【《花生、大豆过敏原的研究进展国内外文献综述》6900字】

花生、大豆过敏原的研究进展国内外文献综述目录TOC\o"1-3"\h\u3287花生、大豆过敏原的研究进展国内外文献综述 1197831.1花生、大豆过敏原简介 1283361.2花生、大豆过敏的危害 12531.3常见过敏原检测技术 219054（3）环介导等温扩增检测技术 5花生、大豆过敏原简介花生作为日常生活中一种常见的食物，被广泛应用于食品工业，但由于花生过敏反应的广泛性、持久性、严重性等，花生被认为是最严重的食物过敏原之一。花生过敏反应一般在儿童中发病率较高，在过去5年内，美国与英国花生过敏儿童成倍增长，概率高达1.5%ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Schmitt</Author><Year>2010</Year><RecNum>521</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[1]</style></DisplayText><record><rec-number>521</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">521</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Schmitt,DavidA.</author><author>Nesbit,JacquelineB.</author><author>Hurlburt,BarryK.</author><author>Cheng,Hsiaopo</author><author>Maleki,SoheilaJ.</author></authors></contributors><titles><title>ProcessingCanAlterthePropertiesofPeanutExtractPreparations</title><secondary-title>JournalOfAgriculturalAndFoodChemistry</secondary-title></titles><periodical><full-title>JAgricFoodChem</full-title><abbr-1>Journalofagriculturalandfoodchemistry</abbr-1></periodical><pages>1138-1143</pages><volume>58</volume><number>2</number><dates><year>2010</year><pub-dates><date>Jan27</date></pub-dates></dates><isbn>0021-8561</isbn><accession-num>WOS:000273671900064</accession-num><urls><related-urls><url><GotoISI>://WOS:000273671900064</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1021/jf902694j</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Schmitt,2010#521"1]，而且与牛奶、鸡蛋等高致敏性食物相比，花生过敏一般是终生的，即患者对花生的过敏性不会随着年龄的增长而消失ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Macdougall,2002#535"2,\o"Vereda,2011#536"3]，因此成为国内外研究的热点。大豆是一种营养丰富的食物，从20世纪60年代以来，豆粉、豆粕、大豆浓缩蛋白及大豆分离蛋白等这些大豆蛋白制品就已被开发出来，作为食物配料、饲料成分等被广泛应用ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Hei,2012#563"4-6]。目前，大豆也常常被应用于药用化妆品、制药业以及工业等。但是，大豆也是一种极易引起过敏的食物，与花生一样被列为8大过敏食物之一，全世界约有0.3%的成年人与13%的儿童对大豆过敏ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>龚育清</Author><Year>2014</Year><RecNum>500</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[7]</style></DisplayText><record><rec-number>500</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">500</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>龚育清</author><author>杨安树</author><author>陈红兵</author><author>祖琴琴</author></authors></contributors><auth-address>南昌大学食品科学与技术国家重点实验室;南昌大学中德联合研究院;</auth-address><titles><title>基于生物技术控制大豆过敏原的研究进展</title><secondary-title>食品工业科技</secondary-title></titles><periodical><full-title>食品工业科技</full-title></periodical><pages>375-379</pages><volume>35</volume><number>10</number><keywords><keyword>大豆过敏原</keyword><keyword>生物育种技术</keyword><keyword>酶法改性</keyword><keyword>微生物发酵</keyword></keywords><dates><year>2014</year></dates><isbn>1002-0306</isbn><call-num>11-1759/TS</call-num><urls></urls><remote-database-provider>Cnki</remote-database-provider></record></Cite></EndNote>[\o"龚育清,2014#500"7]，而且目前随着大豆蛋白制品的广泛使用，对大豆过敏的发病率也在不断上升。花生、大豆过敏的危害食物过敏是机体免疫系统对致敏性食物产生的异常免疫反应，可能会在一小时或者几小时内，甚至几天后出现。过敏症状表现因人而异，其严重程度不仅与食物中致敏物质的致敏强度有关，还与宿主的易感性有关。食物过敏会引起机体呼吸系统、肠胃系统、中枢神经系统、肌肉、骨骼、皮肤等的疾病，有时甚至会产生过敏性休克，严重时危及生命。