标准编号标准名称出处龙胆种子检验1T/CACM1056.15-2017中药材种子种苗滇龙胆种子中华中医药学会2DB23/T1447-2011龙胆种子质量分级及检验规程黑龙江龙胆种子质量1DB21/T3925.2-2024道地药材种子质量分级第2部分:龙胆辽宁2DB53/T378-2012滇龙胆种子和种苗质量要求云南秦艽种子规程1T/YGIIA021-2023维西秦艽种子种苗质量标准云南2DB62/T4193-2020秦艽种子繁育技术规程甘肃3DB53/T539-2013粗茎秦艽种子种苗生产技术规程云南五、主要条款的说明,主要技术指标、参数、试验验证的论述(一)主要条款说明《达乌里秦艽种子检验规程》共包括四章。第一章规定了该技术的适用范围;第二章对规范性引用文件做了说明;第三章对该技术的术语进行了定义;第四章检验方法。(二)主要技术指标、参数、试验论证的论述1材料与方法1.1材料达乌里秦艽(GentianadahuricaFischer)种子于2022年秋季采自内蒙古自治区呼和浩特市武川县大青山种植基地,于4℃冰箱储藏保存。1.2方法1.2.1扦样参照《牧草种子检验规程扦样》(GB/T2930.1-2001)中规定的标准化方法,对送检样品及试验样品的质量要求进行科学测定与准确确定。净度分析试验的种子样本量应确保不少于2500粒。为确保分析结果的可靠性,送检样品的总质量需达到净度分析所需样本量的10倍以上,采用规范的四分法进行样品分取。1.2.2净度分析参照《牧草种子检验规程净度分析》(GB/T2930.2-2001)中关于净度分析的具体规定,针对达乌里秦艽种子的净度分析,需要先去除掺杂其中的杂质成分以及其他植物种子,再测定净种子所占比例。1.2.3真实性检验随机数取种子100粒,测量记录其大小、形状、种皮颜色、斑纹及附属物,重复3次。1.2.4重量测定参照《牧草种子检验规程重量测定》(GB/T2930.9-2001)运用百粒计数法、五百粒计数法以及千粒计数法这三种不同方式开展测定工作。1.2.5含水量测定参照《牧草种子检验规程水分含量的测定》(GB/T2930.8-2001),采用高恒温(130±2)℃烘干法和低恒温(105±2)℃烘干法对种子所含水分量展开测定。1.2.6生活力测定测定方法的选择测定生活力时,选择红墨水法、氯化三苯基四氮唑(TTC)法、溴麝香草酚蓝(BTB)法以及纸上荧光法。TTC染色观测方法、温度、时间和浓度的确定取一定数量的达乌里秦艽净种子经水浸处理使其充分吸水膨胀后,选取50粒种子采用10%次氯酸钠溶液进行2min脱色处理,随后用蒸馏水反复冲洗3~4次;另取50粒种子,用解剖刀沿着胚的中轴线将其纵向剖切成两半;再选取50粒种子,将它们置于沸水浴中处理5min,以此消除种子的生活力,作为对照样本,每组试验均设置4次重复。在室温条件下黑暗染色24h,选出最适的观察方式。将经最佳观察条件处理的种子分别置于20℃、30℃、35℃和40℃的恒温培养箱中进行培养,黑暗染色,每隔1h观察一次,直到被染色的种子数变化很小或者不再变化为止,筛选确定适宜的染色温度条件及时间参数,通过比较0.5%和1%两种浓度的TTC溶液染色效果,以确定达乌里秦艽种子染色的最适试剂浓度。有生活力种子判定标准:染色结束,取出种子用清水冲洗,在保持种子湿润的条件下,观察切面,全部染色最大面积从胚根尖端量起1/3胚根的种子为有生活力的种子,其它均为无生活力的种子。1.2.7发芽前打破休眠处理的选择选取达乌里秦艽净种子,用75%乙醇进行发芽前消毒处理2min,蒸馏水冲洗3次后,进行不同处理。浸种处理不同浸种时间:浸种时间分别设置为0h、12h、24h、48h、60h、72h、84h,共七个处理。流水处理不同流水冲洗时间:分别设置冲洗时间为6h、12h、24h、36h、48h,共5个处理。