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文档简介
ICS65.020.20
CCSB05
4114
商丘市地方标准
DB4114/T214—2023
马铃薯容器薯生产技术规程
2023-10-12发布2023-11-12实施
商丘市市场监督管理局发布
DB4114/T214—2023
目次
前言.................................................................................II
1范围...............................................................................1
2规范性引用文件.....................................................................1
3术语和定义.........................................................................1
4容器薯生产设施设备.................................................................1
5容器薯生产技术.....................................................................2
6容器薯生产.........................................................................2
附录A(资料性)容器薯生产设备清单...................................................4
附录B(资料性)常用试剂及植物生长物质的配制.........................................5
附录C(资料性)MS培养基母液成分及配制..............................................6
I
DB4114/T214—2023
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由商丘市农业农村局提出并归口。
本文件起草单位:河南德道农业科技有限公司、商丘师范学院、商丘职业技术学院、商丘市睢阳区
农业农村局、商丘市睢阳区经济作物技术推广中心、宁陵县农业农村局、商丘市梁园区农业机械发展中
心、商丘市乡村产业发展中心
本文件主要起草人:陈亚伟、马丽、纪耀坤、李淑敏、轩青霞、路楠、苏寒、刘为慧、何涛、刘靖、
李知翰、张驰
II
DB4114/T214—2023
马铃薯容器薯生产技术规程
1范围
本文件规定了马铃薯容器薯生产术语和定义、容器薯生产设施设备、容器薯生产技术、容器薯生产
等。
本文件适用于商丘市区域马铃薯容器薯生产
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB18133马铃薯种薯
GB/T29375马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程
GB/T29376马铃薯脱毒原原种繁育技术规程
NY/T401脱毒马铃薯种薯(苗)病毒检测技术规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
脱毒苗
应用茎尖组织培养技术获得的再生试管苗,经检测不带马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马
铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯A病毒(PVA)等病毒和马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)
,即为脱毒苗。
3.2
容器薯
用脱毒苗组织培养的方法,在培养容器内通过诱导生产的微型小薯。
4容器薯生产设施设备
4.1组织培养室
面积20m2〜40m2可调温,调湿,调光,消毒灭菌处理,能进行脱毒苗有光培养和暗培养诱导的培养室.
4.2容器
直径不小于6.5cm普通广口玻璃瓶.
4.3生产设备
1
DB4114/T214—2023
容器薯所需主要设备参见附录表A
4.4玻璃器皿及耗材
包括盛装器皿(烧杯、试剂瓶等)、计量器皿(量筒、容量瓶等)以及其他常用消耗品等。主要有:
试剂瓶、容量瓶、烧杯、玻璃棒、洗瓶、培养瓶及瓶盖、瓶刷、工作服、手套等。
5容器薯生产技术
5.1母液的配制与保存
配制基本培养基母液,MS基本培养基母液配制比例参见附录C。配制应使用去离子水,配好的母液