食物过敏症状按照出现的快慢，可以分为以下两类：一类是速发型，此类过敏症状一般较为严重，多在进食致敏性食物半小时内出现，来势凶猛，症状表现为唇舌麻木、咽部及食道发痒、喉部阻塞，伴随哮喘发作或者全身出现荨麻疹，有的出现腹痛、腹泻、呕吐，有的出现胸闷、气急，甚至发生过敏性休克，有的会产生过敏性紫癜，严重时出现便血；另一类是缓发型，该类过敏症状一般在进食数小时后才发病，一般以食欲不振、腹痛腹泻、皮疹、黏膜溃疡及关节疼痛等症状较为多见ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>管露</Author><Year>2013</Year><RecNum>543</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[8]</style></DisplayText><record><rec-number>543</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">543</key></foreign-keys><ref-typename="Thesis">32</ref-type><contributors><authors><author>管露</author></authors><tertiary-authors><author>孙秀兰,</author></tertiary-authors></contributors><titles><title>花生过敏原的DNA生物传感检测方法的建立</title></titles><keywords><keyword>食物过敏</keyword><keyword>花生过敏原</keyword><keyword>电化学DNA传感器</keyword><keyword>茎环探针</keyword></keywords><dates><year>2013</year></dates><publisher>江南大学</publisher><work-type>硕士</work-type><urls></urls><remote-database-provider>Cnki</remote-database-provider></record></Cite></EndNote>[\o"管露,2013#543"8]。花生过敏有时会引发患者产生休克，严重时危及生命，国内外均有报导由于摄入花生食物而发生严重的过敏从而致使死亡的病例，而且易敏感人群只要摄入微量花生过敏原便可出现严重的过敏反应。大豆过敏一般表现出多种形式的症状，常见的包括过敏性皮炎、湿疹以及哮喘，另外，大豆是动物饲料的主要蛋白源，因此研究人员针对动物的大豆过敏进行研究，结果发现饲料中的大豆致敏成分会损伤动物的肠道，影响动物的新陈代谢，不利于动物的正常生长ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>朱婷</Author><Year>2013</Year><RecNum>558</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[9]</style></DisplayText><record><rec-number>558</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">558</key></foreign-keys><ref-typename="Thesis">32</ref-type><contributors><authors><author>朱婷</author></authors><tertiary-authors><author>堵国成,</author></tertiary-authors></contributors><titles><title>大豆过敏原的生物去除</title></titles><keywords><keyword>Bacillussp.BBE201108</keyword><keyword>大豆过敏原</keyword><keyword>GlymBd60K</keyword><keyword>功能特性</keyword><keyword>发酵优化</keyword></keywords><dates><year>2013</year></dates><publisher>江南大学</publisher><work-type>硕士</work-type><urls></urls><remote-database-provider>Cnki</remote-database-provider></record></Cite></EndNote>[\o"朱婷,2013#558"9]。常见过敏原检测技术对过敏体质人群来说，花生与大豆过敏有着巨大的危害，但是，目前针对过敏并没有永久性的治疗方法，标准临床处理方法包括避免食用含有相关致敏成分的食物或者通过服用抗组胺药、抗胆碱药等药物进行治疗ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Anagnostou</Author><Year>2015</Year><RecNum>522</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[10]</style></DisplayText><record><rec-number>522</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">522</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Anagnostou,Katherine</author><author>Meyer,Rosan</author><author>Fox,Adam</author><author>Shah,Neil</author></authors></contributors><titles><title>Therapidlychangingworldoffoodallergyinchildren</title><secondary-title>F1000primereports</secondary-title></titles><periodical><full-title>F1000primereports</full-title></periodical><pages>35-35</pages><volume>7</volume><dates><year>2015</year><pub-dates><date>2015</date></pub-dates></dates><isbn>2051-7599</isbn><accession-num>MEDLINE:25926986</accession-num><urls><related-urls><url><GotoISI>://MEDLINE:25926986</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.12703/p7-35</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Anagnostou,2015#522"10]。