激素处理赤霉素(GA3)溶液:分别用浓度为100、200、300、400、500、600ppm的赤霉素(GA3)溶液浸种2h、12h、24h,共18个处理。吲哚乙酸(IAA)溶液:分别用浓度为2mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L、10mg/L的吲哚乙酸(IAA)溶液浸种24h,共5个处理。α-萘乙酸(NAA)溶液:分别用浓度为10mg/L、20mg/L、30mg/L、40mg/L、50mg/L的α-萘乙酸(NAA)溶液浸种24h,共5个处理。取出种子,将不同处理后的种子播入铺有双层滤纸的培养皿,每皿100粒,四次重复,在20℃、12h光照、12h黑暗的恒温恒湿培养箱中进行发芽,种子萌发标准为胚根长度大于或等于种子的一半。每天观察记录种子萌发情况。冷层积处理选取达乌里秦艽净种子,用无纺布滤袋装好,分别用湿度为0%、5%、10%、15%、20%的河沙进行处理(种子上下河沙厚度均为5cm),置于圆口塑料花钵(直径12.5cm,高20cm)内,后将花钵放于4℃进行冷层积处理,从第10d开始取种,每隔10d取一次,持续观测60d,编号如表所示。取出种子,将不同处理后的种子播入铺有双层滤纸的培养皿,每皿100粒,四次重复,在20℃、12h光照、12h黑暗的恒温恒湿培养。表1冷层积处理编号湿度/%时间/dC1020C2030C3040C4050C5060C6520C7530C8540C9550C10560C111020C121030C131040C141050C151060C161520C171530C181540C191550C2015601.2.8发芽实验选取100粒净种子,先用75%乙醇消毒2min,经蒸馏水漂洗3次后,均匀摆放在铺有双层滤纸的培养皿内。将培养皿移入恒温培养箱,每日补充水分维持滤纸湿润度,并定时观察记录发芽情况计算发芽率。适宜发芽温度的确定选取达乌里秦艽净种子,进行消毒及发芽前破除休眠处理,设置15℃、20℃、25℃、30℃恒温处理及15~25℃变温处理,将种子播入盛有双层滤纸的培养皿中,保证每皿有100粒种子,设置四次重复。自种子置入培养箱起,经过24h后开始观测发芽数,持续记录至发芽终止,当连续3d无新增发芽时结束试验,最终确定最适发芽温度。适宜发芽床的确定选取达乌里秦艽净种子,进行消毒及发芽前破除休眠处理,设置纸上、纸间、沙上和沙间四个处理,将种子播入不同发芽床的培养皿中,每皿100粒,20℃培养,四次重复,自种子置入培养箱后24h起,开始观测发芽数,持续记录至发芽终止,当连续3d无新增发芽时结束试验,最终确定最适发芽床。适宜发芽光照的确定选取达乌里秦艽净种子,进行消毒及发芽前破除休眠处理,设置12h光照和12h黑暗交替、24h光照和24h黑暗处理,将供试种子以每皿100粒均匀点播于双层滤纸培养皿中,置于20℃恒温条件下培养,共设置四次重复,自种子置入培养箱后24h起,开始观测发芽数,持续记录至发芽终止,当连续3d无新增发芽时结束试验,最终确定最适发芽光照。发芽计数时间确定最适萌发条件处理下,当发芽种子均已发育形成具备稳定结构的幼苗形态,此时便于准确区分与鉴定正常幼苗及异常幼苗的时刻,应设定为发芽试验的初始计数时间节点;当发芽率达到最大值,且之后连续3d都没新种子发芽,这个时间就是终止计数时间。2结果分析2.1真实性检验达乌里秦艽种子如图1所示,形状为矩圆形或狭矩形,种皮表面呈现光泽,呈现条纹状的细网纹饰,呈现出清晰的网眼结构,该网纹结构凸起成脊且构成网纹状;相应的种脐则位于种子基部的尖端处,圆形凹陷,断面呈现出网状结构,边缘不规则、中央微凸,同时还伴有脑状的物块突起,颜色主要分为绿色、浅褐色和深褐色3种颜色,长度范围为1.3327~1.3870mm,宽度范围为0.5370~0.5563mm,厚度范围为0.4490~0.5077mm。