多种动物共患疫病生物制品-备课13

第七章细菌性生物制品病毒性生物制品寄生虫生物制品浓缩+1份铝胶配苗)配苗（5份菌液菌液培养检验灭活（强毒株）菌种的选择存在2-8℃备用。(鉴定)达标的种子应保•对符合要求的,用规定的培养基培养。进行检验的并且毒力强的1-3个品系作为菌种。性和免疫原性的,血清型相符、遗传性稳定•制备菌苗的菌种必须选择具有典型生物学特培养主要选液体静置培养法.诊断液的生产,而在疫苗的生产中菌液的大量•其中固体表面培养法多为手工式的,主要应用养法等。深层通气培养法、透析培养法、连续培固体表面培养法、液体静置培养法、•缩1倍以上。附沉淀法和羧甲基纤维沉淀法.可使菌液浓•常用的浓缩方法有离心沉淀法、氢氧化铝吸免疫效果。高单位体积活菌数，进而提高某些弱菌苗的•检验合格的菌液进行浓缩，浓缩的目的是提检查无细菌生长,方可配苗.脂斜面或马丁肉汤培养基中,置37℃培养3-5天,•为了安全起见,应取少量的灭活菌液接种于琼苯酚、结晶紫、β-丙内酯。的条件进行灭活。灭活剂有以下几种：甲醛、•根据细菌的特性加入最有效的灭活剂,在适当氏佐剂、油乳佐剂、蜂胶佐剂等。•佐剂的类型:氢氧化铝佐剂、明矾佐剂、弗的佐剂，充分混匀。类型，可在灭活的同时或之后加入适当比例•即按比例加入佐剂并充分混匀。根据佐剂的纯粹性检验配苗冻干分装检验液培养菌菌种的选择（弱毒株）攻毒，计算保护力•效力检验：免疫实验动物或本种动物后进行有无死亡及临床症状•安全检验：接种易感动物或实验动物，观察质量标准按照《成品检验的有关规定》进行检验•主要毒素：不耐热LT和耐热ST肠毒素、内毒素•尿道致病性大肠杆菌（UPEC）•抗原：菌体O、表面K、鞭毛H三种•产类志贺毒素大肠杆菌（SLTEC）•肠致病性大肠杆菌（EPEC）•败血性大肠杆菌（SEPEC）(Colibacillosis)•产肠毒素大肠杆菌（ETEC）鸡大肠杆菌病常继发于呼吸道疾病，病鸡咳嗽和呼吸困难

剖检可见气囊壁增厚

雏鹅腹气囊壁增厚病鸡腹腔内有白色干酪样渗出物-静置-浓缩-分装•配苗与分装：5份菌液+1份氢氧化铝胶+0.005%柳硫汞琼脂斜面•种子繁殖:冻干菌-马丁肉汤-麦康凯平板-混合-马丁•菌液制备:通气培养10-14h3、制造要点：佐剂、氢氧化铝和蜂胶佐剂，保护力可持续3-5个月1、常用疫苗：灭活疫苗含多种常见O抗原，佐剂包括白油抗体效价与疫苗保护力有关2、菌种：EC24、EC30、EC45、EC50、EC44（一）、鸡大肠杆菌病疫苗下注射0.5ml，1月龄的鸡免疫期为4个月。5、保存与使用：2-8℃保存，有效期1年，颈背侧皮只，观察14天，均应健活安全检验：颈部皮下或肌肉注射1日龄健康易感鸡5效力检验：按免疫原性的检验方法和判定标准进行4、质量标准：猪大肠杆菌病大肠埃希氏杆菌引起的仔猪黄痢、消瘦大肠杆菌引起的肠道肿胀、充血，大体病变无特异性C83902、C83912、C839171、菌种：制苗用C83549、C83644、C83710，检验用菌种2、制造要点：种子繁殖；菌液制备；配苗与分装（二）、猪大肠杆菌病白痢预防，免疫妊娠母猪，仔猪可获得被动免疫4、保存与使用：2-8℃保存，保存期1年。用于仔猪黄、健康易感猪，观察7天•安全检验：皮下注射5只小鼠，观察14天或肌肉注射4头K88及K99均≥40倍，987P≥160倍时合格•效力检验：用RIHA实验测定三种纤毛抗原的效价，3、质量标准：新型疫苗K88基因工程苗987P基因工程苗K88K99双价基因工程苗K88K99987P三价基因工程苗2、制造要点：种子繁殖；菌液制备；配苗与分装1、菌种：制苗用C83-1、C83-2、C83-3（三）、羊大肠杆菌病•效力检验：豚鼠保护实验或羊保护实验天，均应健活高、不食和跛行等反应，但须在48h内康复，观察10•安全检验：皮下注射2只健康易感羊，允许有体温升3、质量标准：射2ml/只，3月龄以下0.5，1ml/只防羊大肠杆菌病，免疫期5个月。三月龄以上皮下注4、保存与使用：2-8℃保存，保存期18个月。用于预二、沙门氏菌病（salmonellosis）又名副伤寒(paratyphoid)，是各种动物由沙门氏菌属细菌引起的疾病总称，临诊上多表现为败血症和肠炎，也可使怀孕母畜发生流产。许多血清型沙门氏菌，可使人感染和发生食物中毒。肝散在小坏死点