但是随着食品工业的发展以及国际化程度的提高，食物来源越来越复杂，食物中是否含有花生、大豆致敏成分以及所含致敏成分的含量成为花生及大豆过敏原检测的重点。目前针对花生与大豆过敏原的检测技术有很多，但是就检测对象而言，无非就是基于过敏原蛋白成分的检测方法以及基于过敏原DNA成分的检测方法。1.3.1基于蛋白质的过敏原检测技术酶联免疫吸附测定（Enzyme-linkedImmunosorbentAssay，ELISA）被广泛应用于花生与大豆过敏原的检测ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"吉坤美,2009#516"11-13]，其反应原理是抗原抗体的特异性反应，以酶为标记物，对抗原或抗体进行标记，然后通过显色进行定性或者定量检测。但是，花生、大豆蛋白在加工时会由于高温、酶解等过程而发生变性，导致抗体不能正确识别检测相应的过敏原，产生假阴性情况。此外，该方法样本制备时间长，易发生交叉反应，而且复杂食物基质成分会与靶标致敏原蛋白或者抗体相互作用而导致假阳性结果的产生，因此ELISA检测方法受到了一定的限制ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Toeroek</Author><Year>2015</Year><RecNum>523</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[14]</style></DisplayText><record><rec-number>523</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">523</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Toeroek,Kitti</author><author>Hajas,Livia</author><author>Horvath,Vanda</author><author>Schall,Eszter</author><author>Bugyi,Zsuzsanna</author><author>Kemeny,Sandor</author><author>Toemoeskoezi,Sandor</author></authors></contributors><titles><title>IdentificationofthefactorsaffectingtheanalyticalresultsoffoodallergenELISAmethods</title><secondary-title>EuropeanFoodResearchAndTechnology</secondary-title></titles><periodical><full-title>EuropeanFoodResearchandTechnology</full-title></periodical><pages>127-136</pages><volume>241</volume><number>1</number><dates><year>2015</year><pub-dates><date>Jul</date></pub-dates></dates><isbn>1438-2377</isbn><accession-num>WOS:000356090700013</accession-num><urls><related-urls><url><GotoISI>://WOS:000356090700013</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1007/s00217-015-2441-y</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Toeroek,2015#523"14]。免疫印迹法也常被用来检测花生及大豆过敏原ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Lewis,2005#517"15,\o"Schappi,2001#518"16]，它是一种将高分辨率凝胶电泳与免疫化学分析技术结合起来的杂交技术，其基本原理是将蛋白质转移到固相载体上，利用抗原抗体反应进行检测。由于该方法是利用抗原与抗体的识别作用，因此具有较强的特异性，但是在对过敏原进行检测时，一般会利用到患者的血清，而且检测过程的时间较长，操作步骤比较繁琐，难以对过敏原蛋白进行定量测定。液质联用技术（Liquidchromatography-massspectrometry，LC-MS）是一种利用高效液相色谱（HPLC）的高效分离能力和质谱法（MS）的高选择性和高灵敏度等优势来分析蛋白质及多肽，从而对食物中痕量致敏原进行快速、准确、灵敏检测的技术ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Yoshimitsu,2018#434"17-19]。LC-MS技术有效提高了检测的灵敏度与准确性，而且分析速度快，分离和鉴定可以同时进行，但是，该技术对操作人员要求较高，而且仪器也比较昂贵，因此其普及化应用受到了一定的限制。1.3.2基于核酸的过敏原检测技术随着食品工业的发展，目前常见的含有花生或大豆的市售商品一般都是经过加工处理制成的，如烘烤、油炸、高温加热等，这些加工方法常常会引起花生或者大豆过敏蛋白成分发生变性，导致基于蛋白质的致敏原检测方法出现假阴性结果。与蛋白质相比，DNA的结构在加热、高压等处理下能较长时间的保持稳定，因此基于DNA的过敏原检测技术常常被用来检测食品中的花生与大豆过敏原。（1）DNA提取方法DNA提取是核酸检测技术的第一步，DNA提取质量的好坏直接影响后续DNA扩增的结果。DNA提取主要包括两个步骤：组织细胞的裂解与DNA的分离纯化。组织细胞裂解主要是采用变性剂或者机械手段破坏生物组织的细胞壁与细胞膜，使DNA从细胞中释放出来。一般细胞裂解方式主要有以下三种：化学裂解法、酶解法以及物理法ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Petralia</Author><Year>2017</Year><RecNum>486</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[20]</style></DisplayText><record><rec-number>486</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">486</key><keyapp="ENWeb"db-id="">0</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Petralia,S.