图SEQ图\*ARABIC1达乌里秦艽种子形态2.2扦样依据《牧草种子检验规程扦样》(GB/T2930.1-2001)的规定,应执行相应规定,送检样品的最小重量应满足含有不少于2500粒种子的条件,以保证净度检验结果的准确性。达乌里秦艽种子的千粒重测定值为0.2058~0.2087g,因此2500粒种子约重0.52~0.56g之间。为保证有足够的净种子,净度分析一份全试样的最小重量确定为1g,或者一份半试样最小重量确定为0.5g;送检样品的重量应超过净度分析量的10倍以上,送验样品的最小重量确定为20g。2.3净度分析试验所用种子经筛选分离后,样品中仍存在多种杂质及异种植物种子,主要包括植物残体(如枝叶、花瓣)、土壤颗粒、砂石以及发育不良的败育种子等。其他种子虽与达乌里秦艽种子大小近似,但可以从形态和颜色可以轻易鉴别。净度分析结果表明,达乌里秦艽种子的平均纯净度为78.91%,各重复样本间的变异系数低于5%,证实该检测方法可靠有效,分析结果见表2。表2达乌里秦艽种子净度分析样本原样品重/g净种子重/g其他种子重/g杂质重/g分析后样品重/g增失/%净度/%L12.00131.58590.09540.22551.90684.7%79.24%L22.00111.57830.10240.22791.90864.6%78.87%L32.00121.57340.09770.23451.90564.8%78.62%2.4重量测定三种不同的方法测定达乌里秦艽重量结果表明,三种方法测定后的结果均有效且不存在显著性差异(P<0.05)。达乌里秦艽种子的重量测定优先采用千粒法,该方法表现出最小的变异系数和最优的稳定性。从测定结果可以得出,达乌里秦艽种子平均千粒重在0.1870g~0.2252g之间(见表3)。表3三种方法测定达乌里秦艽种子千粒重结果比较方法千粒重(g)变异系数(CV)5%显著水平百粒法0.20780.0134a五百粒法0.21350.0121a千粒法0.20760.0076a注:小写字母代表指标的显著性(P<0.05)。2.5含水量测定达乌里秦艽种子在不同烘干条件下表现出类似的失水模式,初期脱水速率显著加快,一定时间后进入缓慢失水,最后水分变化基本趋于稳定。如图2所示,两种恒温烘干方式的水分丧失趋势基本一致,3h后含水量测定结果差异不显著。综合分析表明,高恒温处理仅需1.5h即可完成种子烘干,且水分丧失量保持稳定。因此,采用1.5h高恒温烘干作为达乌里秦艽种子含水量测定的标准方法。图2两种方法测定达乌里秦艽种子的含水量2.6生活力测定四种检测生活力方法的结果显示,无论是红墨水染色法还是纸上荧光染色法,其测得的种子生活力数值均显著低于20℃标准发芽试验结果,说明这两种染色方法对达乌里秦艽种子生活力的评估存在一定局限性。BTB染色法和TTC染色法的生活力水平高于其种子常规发芽率,而TTC染色法与其他方法结果差异显著(P<0.05),且TTC染色法,方便操作,结果清晰易观察,综合分析,TTC染色法可以作为达乌里秦艽种子活力检测的最优选择(见表4)。达乌里秦艽种子在最优染色条件(40℃,6h)下,采用0.1%、0.5%和1%三种TTC浓度处理时,染色效果与种子活力表现存在显著差异。由表4可见,种子活力随TTC浓度升高而增强,其中1%和0.5%处理组的测定值显著高于0.1%组(P<0.05)。综合分析表明,1%TTC溶液最适合用于达乌里秦艽种子的活力检测。综合达乌里秦艽种子TTC染色法的观测方式、温度、时间和染色液浓度的结果,研究最终确定,达乌里秦艽种子TTC法检测的最优参数组合包括:40℃染色温度、6h处理时间以及1%TTC浓度。