仔猪副伤寒结肠出血，甜膜坏死、脱落

抗原特征•K抗原是部分沙门氏菌的鞭毛包膜抗原，与毒力•O抗原是细胞壁表面的耐热多糖抗原，有58种•具有O、H、K抗原和菌毛抗原，O和H抗原为主要抗原成分•H抗原是沙门氏菌蛋白质性鞭毛抗原，有63种有关，称为Vi抗原•菌种：马流产沙门氏菌C77-3致弱后的毒株C355•制造要点：种子繁殖；菌液制备；配苗与分装⑴马流产沙门氏菌C355活疫苗：2、疫苗：灭活苗或弱毒疫苗凝集抗体1、病原及免疫特点：马流产沙门氏菌，感染后产生特异性（一）、马沙门氏菌病马，或未受孕的母马和公马2-8℃保存，有效期45天。用于受胎1个月以上的怀孕母•保存与使用：冻干苗2-8℃保存，有效期12个月。液体苗安全检验：腹腔注射10只小鼠，观察14天，应存活8只以上效力检验：小鼠免疫功毒保护实验•质量标准：苗冻干后活菌率须达到50%以上为合格•质量标准：液体苗和冻干苗每头份不少于50亿活菌，冻干•菌种：马流产沙门氏菌蓬红口强毒株致弱⑵马沙门氏菌流产C39弱毒苗•质量标准：微黄色浑浊液体，无杂菌，效价测定达到标准•制造要点：接种—洗下菌苔—过滤—稀释—分装•菌种：马流产沙门氏菌C77-1强毒株3、诊断制剂（凝集反应抗原）苗已试用于家禽在活体内不能生存的哺乳动物鼠伤寒沙门氏菌突变株疫3、疫苗：缺失二磷酸尿苷酶-半乳糖差向异构酶（galE）门氏菌1、病原：鸡白痢沙门氏菌、禽伤寒沙门氏菌、副伤寒沙2、免疫：产生凝集抗体和补体结合抗体（二）、禽沙门氏菌病凝集试验型和变异型菌株各一株。与抗鸡白痢沙门氏菌血清进行•菌种：从多株鸡白痢和禽伤寒沙门氏菌中筛选出的标准⑴鸡白痢禽伤寒多价染色平板抗原4、诊断制剂：平板凝集抗原凝集试验供鸡白痢和禽伤寒全血平板凝集试验和血清平板快速•保存与使用：2-8℃保存，有效期3年。使用时混匀，到标准•质量标准：紫色浑浊液体，分层，无杂菌，凝集价达晶紫乙醇溶液、甘油匀浆—分装血清进行平板凝集试验—配制成合适菌液浓度—加结适当浓度的菌液—过滤—与标准型和变异型国际标准•制造要点：接种—洗下菌苔—灭活—沉淀菌液—配成•保存与使用：2-15℃保存，有效期6个月。凝集价达到标准•质量标准：白色或带黄色的浑浊液体，分层，无杂菌，验—鸡白痢和禽伤寒菌液等量混合—分装•制造要点：接种—洗下菌苔—稀释—灭活—无菌检氏菌各1~2株•菌种：免疫原性和反应原性好的鸡白痢和禽伤寒沙门⑵鸡白痢禽伤寒多价染色平板抗原S8002-550弱毒菌株牛病沙门氏菌强毒菌株和都柏林沙门氏菌菌种为肠炎沙门氏菌都柏林变种强毒菌株、苗。疫苗：牛副伤寒灭活疫苗和牦牛副伤寒活疫牛病沙门氏菌病原：鼠伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌、（三）、牛副伤寒Pasteurellosis