</author><author>Conoci,S.</author></authors></contributors><auth-address>STMicroelectronics,StradalePrimosole50,95121Catania,Italy.</auth-address><titles><title>PCRTechnologiesforPointofCareTesting:ProgressandPerspectives</title><secondary-title>ACSSens</secondary-title><alt-title>ACSsensors</alt-title></titles><periodical><full-title>ACSSens</full-title><abbr-1>ACSsensors</abbr-1></periodical><alt-periodical><full-title>ACSSens</full-title><abbr-1>ACSsensors</abbr-1></alt-periodical><pages>876-891</pages><volume>2</volume><number>7</number><dates><year>2017</year><pub-dates><date>Jul28</date></pub-dates></dates><isbn>2379-3694(Electronic) 2379-3694(Linking)</isbn><accession-num>28750519</accession-num><urls><related-urls><url>/pubmed/28750519</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1021/acssensors.7b00299</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Petralia,2017#486"20]。化学裂解法是指采用化学试剂使细胞发生裂解，从而释放出核酸的方法。常用的化学试剂包括表面活性剂、离液盐、盐溶液及碱溶液等。常用于细胞裂解的表面活性剂包括：十六烷基三甲基溴化铵（CTAB），十二烷基硫酸钠（SDS），聚乙烯吡咯烷酮（PVP），月桂酰肌氧酸钠（SLS）等，这些表面活性剂会与蛋白质、多糖等形成难溶性复合物，从而将杂质与核酸分开ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Demeke</Author><Year>2010</Year><RecNum>487</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[21]</style></DisplayText><record><rec-number>487</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">487</key><keyapp="ENWeb"db-id="">0</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Demeke,T.</author><author>Jenkins,G.R.</author></authors></contributors><auth-address>GrainResearchLaboratory,CanadianGrainCommission,1404-303MainStreet,Winnipeg,MBR3C3G8,Canada.tigst.demeke@grainscanada.gc.ca</auth-address><titles><title>InfluenceofDNAextractionmethods,PCRinhibitorsandquantificationmethodsonreal-timePCRassayofbiotechnology-derivedtraits</title><secondary-title>AnalBioanalChem</secondary-title><alt-title>Analyticalandbioanalyticalchemistry</alt-title></titles><periodical><full-title>AnalBioanalChem</full-title><abbr-1>Analyticalandbioanalyticalchemistry</abbr-1></periodical><alt-periodical><full-title>AnalBioanalChem</full-title><abbr-1>Analyticalandbioanalyticalchemistry</abbr-1></alt-periodical><pages>1977-90</pages><volume>396</volume><number>6</number><keywords><keyword>Biotechnology</keyword><keyword>ChemistryTechniques,Analytical/*methods</keyword><keyword>Crops,Agricultural/chemistry/genetics</keyword><keyword>DNA,Plant/*analysis/genetics/*isolation&purification</keyword><keyword>Plants,GeneticallyModified/chemistry/*genetics</keyword><keyword>PolymeraseChainReaction/*methods</keyword></keywords><dates><year>2010</year><pub-dates><date>Mar</date></pub-dates></dates><isbn>1618-2650(Electronic) 1618-2642(Linking)</isbn><accession-num>19789856</accession-num><urls><related-urls><url>/pubmed/19789856</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1007/s00216-009-3150-9</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Demeke,2010#487"21]。