表4不同方法测定达乌里秦艽种子生活力比较方法发芽率(%)生活力(%)5%显著水平TTC染色法——94.00aBTB染色法——89.67b红墨水法——45.22d纸上荧光法——18.34e20℃常规发芽68.25——c2.7达乌里秦艽种子休眠特性及萌发前处理研究2.7.1种子自然吸涨动态达乌里秦艽种子的吸水过程随时间变化呈现出明显的阶段性规律,如图3所示。首先是快速吸水期,发生在前4小时内。在此期间,种子吸水率迅速上升,至第4小时,吸水率已达到68.54%。这一阶段,种子主要依靠吸胀力进行水分吸收。第二阶段是缓慢吸水期,从4小时持续至8小时。在这个阶段,种子的吸水率上升速度明显放缓,逐渐趋向于饱和状态。最后是吸水停滞期,发生在8小时之后。此时,达乌里秦艽种子的吸水率基本保持不变,说明种子已经达到了其最大吸水能力,即吸水饱和。从整个吸水过程来看,达乌里秦艽种子表现出良好的透水性,不存在吸水障碍。这表明吸水不是限制其萌发的因素之一。这一发现对于理解达乌里秦艽种子的萌发机制以及优化其萌发条件具有重要意义。图3达乌里龙胆种子的自然吸水率2.7.2种子自然萌发对未经任何处理的达乌里秦艽种子在20℃纸上发芽,发芽率如REF_Ref23099\h图4所示,在置床后第8天露白,第9天少量发芽,到第13天发芽数大幅增加,发芽率大约在27%左右。试验第19天时,发芽率达到最大值达到60.3%,且19天后再无新种子发芽。种子发芽率与前期试验中种子活力结果有较大差异,故怀疑种子存在一定的休眠情况。图4达乌里龙胆种子的自然萌发动态2.7.3发芽前打破休眠处理浸种对达乌里秦艽种子萌发的影响如图5所示。当浸种时间为24h时,发芽率最高,为86.75%,较对照提高23.25%与其他浸种时间差异显著(P>0.05)。因此,浸种24h是此方法中提高达乌里秦艽种子发芽率最佳处理。图5不同浸种时间对达乌里秦艽种子发芽率的影响流水冲洗对种子萌发的影响达乌里秦艽种子经流水冲洗后萌发有明显促进作用,如REF_Ref24562\h表5所示。不同流水冲洗时间均能有效提前萌发开始时间,缩短萌发历期。在流水冲洗12h条件下,发芽率最高,达到88%,与其他冲洗时间的发芽率没有显著差异(P>0.05),且所有处理条件下发芽率均高于达乌里秦艽种子自然萌发率。从发芽势来看,随着冲洗时间的增加,发芽势逐渐上升。达乌里秦艽种子在不同流水冲洗时间处理下显示相同的发芽规律,且在生产实践当中,长时间流水冲洗会导致一定资源浪费。综合考虑,流水冲洗12h为此处理中提高达乌里秦艽种子萌发指标的最佳处理。表5流水冲洗时间对达乌里秦艽种子萌发的影响处理萌发开始时间/d历期/d发芽率/%发芽势/%发芽指数流水6h5.75±0.50a17.50±0.58a83.25±4.20a50.00±4.97b8.49±0.44b流水12h5.50±0.58a18.00±0.00a88.00±5.60a50.75±4.86b9.03±0.7ab流水24h5.50±0.58a18.00±0.00a87.75±0.96a49.75±5.50b8.95±0.36ab流水36h5.25±0.50a17.75±0.50a86.50±3.32a61.50±2.52a9.66±0.31a流水48h5.25±0.96a17.75±0.50a85.75±3.41a60.75±2.37a9.67±0.38a植物激素对达乌里秦艽种子萌发的影响采用不同浓度的GA3,在6h,12h,24h的时间下的达乌里秦艽种子发芽率如REF_Ref25121\h表6所示:采用不同浓度及不同浸种时间处理的发芽率较不处理的发芽率均有不同程度的提高,其中500mg/L的GA3溶液浸种24h的发芽率最高,为90.75%,与其他浓度及时间处理相比差异显著(P<0.05),因此本试验认为使用500mg/L的GA3溶液24h可有效破除达乌里秦艽种子休眠。