主要由多杀性巴氏杆菌所引起的，发生于各种家畜、家禽和野生动物的一种传染病的总称。急性病例以败血症和炎性出血过程为主要特征。本病分布厂泛，世界各地均有发生。

病原多杀性巴氏杆菌

革兰氏染色阴性菌体多呈卵圆形，两端着色深呈两极浓染印度墨汁等染料染色时，可看到清晰的荚膜。病原特点

病畜全身各组织、体液、分泌物及排泄物里，健康家畜的上呼吸道也可能带菌。本菌对物理和化学因素的抵抗力比较低血清型荚膜(K)抗原：分为A，B，D，E和F5个血清群。菌体(0)抗原：分为12个血清型。耐热抗原：分为16个菌体型。K抗原用大写字母表示，0抗原和耐热抗原用阿拉伯数字表示。

我国对本菌的血清学鉴定表明，有A，B，D三个血清群，猪以5：A和6:B为主，牛、羊以6：B最多，家兔以7:A为主，家禽以5：A最多。

耐热抗原：家禽主要为1型，牛、羊主要为2、5型，猪主要为l型和2、5型，家兔主要为1型和3型。效检攻毒菌种C45-2•菌种：牛源C45-2、C46-2、C47-2强毒菌株数—灭活—无菌检验—配苗—分装•制造要点：种子繁殖，接种马丁肉汤—纯粹检验和活菌计（一）、牛巴氏杆菌病•保存与使用：2-8℃保存，有效期1年，免疫保护期9个月。安全检验：皮下注射5只小鼠或2只家兔，观察10天，应健活效力检验：家兔或牛免疫功毒保护实验•质量标准：的交叉免疫保护细菌只有在动物体内适度增殖时，才能产生一定

灭活苗不能产生对异种血清型理想的免疫保护，

菌体抗原免疫动物后可以产生特异性沉淀抗体体，但荚膜易丧失

荚膜可溶性多糖抗原免疫动物后能产生特异性抗（二）、猪巴氏杆菌病猪肺疫毒菌种C44-1或C44-8•菌种：猪源多杀性巴氏杆菌C44-1强毒菌株，效检攻•制造要点：同牛多杀性巴氏杆菌灭活疫苗1、猪多杀性巴氏杆菌灭活苗质量标准注射5ml，免疫保护期6个月•保存与使用：2-8℃保存，有效期1年，皮下或肌肉效力检验：家兔或猪免疫功毒保护实验安全检验：同牛多杀性巴氏杆菌灭活疫苗

(皮下注射5只小鼠或2只家兔，观察10天，应健活)丹毒杆菌C43-5，2：3混合•菌种：猪源多杀性巴氏杆菌C44-1强毒菌株，猪•免疫保护期6个月2、猪丹毒、猪多杀性巴氏杆菌病二联灭活苗制造要点：同牛多杀性巴氏杆菌灭活疫苗C44-1或C44-8菌种：多杀性巴氏杆菌EO630弱毒菌株，效检攻毒菌种3、猪多杀性巴氏杆菌病EO630活疫苗有效期6个月，免疫保护期6个月保存与使用：-15℃以下保存，有效期1年，2-8℃保存，安全检验：皮下注射2只家兔，观察10天，应健活质量标准：效力检验：小鼠、家兔或猪免疫功毒保护实验4、猪多杀性巴氏杆菌病679-230活疫苗5、猪多杀性巴氏杆菌病C20活疫苗6、猪瘟、猪丹毒、猪多杀性巴氏杆菌病三联活疫苗株感染有一定免疫效果，且免疫期不长

灭活苗在体外培养不能很好的产生交叉保护因子以及灭活

体外人工培养细菌制成灭活苗不能产生对异种血清型的交

自然感染痊愈的家禽对其它血清型具有一定程度的交叉保护力叉保护过程中可能造成某些抗原物质的丢失，只能对同血清型菌（三）禽霍乱•国内禽霍乱731弱毒株疫苗、禽霍乱G190E40弱毒苗禽多杀性巴氏杆菌病G190E40活疫苗禽多杀性巴氏杆菌病B26-T1200活疫苗禽多杀性巴氏杆菌病蜂胶灭活疫苗禽多杀性巴氏杆菌病油乳剂灭活疫苗•常用疫苗：禽多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗苗•美国有三种弱毒苗：CU株疫苗、M-9株疫苗、PM-1株疫兔巴氏杆菌病