采用离液盐（如盐酸胍与异硫氰酸胍）裂解可以保护DNA分子不被核酸酶降解ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Chomczynski</Author><Year>2006</Year><RecNum>490</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[22]</style></DisplayText><record><rec-number>490</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">490</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Chomczynski,Piotr</author><author>Sacchi,Nicoletta</author></authors></contributors><titles><title>Thesingle-stepmethodofRNAisolationbyacidguanidiniumthiocyanate-phenol-chloroformextraction:twenty-somethingyearson</title><secondary-title>NatureProtocols</secondary-title></titles><periodical><full-title>NatureProtocols</full-title></periodical><pages>581-585</pages><volume>1</volume><number>2</number><dates><year>2006</year><pub-dates><date>2006</date></pub-dates></dates><isbn>1754-2189</isbn><accession-num>WOS:000251002500012</accession-num><urls><related-urls><url><GotoISI>://WOS:000251002500012</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1038/nprot.2006.83</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Chomczynski,2006#490"22]。酶解法是指采用蜗牛酶、蛋白酶K、溶菌酶等生物酶将蛋白质、多糖等大分子分解成小分子，破坏组织细胞并释放出DNA分子ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Yuan</Author><Year>2012</Year><RecNum>489</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[23]</style></DisplayText><record><rec-number>489</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">489</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Yuan,Sanqing</author><author>Cohen,DoraB.</author><author>Ravel,Jacques</author><author>Abdo,Zaid</author><author>Forney,LarryJ.</author></authors></contributors><titles><title>EvaluationofMethodsfortheExtractionandPurificationofDNAfromtheHumanMicrobiome</title><secondary-title>PlosOne</secondary-title></titles><periodical><full-title>PlosOne</full-title></periodical><volume>7</volume><number>3</number><dates><year>2012</year><pub-dates><date>Mar23</date></pub-dates></dates><isbn>1932-6203</isbn><accession-num>WOS:000304046900030</accession-num><urls><related-urls><url><GotoISI>://WOS:000304046900030</url></related-urls></urls><custom7>e33865</custom7><electronic-resource-num>10.1371/journal.pone.0033865</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Yuan,2012#489"23]。但是，这些酶需要在扩增检测之前充分失活，以免对后续检测造成干扰。物理法是指使用加热、加压、超声、球磨等机械手段使一些较难处理的样本（如真菌类样本、芽孢、孢子等）的细胞壁或者细胞膜发生破裂而释放核酸的方法ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Gross,2008#491"24-27]，但是物理法对仪器设备的要求较高，因此应用相对较少。DNA的分离纯化是指去除DNA样本中蛋白质、多糖、多酚等生物大分子以及其他次级代谢产物的过程，同时，通过分离纯化也可以除去细胞裂解过程中引入的化学变性剂。DNA的分离纯化主要有两种方式：液相法与固相法ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Thatcher</Author><Year>2015</Year><RecNum>495</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[28]</style></DisplayText><record><rec-number>495</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">495</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Thatcher,StephanieA.