置于4℃保存,母液保存期应不超过30d。母液容器上应贴好标签,注明名称、配制日期。
5.2培养基制作
扩繁培养基:MS+蔗糖30g/L+琼脂7g,pH5.8,固体培养基。1L固体培养基加蒸馏水700mL(按
所需容量的70%左右),再加入琼脂7g,加热并不断搅拌使琼脂完全融化。加入蔗糖30g,待完全溶
解后,按附录A加入母液,再根据要求加入适量植物生长调节物质并充分搅拌,最后定容至1L。用0.1
mol/L的HCL或0.1mol/L的NaOH调节pH值至5.8。制作液体培养基的过程与固态培养基基本相同,但不需
要加琼脂,加热时间可以适当缩短。
壮苗培养基:MS+蔗糖30g/L,pH5.8,液体培养基。
试管薯诱导培养基:MS+500mg/LCCC+80g/L白糖+0.1%活性炭,pH5.8,液体培养基。
常用试剂及植物生长物质的配制见附录B。
5.3培养基灭菌
制作好的培养基分装到培养瓶中后,装入高压灭菌锅,在0.1Mpa压力下温度115℃灭菌22min,
取出后水平摆放,冷却备用。
6容器薯生产
6.1诱导材料选取
马铃薯种薯符合GB18133规定。选择具备该品种典型性状的株系,挑选植株健壮、长势良好、茎秆
粗壮、根系发达的脱毒苗作为诱导材料。
6.2脱毒苗繁育
6.2.1脱毒苗转接
马铃薯脱毒苗繁育符合GB/T29375规定。将健壮基础苗剪去顶芽和基部茎节,留中间带4个~6个
节的茎段,转入壮苗培养基用浅层静止方式培养。3周~4周后每个茎段发育成一株带有5个~7个节
的健壮苗。
6.2.2培养条件
培养室温度为白天23℃~25℃、夜间16℃~20℃,光照时间16h/d,光照强度2500Lx~4000Lx
以上。
2
DB4114/T214—2023
6.2.3病毒检测
病毒检测符合NY/T401规定。
6.3容器薯诱导
在无菌条件下,将培养瓶中原来的培养基倒掉,再注入诱导结薯培养基。在室温及光照16h/d条
件下培养48h以促进匍匐茎的形成,然后转入18℃±1℃黑暗间散射光(8h/d,光照强度500Lx~1000
Lx)培养,3d~4d后便可以产生容器薯,40d~45d容器薯发育到直径5mm以上可以收获。符合GB/T29376
规定。
6.4收获及储存
收获时将容器薯及茎段从培养瓶中取出,摘取符合收获标准的小薯,用清水多次冲洗,直至洗净
表面附着的培养基,于阴凉处阴干或烘干,再贮藏于透气的容器中,置于4℃条件下保存。容器薯经国
家法定植检部门检验合格后,方可作为商品容器种薯。
3
DB4114/T214—2023
A
A
附录A
(资料性)
容器薯生产设备清单
容器薯生产设备清单见表A.1。
表A.1容器薯生产设备清单
设备名称型号单位数量
耐高温组培筐52.5cm×42.5cm×7cm个500
钢质洗瓶槽XSC-3套4
半自动洗瓶机NH-CX-12台1
超纯水机SH-H-CSJ120台1
培养基加热炉NH-H28台1
培养基自助灌装机2D70SJ台1
超净工作台NH-CJ-2S台4
接种器具杀菌器NH-330/nH350台5
高效节能培养架NH-PYJ-10A套100
臭氧发生器120台2
生物显微镜XSP-8C台1
电子天平(1/10000g)FA1104A台1
电子天平(1/1000g)JA2103N台1
电子秤ACS-3台1
酸度计PHS-3C台1
高压灭菌锅DSX-280B台1
低温低湿柜CZ-250FC台1
智能光照培养箱GTOP-310B台1
空调新风系统KFR-35GW/BP3DNIY台2
冰箱BCD-88CM88L台1
4
DB4114/T214—2023
B
B
附录B
(资料性)
常用试剂及植物生长物质的配制
B.10.1mol/LHCl的配制:根据盐酸的密度37%盐酸溶液的密度为1.19g/mL,假设要配制1000
mL1mol/LHCl,则需要盐酸的物质的量为1mol,所以需要量取37%的盐酸为0.1*36.5/37%/1.19=8.2
mL
B.20.1mol/LNaOH的配制:称0.4gNaOH,溶于100mL蒸馏水中。
B.395%的酒精配制成75%的酒精:用量筒量取750mL的95%酒精加入200mL的蒸馏水,即可得到75%
的酒精。
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C
C
附录C
(资料性)
MS培养基母液成分及配制
MS培养基母液成分及配制见表C.1。
表C.1MS培养基母液成分及配制
配制1升MS培养基吸取
母液种类成分称取用量(g)母液定容体积(mL)
量(mL)
CaCl2(无水)3.32
KNO319.0
大量元素
KH2PO41.71000100
(A)
NH4NO316.5
MgSO4·7H2O3.7
H3BO30.620
MnSO4·H2O2.230
ZnSO4·7H2O0.860
微量元素
KI0.08310
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