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文档简介

ICS65.020.01CCSB13T/SNLT团 体 标 准T/SNLT0048-2025温室棉花单株苗期抗旱评价技术规范2025-12-08发布 2025-12-11实施石河子农产品流通协会 发布T/SNLT0048-2025T/SNLT0048-2025PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANIII目 次前 言 IV范围 1规范性引用文件 1术语和定义 1符号和缩略语 2基本要求 3温室环境 3种子质量要求 3仪器设备 3基质与试剂 3PE0迫度实验 4预实验设计 4胁迫处理 5指标测定 5浓度验证结论 6株旱标定(15%PE0迫) 7样本准备 7十项单株指标测定 7数据记录 7综合抗旱评价流程 7数据预处理 7相关性与主成分分析 8D值计算(隶属函数法) 9结果验证 10抗旱等级划分 10附录A(资料性)符号及缩略语清单 12符号清单 12缩略语清单 12附录 B(规范性)十项单株指标测定 14附录 C(资料性)温室棉花单株苗期抗旱指标测定记录表 15附录 D(规范性)温室棉花单株苗期抗旱评价数据异常值判定、处理及Grubbs临界值表 16附录目的 16异常值类型定义 16异常值判定标准与处理方法 17Grubbs临界值表(α=0.05,双尾检验) 18记录要求 19前 言GB/T1.120201本文件由新疆生产建设兵团第七师农业科学研究所提出。本文件由石河子农产品流通协会归口。T/SNLT0048-2025T/SNLT0048-2025PAGEPAGE10温室棉花单株苗期抗旱评价技术规范范围(两叶一心期(两叶一心期规范性引用文件(包括所有的修改单适用于本文件。GB4407.1 经济作物种子第1部分:纤维类GB/T8321 农药合理使用准则(所有部分)GB/T19165-2019 日光温室和塑料大棚结构与性能要求GB/T34812 作物节水灌溉气象等级棉花GB/T51057-2015 农业温室结构设计规范NY/T2544-2014 作物抗旱性鉴定评价技术规范NY/T1143播种机质量评价技术规范NY/T1276农药安全使用规范总则NY/T1925在用喷杆喷雾机质量评价技术规范JJF1070 定量包装商品净含量计量检验规则(电子天平、烘箱等仪器校准参考)术语和定义下列术语和定义适用于本文件。两叶一心期 Two-leafandone-heartstage2310~15生物学重复 Biologicalreplication3~415 PE0拟旱 15 PE0simlatddrught15%存活率 Survivalrate胁迫处理后,存活单株数占总单株数的百分比。D值 D-value基于主成分分析权重与隶属函数值计算的综合抗旱指数。单株指标相对值 Relativevalueofindividualplantindex干旱胁迫组单株指标测定均值与正常供水对照组单株指标均值的比值,用于消除品种固有生长差异。叶片相对含水量 RelativewatercontentofleafZ-score标准化 Z-scorestandardization消除指标量纲差异的数据处理方法,用于主成分分析前的数据分析预处理。主成分分析 Principalcomponentanalysis是将一组相互关联的指标进行信息浓缩,简化为少数几个主成分的多元统计分析方法。隶属函数值 Membershipfunctionvalue模糊集合中会用到的函数,是一般集合中指示函数的一般化,用于量化指标对干旱抗性的贡献程度。Grubbs检验法 Grubbstest符号和缩略语下列符号和缩略语适用于本文件,符号及缩略语清单见附录A。基本要求温室环境GB/T51057-2015GB/T19165-201985%以上,覆盖材料无破损,满足温湿度与光照的精准调控;温度要求:25±2℃,昼夜温差≤51832℃;c)60%~70%,通过通风、除湿设备控制,避免湿度过高引发病害;30~40μ・m・s12hLED3.6・m;种子质量要求棉花种子质量应符合GB4407.1的要求,选用饱满、无病虫害的种子,千粒重差异≤2%,发芽率≥85%,播种前可采用55℃温水浸种15min消毒,避免种子带菌影响育苗。仪器设备NY/T114390%,用于育苗期单粒播种;测定仪器:电子天平(0.001gJJF10701)、烘箱(控温精度±1℃,烘干室容积≥50L)、直尺(精度0.1cm,不锈钢材质防变形)、盆具(盆径20cm、高25cm,底部带3个排水孔,孔径0.5cm防土壤流失);胁迫工具:容量瓶(1000mL,A)、移液管(0.1mL,带刻度校准线)、喷壶(NY/T192580%);监控设备:温湿度记录仪(0℃~50℃、0%~100RH,精度±0.5℃、±3RH)、(0~200㏖m・5%。基质与试剂基质12130minpH6.5~7.5、有机质含量≥1.5%、速效氮≥80mg/kg、速效磷≥30mg/kg、速效钾≥100mg/kg,每盆1.8kg±5%,确保每盆基质重量一致;试剂及要求a)PE580~620;b)10μS/cm;c)GB/T83215cmPE准备工作——电子天平需提前30min预热校准;——1000mL容量瓶一只,用蒸馏水润洗3次;——烧杯;——玻璃棒;——25℃恒温水浴锅;PEG0PE0称量500mL150gPE;溶解2530min50r/min,避免产生大量气泡,至PE0定容1000mL3保存4h。PE0预实验设计供试材料随机选取5个具抗旱梯度的棉花品种,并将其设置为编号V1-强抗旱、V2-中抗旱、V3-中抗旱、V4-较敏感、V5-干旱敏感,每个品种种子经浸种消毒后催芽至露白(芽长0.5cm)后播种。处理设置PE——0%(CK,正常供水,土壤相对含水量70%~80%);——10%;——15%(目标浓度);——20%。生物学重复设置31115×4×3=60随机区组设计摆放,要求3个重复为1个区组,区组间间距50cm,避免相互干扰。育苗管理1cm28±225±2℃,每日浇水保持基质湿润。苗根系完整性保护操作(刷毛硬度≤0.1轻轻刷去附着的基质颗粒(避免刷伤须根)2~3(主根断裂长度>1cm、须根脱落(须根保留率<80);((时间≤30s,避RFW)。胁迫处理胁迫时机棉花生长至两叶一心期,选择晴朗上午9:00前开始处理。浇灌方式PEG200mL±2mL,并确保溶液均匀渗入基50mL±1mLPEG7指标测定存活率测定观测频率胁迫开始时,记录所有单株均为存活,作为基准。胁迫后第3天、第7天分别观测,以胁迫第7天的存活状态作为最终判定依据。存活标准150%绿色面积,无完全焦枯、脱落。数据计算存活率(%)=某处理存活单株数/该处理总单株数×100,结果表示为“3次重复均值±标准差”。同步验证指标RWC1cm×1cm(FW)并记254h(SW)80℃环境下烘干至恒重称干重(DW)RWC。式中:

���%)

𝑅−𝑅−

×100——叶片相对含水量,按百分比取值;DW——干重;SW——饱和鲜重;SDW10530min80℃烘6h3浓度验证结论当15%PE03V2、V3(3)60%~80%,且存活株叶片下垂角度≤45°;——差异显著性:品种间存活率、RWC、SDW的差异均达极显著水平(显著性概率值<0.01,独立样本t检验);RWC65%~75%,与大田中度干旱(50%~60%)下棉花苗RWC株旱标定(15 PE0迫)样本准备15PEG0PEG1113每个品种共6盆;生长调控:播种至两叶一心期的管理同,确保各重复单株株高差异≤10%,无病虫害;7样。十项单株指标测定基于单株抗旱指标测定的实验设计,十项单株指标测定数量遵循以下标准:a)215%PEG00%PE0(CK;b)3111(3);c)B。33数据不合并计算,仅后续计算相对值时用组内3株均值。数据记录(有误需划改并签字3C。综合抗旱评价流程数据预处理指标相对值计算331.20.8,需核查:仪器是否校准;c)确认无误后保留数据。异常值剔除采用Grubbs检验法(α=0.05),计算Grubbs统计量,公式如下:�值=|�异常−�|�式中:G值——Grubbs统计量;X异常——疑似异常值;μ ——重复数据的均值;σ 标准差。查Grubs(n=100.0=2.76若G值>2.16见附录D。数据标准化采用Z-score标准化处理指标相对值,消除量纲差异,计算公式为:式中:Z标准化后的值;X某品种某指标的相对值;μ——重复数据的均值;σ——标准差。相关性与主成分分析

�=�−��本规范中相关性分析与主成分分析(PCA)SPSS26.0R4.2.0(corrplot两种软件均可满足数据分析需求,结果具有一致性,可根据实验团队操作习惯选择使用。相关性分析10(33SFWRFWTFWPHHMSDWTDWRSRPWC),形成“品种-指标相对值”数据矩阵。10PearsonP对照结果得到答案:通过PP<0.05(此类指标与抗旱性显著相关,可用于后续抗旱评价);|r>0.重叠)1(PHHMPHPHHM主成分分析(PCA)Z-score”(即对保留的无冗余、与Z-score01),形成“品种-核心指标标准化值”数据矩阵。得到结果:输出适用性检验结果(KMOBartlettP)(各核心指标在不同主成分上的载荷系数(含单个主成分方差贡献率、累计方差贡献率)、各品种的主成分得分(每个品种在提取出的各主成分上的具体得分)。对照结果得到答案:PCAKMO>0.5BartlettP<0.001,说明核心指标间存在显著相关性,数据适合进行主成分分析;确定主成分提取数量——提取“特征值>1.0”的主成分,且需保证这些主成分的“总累计方差贡献率≥85%”(确保保留核心指标的大部分信息)85%,需增加主成分提取数量直至满足要求;公因子归类——将“主成分载荷矩阵中绝对值>0.5(SDWRDWTDW0.;1DD(隶属函数法)隶属函数值计算因本规范中10项指标均为“正向指标”(指标值越大,单株抗旱性越强),采用升型隶属函数。���)= ��−��(��)����)−��(��)式中:i(由SPSS);为所有品种该主成分得分的最小值;PCi(max)——为最大值(隶属函数值范围0~1,值越大表示该主成分对干旱抗性的贡献越大)。综合D值计算按主成分权重加权求和。式中:

=���)D±SSD为3次重复DSD0.05为稳定;� ——对一系列数值进行求和;��结果验证DD(V1D0.62±0.02V2D0.55±0.03)。得到结果:输出聚类结果树状图与聚类分组表;D聚类分组表明确标注每个品种最终所属的聚类组(1D0.5920.51≤D<0.59)。对照结果得到答案:Da)D(D0.51~0.59)b)D(12D),说明聚类结果能反映D值的内在关联;对照聚类分组与“8D8((如某聚类组品种均符合“中D0.51≤D<0.5970~90%)D(如某聚类组同时包含强抗旱型与敏感型品种(如指标标准化、主成分权重等)是否存在误差,重新验证数据。抗旱等级划分15%PE0D5D0.081。表1 温室棉花单株苗期抗旱等级划分表抗旱等级等级名称D值范围(均值±SD)存活率(%)(胁迫第7天)单株形态特征(15%PEG胁迫7天)Ⅰ强抗旱型≥0.59±0.03≥90(傍晚恢复叶色鲜绿,生长点挺拔Ⅱ中抗旱型0.55±0.04(0.51≤D<0.59)70~90中午明显萎蔫(傍晚部分恢复),叶色略暗绿,无叶片发黄Ⅲ抗旱型0.46±0.04(0.42≤D<0.50)60~70全天轻度萎蔫(无恢复),部分子叶边缘发黄,生长缓慢Ⅳ较敏感型0.36±0.05(0.31≤D<0.41)50~60全天严重萎蔫(叶片贴茎),真叶边缘焦枯,株高停滞Ⅴ敏感型<0.31±0.05<50部分单株死亡,存活株叶片大量焦枯,根系发黑腐烂附录A(资料性)符号及缩略语清单符号清单下列符号适用于本文件。符号符号名称符号注释X指标原始值指单株抗旱指标的直接测定值μ数据均值指同一指标多次重复数据的算术平均值σ数据标准差反映同一指标多次重复数据的离散程度,用于标准化处理与异常值检验PCi主成分得分指某品种在第i个主成分上的得分(由主成分分析输出),用于隶属函数值计算Σ求和符号用于综合抗旱指数(D值)的加权求和计算,即对各主成分权重与隶属函数值的乘积求和缩略语清单下列缩略语适用于本文件。缩略语缩略语名称缩略语注释引用依据PEG6000聚乙二醇6000以环氧乙烷和水缩聚而成的化学物质,分子式为HO(CH2CH2O)nH-RH相对湿度温室环境核心调控指标,反映空气中水汽含量与饱和水汽含量的比值-CK对照特指正常供水、无干旱胁迫的对照组,作为实验对比基准-RWC叶片相对含水量反映叶片水分状况,辅助判断单株干旱胁迫程度-FW鲜重叶片相对含水量(RWC)测定中,1cm×1cm叶块的初始鲜重-SW饱和鲜重叶片相对含水量(RWC)测定中,叶块浸泡饱和后的鲜重-DW干重叶片相对含水量(RWC)测定中,叶块烘干至恒重后的重量-SDW地上部干重地上部经杀青、烘干至恒重后的重量,反映地上部生物量GB/T34812SFW地上部鲜重地上部收获后经吸干表面水分的重量,直接反映地上部鲜活生物量JJF1070RFW根鲜重根系经冲洗、吸干表面水分后的重量,直接反映根系鲜活生物量JJF1070TFW总鲜重(TFW=SFW+RFW)-PHHM植株高度地上部高度从基质表面至植株顶端生长点的距离,反映单株整体生长状况从子叶节至植株顶端生长点的距离,反映地上部茎段生长状况NY/T2544NY/T2544RDW根干重根系经杀青、烘干至恒重后的重量,反映根系生物量GB/T34812TDW总干物重单株地上部干重与根干重之和,反映单株整体生物量(TDW=SDW+RDW)-缩略语缩略语名称缩略语注释引用依据RSR根冠比根干重与地上部干重的比值,保留2位小数。用来反映干旱下植株生物量向根系分配的比例。