</author></authors></contributors><titles><title>DNA/RNAPreparationforMolecularDetection</title><secondary-title>ClinicalChemistry</secondary-title></titles><periodical><full-title>ClinicalChemistry</full-title></periodical><pages>89-99</pages><volume>61</volume><number>1</number><dates><year>2015</year><pub-dates><date>Jan</date></pub-dates></dates><isbn>0009-9147</isbn><accession-num>WOS:000352133500017</accession-num><urls><related-urls><url><GotoISI>://WOS:000352133500017</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1373/clinchem.2014.221374</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Thatcher,2015#495"28]。液相法是采用苯酚-氯仿-异戊醇（25：24：1）混合液去除样品中的蛋白质等杂质，如CTAB法与SDS法等，苯酚可以使蛋白质变性并将其保留在有机相中，而核酸分子则被保留在水相中，氯仿和异戊醇有助于相分离，使用异丙醇、醋酸钠等试剂将水相溶液中的核酸分子沉淀，再利用乙醇进行洗涤，实现核酸的纯化。该方法虽然能够得到纯度较高的核酸，但是在纯化过程中使用的苯酚、氯仿等溶液毒性较大，对人体具有一定的伤害，而且整个操作过程需要多次离心，操作较为繁琐、耗时。目前，固相法由于不需要有毒试剂的参与，被广泛应用于核酸的分离纯化。常见的固相提取法有过柱法和磁性微球法。过柱法是指利用离心、注射等过程使液体通过固相吸附材料，液体中的核酸在通过的同时被捕获到固相材料上从而与杂质分离，但是过柱法在操作过程中需要多次离心，而且该方法不利于分离较为黏稠或者厚重的样品。磁性微球是指包裹有固相吸附材料的具有顺磁性或超磁性核心的纳米粒子，对核酸具有一定的吸附作用。磁性微球法则是使用磁性纳米粒子对核酸分子进行吸附，并在外加磁场的作用下进行移动从而将核酸从溶液中分离。该方法对核酸进行分离纯化时，可以进行自动化操作，如王爱迪等人利用四氧化三铁磁珠作为分离基质，提取大豆和马铃薯深加工食品中的DNA，结果证明磁珠法提取的DNA具有良好的完整性与较高的纯度，可用于qRT-PCR扩增反应ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>王爱迪</Author><Year>2013</Year><RecNum>482</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[29]</style></DisplayText><record><rec-number>482</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">482</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>王爱迪</author><author>冉晓华</author><author>陈磊</author><author>赵卫东</author></authors></contributors><auth-address>天津大学药物科学与技术学院;天津出入境检验检疫局动植物和食品检测中心;</auth-address><titles><title>超强磁性微球提取深加工转基因食品DNA</title><secondary-title>食品科学</secondary-title></titles><periodical><full-title>食品科学</full-title></periodical><pages>122-125</pages><volume>34</volume><number>10</number><keywords><keyword>磁性微球</keyword><keyword>DNA提取</keyword><keyword>实时荧光定量聚合酶链式反应</keyword><keyword>转基因检测</keyword><keyword>深加工食品</keyword></keywords><dates><year>2013</year></dates><isbn>1002-6630</isbn><call-num>11-2206/TS</call-num><urls></urls><remote-database-provider>Cnki</remote-database-provider></record></Cite></EndNote>[\o"王爱迪,2013#482"29]。虽然上述方法可以提取得到纯度较高得DNA，但是存在一个最大的缺点是提取过程太过繁琐，用时太长。目前为了实现现场即时检测，达到检测结果原为输出的目的，大量研究人员通过改变裂解液、纯化液成分以及省略纯化步骤等方法，将DNA从组织细胞中释放后直接用于核酸扩增，如Satya等人利用NaOH溶液裂解苎麻叶片与茎组织，并直接通过稀释裂解液用于PCR扩增ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Satya</Author><Year>2013</Year><RecNum>475</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[30]</style></DisplayText><record><rec-number>475</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">475</key><keyapp="ENWeb"db-id="">0</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Satya,Pratik</author><author>Mitra,Sabyasachi</author><author>Ray,D.P.</author><author>Mahapatra,B.S.</author><author>Karan,M.</author><author>Jana,S.</author><author>Sharma,A.K.