表6不同赤霉素处理对达乌里秦艽种子发芽率的影响处理发芽率/%2h12h24h100mg/L82.75±2.99e83.50±2.08de88.25±2.06abcd200mg/L83.00±2.16e84.00±1.83cde87.75±0.50abcd300mg/L86.50±1.29abcde84.00±2.16cde86.50±2.65abcde400mg/L88.75±3.403abc84.50±2.65cde88.25±0.50abcd500mg/L89.25±4.11ab87.25±2.87abcde90.75±5.38a600mg/L86.25±4.92abcde86.00±1.83bcde88.00±1.63abcd达乌里秦艽种子经过不同浓度IAA溶液处理后发芽率明显高于不处理,但溶液浓度不同,处理效果也不同,如REF_Ref25467\h图6所示,试验结果表明,6mg/L处理的发芽率最高,为87%,与2mg/L、4mg/L处理的结果无显著差异(P>0.05),与其余几个处理差异显著(P<0.05)。10mg/L处理的发芽率最低,为77.75%。经不同浓度IAA溶液处理后达乌里秦艽种子发芽率随IAA浓度增高呈先升高后降低的趋势。因此6mg/L吲哚乙酸溶液是此方法中提高种子萌发指标的最适浸种浓度。图6不同IAA浓度对达乌里秦艽种子发芽率的影响不同浓度的NAA浸种后的达乌里秦艽种子萌发结果不同。如REF_Ref26123\h图7所示,试验结果表明,10mg/L处理的发芽率到达最高,为82.5%,与其余几个处理差异显著(P<0.05)。当溶液浓度超过30mg/L后,其发芽率均低于不处理种子的自然发芽率。不同浓度的NAA处理,随NAA浓度增高,发芽率呈低浓度促进,高浓度抑制趋势。因此10mg/L的NAA溶液是该方法中提高种子萌发指标的最适浓度。图7不同NAA浓度对达乌里秦艽种子发芽率的影响冷层积方法对达乌里秦艽种子萌发的影响达乌里秦艽种子在不同湿度,4℃恒温条件下,层积不同天数后,发芽指标如REF_Ref26319\h表7所示,在不同的湿砂处理条件下,萌发开始时间、历期、发芽率、发芽势和发芽指数均表现出一定的差异。从萌发开始时间来看,不同湿度的处理下,随着处理时间的增加,均有递减的趋势,C15、C20的萌发开始时间最早,为2.75d,与其余处理差异显著(P<0.05)。从历期来看,同湿度的不同时间处理间趋势较为平稳,但不同湿度的差异显著,随湿度的增加,历期呈递减趋势。C15处理下历期最短,为12.25d。从发芽率来看,各处理下种子发芽率均高于不处理种子,但干砂处理下发芽率整体低于其他处理。C18处理下发芽率最高,达到93%,与其他处理差异显著(P<0.05)。发芽势存在显著差异,C15处理的发芽势最高,为73.68%,C2处理的发芽势最低,为30.75%。发芽指数存在显著差异,C15处理发芽指数最高,为11.24,与C6处理的结果无显著差异(P>0.05),与其他处理差异显著(P<0.05)。综合考虑,C15处理是冷层积提高达乌里秦艽种子萌发指标的最佳处理。表7冷层积处理对达乌里秦艽种子萌发的影响处理萌发开始时间/d历期/d发芽率/%发芽势/%发芽指数C17.00±0.00a21.00±1.63a79.50±6.66g37.00±8.29gh6.85±0.74fC26.50±1.00ab21.00±0.00a85.50±5.07cdefg30.75±7.50h6.89±0.48fC36.00±0.00b19.00±0.816b80.50±1.730fg36.50±14.89gh5.11±1.07gC47.00±0.00a20.00±0.00ab84.