兔出血性败血症：鼻炎、肺炎、败血症、中耳炎、结膜炎、生殖器官感染等。

兔多杀性巴氏杆菌病活疫苗活疫苗

兔病毒性出血症，兔多杀性巴氏杆菌病二联干粉灭联灭活疫苗

兔多杀性巴氏杆菌病、支气管败血博代氏菌感染二

兔、禽多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗（四）兔巴氏杆菌病猪链球菌病

猪链球菌病是由多种链球菌引起猪的一类疾病的总称。以颌下、咽部、颈部淋巴结的化脓性炎症(常见)。败血症和脑膜炎(病死率最高)。多发关节炎，心内膜炎、乳腺炎、皮下脓肿等疾病。于C抗原外层，又称表面抗原，与免疫有关。

型特异性抗原：细胞壁的蛋白质成分，位属的细菌有交叉免疫性

核蛋白抗原：非特异性抗原，与葡萄球菌

群特异性抗原：细胞壁的多糖成分，半抗原抗原性清中出现沉淀抗体和补体结合抗体。抗体。一般接种疫苗后14d产生坚强免疫力，血康复猪具有坚强的免疫保护，感染猪可产生体液根据荚膜抗原的差异，猪链球菌有35个血清型常见有败血性病和淋巴结脓肿病原及免疫特性纯粹性检验-配苗-分装红细胞全血和0.2%葡萄糖的缓冲肉汤-活菌计数、制造要点：鲜血平板-缓冲肉汤-含1-4%裂解C74-37

菌种：制苗用菌种为弱毒ST171,效检用C74-63或猪败血性链球菌病活疫苗释后使用，皮下注射，免疫期6个月

保存与使用：2-8℃，1a：-15℃，18个月；稀

质量标准：安全检验：接种猪或小鼠效力检验：攻毒保护试验化铝制苗1-2%的血清或血红素的缓冲肉汤-检验-加入氢氧

制造要点：血液琼脂-缓冲肉汤-含0.2%葡萄糖和

菌种：羊链球菌C5501和C5502羊败血性链球菌病灭活疫苗（二）、羊败血性链球菌病期6个月。

保存与使用：2-8℃，1.5a；稀释后皮下注射，免疫效力检验：静脉免疫羊后攻毒

质量标准：安全检验：皮下注射家兔混匀,分装%的血清或血红素-检验-菌液7份加蔗糖明胶稳定剂1份,制造要点：血液琼脂-缓冲肉汤-含0.2%葡萄糖和1-2菌种：羊链球菌弱毒株F60，效力检验用C5501和C5502羊败血性链球菌病活疫苗12个月

保存与使用：2-8℃，24个月；尾根皮下注射，免疫期效力检验：尾根皮下免疫羊后攻毒质量标准：安全检验：皮下注射家兔或绵羊

口蹄疫狂犬病流行性乙型脑炎流感轮状病毒感染口蹄疫(FMD)

口蹄疫：偶蹄兽的一种急性发热性高度接触性传染病，症状是口腔粘膜、蹄部和乳房皮肤发生水疱和溃烂。本病在世界各地均有发生，目前在非洲、亚洲和南美洲流行较严重。动物感染本病将导致其生产性能下降约25%，由此而带来的贸易限制和卫生处理等费用更难以估算。

口蹄疫病毒属于微核糖核酸病毒科的口蹄疫病毒属。本病毒是已知最小的动物RNA病毒。病毒粒子直径为20一25nm。RNA呈单股线状决定病毒的感染性和遗传性，病毒蛋白质决定其抗原性、免疫性和血清学反应。病原

口蹄疫病毒含有4种主要多肤(VP1一VP4)。与中和抗体以及抗感染有关的是VP1只有完整病毒粒子和空衣壳有良好的免疫原性，与VP1本身立体结构有关。血清型及免疫多型性、易变性口蹄疫病毒目前有A、O、C、SAT1、SAT2、SAT3以及AsiaI型等7个血清型，以O型最常见各型间彼此几乎没有交叉免疫性每一个血清型又分若于亚型，同型各亚型之间仅有部分交叉免疫性病毒分布及培养口蹄疫病毒在病畜的水疱皮内及其淋巴液中含毒量最高末断乳小鼠对本病非常敏感，是能查出病料中少量病毒最好的实验动物。4一6日龄的乳鼠，皮下或腹腔接种口蹄疫病毒可用犊牛肾细胞、仔猪肾细胞、仓鼠肾细胞等几十种细胞培养培养方法：单层细胞培养和深层悬浮培养，用传代细胞，如幼仓鼠肾细胞(BHK21)试验动物连续传代-制备弱毒苗接种幼鼠或乳兔-鸡胚或鸭胚-采其含毒组织制造灭活苗