</author></authors></contributors><titles><title>RapidandinexpensiveNaOHbaseddirectPCRforamplificationofnuclearandorganelleDNAfromramie(Boehmerianivea),abastfibrecropcontainingcomplexpolysaccharides</title><secondary-title>IndustrialCropsandProducts</secondary-title></titles><periodical><full-title>IndustrialCropsandProducts</full-title></periodical><pages>532-536</pages><volume>50</volume><dates><year>2013</year></dates><isbn>09266690</isbn><urls></urls><electronic-resource-num>10.1016/j.indcrop.2013.07.049</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Satya,2013#475"30]，Chin等人利用PhusionPfuDNA聚合酶对抑制剂的强耐受性的特点，将猪肉中的沙门氏菌裂解后直接用于多重检测ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Chin,2017#476"31]，Yan等人则用棉签蘸取病原菌样本，不经过DNA提取与纯化步骤，直接将样本加入LAMP缓冲液中进行扩增，检测限可以达到102CFU/反应ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Yan,2017#477"32]。（2）聚合酶链式反应检测技术聚合酶链式反应（Polymerasechainreaction，PCR）技术由Mullis于1985年发明至今，被认为是分子生物学检测的金标准方法，在食物安全检测领域受到了广泛的应用。PCR检测技术是在DNA半保留复制的理论指导下，针对靶标DNA某一序列片段，在其上下游分别设计特异性寡核苷酸片段引物，在DNA聚合酶的作用下进行变性、退火、延伸三个步骤，经过多个循环后，靶标DNA含量发生指数型增长。PCR技术特异性好、灵敏度高，但是普通PCR只能实现定性检测，操作较为复杂。在此基础上，荧光定量PCR、巢式PCR和数字PCR（ddPCR）被开发出来用于食品中花生与大豆过敏原基因的检测。Hird等人针对花生过敏原Arah2基因设计引物和探针，建立了TaqMan荧光定量PCR检测方法，并将其应用于饼干中微量花生过敏原的检测ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Hird</Author><Year>2003</Year><RecNum>549</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[33]</style></DisplayText><record><rec-number>549</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">549</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Hird,H.</author><author>Lloyd,J.</author><author>Goodier,R.</author><author>Brown,J.</author><author>Reece,P.</author></authors></contributors><titles><title>Detectionofpeanutusingreal-timepolymerasechainreaction</title><secondary-title>EuropeanFoodResearchAndTechnology</secondary-title></titles><periodical><full-title>EuropeanFoodResearchandTechnology</full-title></periodical><pages>265-268</pages><volume>217</volume><number>3</number><dates><year>2003</year><pub-dates><date>Sep</date></pub-dates></dates><isbn>1438-2377</isbn><accession-num>WOS:000185642600015</accession-num><urls><related-urls><url><GotoISI>://WOS:000185642600015</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1007/s00217-003-0726-z</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Hird,2003#549"33]。W.

Mayer等人则采用ddPCR对大豆叶绿体DNA中的Glym过敏原基因进行检测，最低检测限为0.16mg/kgADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Mayer</Author><Year>2018</Year><RecNum>344</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[34]</style></DisplayText><record><rec-number>344</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="ta0tx2tsjs2xenefdflxsx21tzr0295rpxsa">344</key><keyapp="ENWeb"db-id="">0</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Mayer,W.</author><author>Schuller,M.</author><author>Viehauser,M.C.</author><author>Hochegger,R.</author></authors></contributors><titles><title>Quantificationoftheallergensoy(Glycinemax)infoodusingdigitaldropletPCR(ddPCR)</title><secondary-title>EuropeanFoodResearchandTechnology</secondary-title></titles><periodical><full-title>EuropeanFoodResearchandTechnology</full-title></periodical><pages>499-509</pages><volume>245</volume><number>2</number><dates><year>2018</year></dates><isbn>1438-2377 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