75±6.18defg35.25±2.06gh5.01±0.55gC57.00±0.00a19.00±0.00b83.22±1.92efg45.53±3.67fg5.39±0.70gC65.00±0.00cd15.75±1.71cd89.50±5.20abcde51.50±6.564def11.07±0.91aC75.00±0.00cd14.0±0.00efg90.75±2.22abcd64.50±6.56abc9.17±0.93cdeC84.00±0.0e15.00±0.00de89.50±0.58abcde62.50±2.52bc9.23±0.43cdeC95.00±0.00cd14.75±0.50de91.79±1.69abc50.06±3.96ef8.81±0.89deC104.50±0.58de14.25±0.96ef91.50±5.00abc63.25±5.50abc9.73±1.12bcdC115.00±0.00cd16.50±0.58c89.00±1.41abcde44.25±5.80fg10.60±0.33abC125.00±0.00cd13.00±0.00gh89.00±5.35abcde63.25±9.36abc9.02±1.14deC134.25±0.50e13.00±0.00gh90.50±1.29abcd60.50±5.20bcd8.98±0.74deC144.00±0.00e14.00±0.00efg88.75±0.96abcde59.00±2.45bcde9.35±0.64cdeC152.75±0.96f12.25±0.96h92.40±7.59ab73.68±7.71a11.24±0.81aC165.25±0.50c16.75±0.50c90.25±4.35abcd45.50±5.80fg10.73±0.723abC175.00±0.00cd13.00±0.00gh86.20±1.79bcdef54.29±5.00cdef8.17±0.49eC184.5±0.577de13.00±0.00gh93.00±1.41a64.75±6.80abc9.78±0.54bcdC194.00±0.00e13.25±0.50fgh89.75±2.75abcd66.25±3.30ab10.04±0.87abcdC202.75±0.957f12.50±1.00h92.64±1.52ab68.85±2.80ab10.36±0.62abc2.8发芽实验2.8.1萌发温度的确定经过清水浸泡24h的萌发前处理后,达乌里秦艽种子在不同温度下的发芽率呈现出显著差异。如图8所示,在发芽温度设定为20℃的条件下,种子的发芽率达到峰值,为88.25%。经过分析,该结果与其他温度条件下的发芽率存在显著性差异(P<0.05)。尽管在20±5℃的温度范围内,达乌里秦艽种子均能正常发芽,但只有在20℃时,出苗情况相对整齐,幼苗生长健壮。基于发芽率和出苗整齐性的综合评估,20℃被确定为达乌里秦艽种子萌发的最佳温度条件。图8不同温度对达乌里秦艽种子发芽率的影响2.8.2发芽床的确定经过清水浸泡24h并在20℃的条件下,达乌里秦艽种子在不同发芽床下的发芽效果呈现出显著差异,结果如表8所示。在不同发芽基质比较中,沙上培养的种子表现出最优的萌发性能,发芽率达91%,该结果与沙间处理存在显著差异(P<0.05),而与纸上和纸间培养方式差异不显著(P>0.05)。尽管达乌里秦艽种子在不同发芽床处理下展现出相似的发芽规律,但在沙上和沙间处理中,种子的发芽过程相对缓慢,这为实际操作带来了一定的不便。因此,无论从发芽率还是操作简便性考虑,纸上发芽床都最适合用
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