NY/T2544PWC植株含水量反映单株整体水分状况,按公式PWC(%)=(TFW-TDW)/TFW×100计算NY/T2544PCA主成分分析多元统计分析方法,用于筛选核心指标、提取主成分及计算主成分权重-KMOKaiser-Meyer-Olkin检验主成分分析适用性检验指标,KMO>0.5表明数据适合进行PCA-SD标准差即符号σ,反映数据离散程度,用于标准化处理与数据可靠性分析-附录 B(规范性)十项单株指标测定指标名称符号/缩略语精度要求数据保留规则引用依据地上部鲜重SFW电子天平精度0.001g记录原始数值JJF1070根鲜重RFW电子天平精度0.001g记录原始数值JJF1070总鲜重TFW计算SFW+RFW结果保留3位小数-植株高度PH直尺精度0.1cm记录原始数值NY/T2544地上部高度HM直尺精度0.1cm记录原始数值NY/T2544地上部干重SDW烘箱控温精度±1℃(105℃杀青30min、80℃烘干6h),电子天平精度0.001g记录原始数值GB/T34812根干重RDW烘箱控温精度±1℃(105℃杀青30min、80℃烘干6h),电子天平精度0.001g记录原始数值GB/T34812总干物重TDW计算SDW+RDW结果保留3位小数-根冠比RSR计算RDW/SDW结果保留2位小数NY/T2544植株含水量PWC计算(TFW-TDW)/TFW×100结果保留1位小数NY/T2544叶片相对含水量RWC取样:选取存活单株倒数第二片真叶,避开主脉剪取1cm×1cm叶块;--称量精度:鲜重(FW)、饱和鲜重(SW)、干重(DW)均用精度0.001g的电子天平称量,干重需80℃(控温精度±1℃)烘干至恒重;-按计算,辅助判断单株干旱胁迫程度结果保留1位小数附录 C(资料性)温室棉花单株苗期抗旱指标测定记录表品种编号:处理类型:重复编号:指标名称指标缩略语/计量单位记录结果地上部鲜重SFW(g)根鲜重RFW(g)总鲜重TFW(g)植株高度PH(cm)地上部高度HM(cm)地上部干重SDW(g)根干重RDW(g)总干物重TDW(g)根冠比RSR植株含水量PWC(%)叶片相对含水量RWC(%)测定日期: 操作人员:备注(如异常情况):附录D(规范性)温室棉花单株苗期抗旱评价数据异常值判定、处理及Grubbs临界值表附录目的SFWRDWRWC)测定数据的异常值类型、判Grubbs(α=0.05,双尾检验)D异常值类型定义573(5.3未校准或性能异常,导致指标数据偏离真实值;(7.2不规范,导致指标数据失真;(5.1温室环境、5.2)干扰,导致指标数据不符合该品种正常生长规律。异常值判定标准与处理方法表D.3 异常值判定标准与处理方法异常类型异常内容判定标准及操作要求处理方法仪器误差电子天平JJF10700.001g,称量10g30.001g;用标准砝码重新校准对该仪器测定的所有样源可靠;校准/更换仪器后,需同步记录校准结果,作为数据有效性依据。烘箱控温精度±1℃,设定温度与实际温度差值>1℃;校准温度传感器直尺如5cm)测量3次偏差>0.2cm;更换磨损直尺操作误差根系脱盆/冲洗后主根断裂长度>1cm或须根保留率<80%;(影响RFW、RDW测定,需符合正文7.2根系处理要求)-有效重复≥2(7.13次重复),用剩余数据计算均值;烘干处理10530min、806h样本30min复称差异>0.001g;-操作误差叶片取样进行RWC测定时剪取主脉区域,或叶块规格偏离1cm×1cm;叶片取样需重新选取倒1cm×1cm测RWC。若有效重复<2品种同处理的备用重复(建议按正文实验设计1求重测。生长异常单株株高低于该品种对照组均值20%(非15%PEG6000胁迫导致的生长抑制);-剔除该异常样本,启用备用重复,确保每组仍保持3次有效重复。病虫害单株出现蚜虫、立枯病等病虫害;-单株焦枯单株叶片完全焦枯(非15%PEG6000胁迫导致,如低温<18℃灼伤,违反正文5.1温室温度要求);(如“低温导致叶片焦枯”,且该品种需重新开展“7单株抗旱指标测定”实D值计算准确性。Grubbs(α=0.05,双尾检验)本表格针对正文“8.1.2α=0.05”的显著性水平要求制定,双尾检验可同时判(3及补测后可能的重复数量(4~25),直接服务于异常值统计学判定。表D.4Grubbs临界值表样本量(n)a95.00%置信水平(α=0.05)临界值b90.00%置信水平(α=0.10)临界值99.00%置信水平(α=0.01)临界值31.1531.1481.15541.4631.4251.49251.6721.6021.

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