DB1302∕T 423－2015 鲜板栗中58种农药残留量的测定 液相色谱-质谱∕质谱法

B60

DB1302

唐山市地方标准

DB1302/T423—2015

鲜板栗中58种农药残留量的测定

液相色谱-质谱/质谱法

2015-11-25发布2015-12-25实施

唐山市质量技术监督局发布

DB1302/T423—2015

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由唐山市质量技术监督局提出。

本标准由唐山出入境检验检疫局归口。

本标准起草单位：中华人民共和国唐山出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：侯霞、赵雁冰、鲁学军、宿雅彬、崔奕杰、杨红、李梅、李帅男。

I

DB1302/T423—2015

鲜板栗中58种农药残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法

1范围

本标准规定了鲜板栗中58种农药残留量液相色谱-质谱/质谱测定方法。

本标准适用于鲜板栗中58种农药残留量的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡

是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

鲜板栗经乙腈均质提取，经ENVIC18+PSA固相萃取柱净化，用乙腈洗脱，氮吹后液相色谱-质谱/质谱仪

检测，外标法定量。

4试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1乙腈：色谱纯。

4.2甲醇：色谱纯。

4.3氯化钠。

4.4无水硫酸钠：用前在650℃灼烧4h，贮于干燥器中，冷却后备用。

4.5ENVI-18柱：12mL，2.0g或相当者，用10mL乙腈预淋活化。

4.6PSA柱：6mL，500mg或相当者，用10mL乙腈预淋活化。

4.7标准物质：纯度≥95%。

4.8标准贮备溶液：1.0mg/mL。称取适量的标准物质(4.7)，用甲醇溶解并配制成1.0mg/mL的标准贮备液。

避光保存于4℃冰箱中。

4.9标准工作溶液：根据农药在仪器上的响应灵敏度确定混合标准溶液中各农药的浓度，避光保存于4℃冰

箱中。

4.10基质混合标准工作溶液：将适量混合标准工作溶液用样品空白基质提取液定容到1.0mL，混匀，配成基

质混合标准工作溶液，现用现配。

4.11有机相微孔滤膜：0.22µm。

5仪器

5.1液相色谱-串联质谱仪:配有电喷雾离子源（ESI）。

5.2分析天平：感量为0.01g。

5.3均质器：转速不低于10000r/min。

5.4离心机：转速不低于5000r/min。

5.5固相萃取装置。

5.6旋转蒸发仪。

5.7氮气吹干仪。

1

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5.8鸡心瓶：200mL。

5.9聚丙烯具塞离心管：100mL。

6试样的制备与保存

6.1试样的制备

取有代表性鲜板栗样品约0.5kg，将可食部分用组织捣碎机充分捣碎混匀分成两份，装入洁净容器作为

试样，密封，标明标记。

6.2试样保存

将试样置于-18℃冷冻保存。

7测定步骤

7.1待测样品溶液的制备

称取鲜板栗样品5g（精确至0.01g）于100mL聚丙烯具塞离心管（5.9）中，加入5g氯化钠（4.3）、20

mL乙腈（4.1），在10000r/min下均质提取1min，在4000r/min下离心5min，将上清液倒入鸡心瓶（5.8）

中，重复提取一次，在45℃水浴下旋转蒸发浓缩至约1mL，待净化。

7.2净化

在ENVI-18柱（4.5）上加2cm无水硫酸钠（4.4），用10mL乙腈（4.1）预淋活化，下接活化好的PSA柱

（4.6）。将上述浓缩液转移到已活化的ENVI-18+PSA串联柱上，控制过柱速度在1mL/min以内。用3×2mL

乙腈（4.1）洗涤鸡心瓶，并将洗涤液移入串联柱中，再用20mL乙腈洗脱，收集洗脱液。在45℃水浴下旋转

蒸发浓缩至约0.5mL，将浓缩液置于氮气吹干仪上吹干，用1.0mL甲醇溶液定容，超声溶解，经0.22µm滤膜

过滤后，供液相色谱-质谱/质谱测定。

7.3测定

7.3.1液相色谱-质谱/质谱参考条件

7.3.1.1色谱条件

a）色谱柱：2.1mm×100mm，2.7µm，C18或相当者；

b）进样量：5.0µL；

c）柱温：30℃。

流动相及梯度见表1。

表1流动相及梯度

流速/流动相A流动相B

时间/min

（μL/min）（0.1%甲酸、2mmol/L乙酸铵水)/%（甲醇）/%

0.0300982

1.03003070

8.03003070

20.0300298

25.0300298

25.5300982

30.0300982

7.3.1.2质谱条件

a)电离源及电压：A组：ESI+源，5500V；B组：ESI-源，-4500V；

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b)离子源温度（TEM）：550℃；

c)扫描方式：A组：正离子扫描；B组：负离子扫描；

d)检测方式：多反应监测；

e)雾化气：氮气；

f)喷雾气流速（GAS1）：45psi；

g)辅助加热气流速（GAS2）：55psi；

h)气帘气流速（CUR）：35psi；

i)测定农药的参考保留时间和参考质谱条件见附录A。

7.3.2液相色谱-质谱/质谱测定

7.3.2.1定性确证

在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间与混合基质标准校准溶液中对应组分的保留时间相一致。

且样品谱图中各组分的相对离子丰度与浓度接近的混合基质标准校准溶液谱图中对应的相对离子丰度进行比

较，偏差不超过表2规定的范围，则可判定样品中存在对应的待测物。

表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度KK＞50%20%<K<50%10%<K<20%K≤10%