第二代疫苗：试验动物含毒组织疫苗-疫苗中加入甘油发病牛的舌水疱皮-抗血清-甲醛灭活苗-氢氧化铝吸附

第一代疫苗：宿主动物病损组织苗苗、重组活病毒疫苗和抗独特型抗体疫苗

第四代疫苗：分子水平疫苗-基因工程疫苗、多肽疫牛肾、猪肾原代细胞BHK21、IBRS2、IFFA3等细胞系

第三代疫苗：组织培养-细胞苗PCR和核酸序列分析等核酸杂交、探针、寡核苷酸指纹图、等电聚焦、间接血凝试验和免疫扩散沉淀试验•诊断制剂：（Rabies）

俗称疯狗病，是由病毒引起的一种急性接触性传染病。临诊特征是神经兴奋和意识障碍，继之局部或全身麻痹而死。重要的人兽共患病，病死率达100%。本病在世界很多国家存在，造成人畜死亡。近年来不少国家由于采取了疫苗接种及综合防制措施，已宣布消灭了此病。我国部分省市和地区亦有本病的发生。病原病毒属于弹状病毒科、狂犬病病毒属。病毒粒子呈枪弹形或试管状病毒粒子是由三个同心层构成的囊膜和被其包围着的呈螺旋对称的核蛋白壳所构成囊膜的最外层包含有由糖蛋白构成的纤突，具有抗原性，能刺激机体产生中和抗体和使病毒吸附在宿主细胞上，故与病毒的感染和免疫有关。

病毒在动物体内主要存在于中枢神经组织唾液腺和唾液内。在唾液腺和中枢神经(尤其在脑海马角、大脑皮层、小脑)细胞的胞浆内形成狂犬病特异的包涵体，叫内基氏小体，呈圆形或卵圆形，染色后呈嗜酸性反应。

病毒可在大鼠、小鼠、家兔和鸡胚等脑组织及仓鼠肾、猪肾及人的二倍体细胞上培养。病毒通过实验动物的继代，能减弱其对人畜的毒力，并可用来制备弱毒疫苗。毒是否安全滤后36℃脱毒7d，稀释后脑内接种小鼠，检查脱及1%苯酚的蒸馏水按1：4制备脑组织乳剂，过•制造要点：无菌检验、毒价测定，用含60%甘油•种毒：巴黎株狂犬固定毒通过兔脑传代作为种毒。Semple分装冻干检查无菌和毒价，按1：1加入5%蔗糖脱脂牛奶，混合

制造要点：BHK21细胞上增殖培养，冻融后收集培养物

种毒：Flury株狂犬病鸡胚低代毒（LEP）12435678PB2PB1RNPRNAM2M1NAHA分节段的（-）SSRNAPA

RNA多聚酶核糖核蛋白（RNP）禽流感日本乙型脑炎

本病又称流行性乙型脑炎（乙脑）是由日本脑炎病毒引起的人畜共患传染病。马：脑炎猪：流产、死胎、睾丸炎人：脑炎、高热、头痛、颈强直、共济失调等其它动物：隐性感染日本乙型脑炎病毒1．属黄病毒科，黄病毒属，直径35-40nm。2．有囊膜，其表面突起具有血凝性。3．本病毒能在小鼠组织内传代，最适宜鸡胚卵黄囊内增殖。病原传染源：带毒动物在毒血症阶段(不论有无症状均出现病毒血症3~7天)猪：感染率为100%，对人乙型脑炎流行有促进作用马：感染率为：90%蚊：可带毒过冬，经卵传代，作为长期贮存宿主传播途径：蚊子叮咬，库蚊特别是三带喙库蚊（主要传播媒介）流行病学易感动物：马、猪、牛、羊、鸡、鸭各野鸟都可感染。马最易发病,

人次之（隐性感染多，出现症状的约为0.5~1‰）其它动物，隐性感染。季节性：严格季节性，7~9月（90%的病例）

症状：

发病率低，隐性感染多。潜伏期4~15天,T：39.5~41.0℃，精神沉郁，食欲废绝，并于1~2天体温下降而趋向恢复正常，持续高热病例出现神经症状，预后不良。神经症状有麻痹、痉挛、狂燥、沉郁、嗜眠等。多数死亡，即使恢复也残留弱视、麻痹等后遗症。马日本乙型脑炎症状：妊娠母猪：流产或早产，胎儿多是死胎，大小不等或木乃伊胎。种公猪：发热，睾丸肿胀（多为单侧性）。病变：流产或早产胎儿：神经细胞变性为主的重度非化脓性炎症。母猪：轻度非化脓性炎脑炎。

猪日本乙型脑炎