允许的最大偏差±20%±25%±30%±50%

7.3.2.2定量测定

外标法定量：在仪器最佳工作条件下，混合基质标准溶液进样测定，以混合基质标准溶液浓度为横坐标，

以峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对待测样品进行定量，样品溶液中待测物的响应值

均应在仪器测定的线性范围内。标准物质多反应监测(MRM)色谱图见附录B。

7.4平行试验

按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。

7.5空白实验

除不称取试样外，其余均按上述步骤进行。

8结果计算

结果按（1）式计算：

V1000

X=C××…………（1）

m1000

式中：

X试样中被测组分残留量，单位为微克每千克（µg/kg）；

C从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；

V样品溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）；

m样品溶液所代表的试样质量，单位为克（g）。

注：计算结果应扣除空白值。

9线性、测定低限和回收率

9.1线性、测定低限

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本方法的线性和测定低限见附表C。

9.2回收率

本方法在阴性样品中添加标准溶液，进行添加回收率试验，各农药的回收率为60.0%～108.5%。

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附录A

（资料性附录）

测定农药的参考保留时间和参考质谱条件

A.1农药的参考保留时间和参考质谱条件

见表A.1。

表A.1农药的参考保留时间和参考质谱条件

参考保

序号农药名称留时间定量离子对定性离子对DP/（V）CE/(V)CXP/(V)

/(min)

A组

1甲氰菊酯17.8367∕125.2367∕125.2;367∕18160:6025:4012:12

2氯氰菊酯18.8433.3∕191.1433.3∕191.1;433.3∕416.350:5023:1610:10

3多菌灵4.71192.4∕160192.4∕160;192.4∕131.940:4025:4012:12

4阿维菌素20.0895.4∕751.6895.4∕751.6;895.4∕449.350:5057:6328:28

5吡虫啉5.42256∕209.1256∕209.1;256∕175.190:9025:2813:13

6辛硫磷11.6299∕129.1299∕129.1;299∕11580:8030:3012:12

7涕灭威5.99213∕89213∕89;213∕11630:3024:1712:12

8三唑磷8.60314.1∕162314.1∕162;314.1∕11950:5028:5012:12

9异丙威6.93194.1∕95194.1∕95;194.1∕13750:5022:1512:12

10烯酰吗啉8.12388∕301388∕301;388∕16550:5030:4512:12

11乐果5.59230∕199230∕199;230∕12520:2014:2813:13

12乙酰甲胺磷3.08184/143184/143;184/11360:6013:3012:12

13莠去津7.06215.8∕174215.8∕174;215.8∕103.960:6033:3612:12

14敌敌畏6.31221∕127.1221∕127.1;221∕109100:10025:2515:15

15氰戊菊酯19.0437.2∕125.1437.2∕125.1;437.2∕18130:3055:5520:20

16溴氰菊酯18.8523∕281.1523∕281.1;523∕174.250:5023:4012:12

17氯菊酯20.3408∕183.1408∕183.1;408∕168.140:4025:6412:12

18毒死蜱16.3349.7∕198.1349.7∕198.1;349.7∕9787:8730:4614:14

19氟硅唑9.47316∕165316∕165;316∕24770:7037:2712:12

20茚虫威13.6528∕249528∕249;528∕21830:3023:3212:12

21克百威6.35222.3∕123.1222.3∕123.1;222.3∕165.185:8530:1812:12

22啶虫脒5.59223∕126223∕126;223∕9080:8030:4812:12

23戊唑醇10.2308∕125308∕125;308∕7050:5050:3212:12

24苯醚甲环唑12.5406.2∕251.1406.2∕251.1;406.2∕18850:5035:6012:12

25灭线磷8.93243.1∕131243.1∕131;243.1∕9750:5027:4612:12

26高效氯氰菊酯18.8433.1/191433.1/191;433.1/41650:5021:1419:15

27异菌脲9.31330∕245330∕245;330∕288130:13019:2420:20

28氟虫腈9.63437.1∕368437.1∕368;437.1∕290170:17026:3712:12

29哒螨灵18.9365.1∕147.3365.1∕147.3;365.1∕309.225:2535:2012:12

30灭幼脲10.3309∕139.1309∕139.1;309∕15680:8040:2512:12

31噻虫嗪5.08292∕211292∕211;292∕18140:4020:3015:15

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表A.1（续）农药的参考保留时间和参考质谱条件

32灭多威5.00163∕106163∕106;163∕8840:4015:1615:15

33对硫磷9.98292∕236292∕236;292∕26440:4022:1615:15

34甲拌磷11.4261/75261/75;261/14340:4020:2515:15

35乙草胺8.96270∕148270∕148;270∕22470:7029:1312:12

36嘧菌酯7.61404∕372404∕372;404∕344.170:7020:3512:12

37扑草净7.14242.3∕158.2242.3∕158.2;242.3∕200.2220:22035:2512:12

38杀扑磷7.36303∕145.1303∕145.1;303∕85100:10015:3012:12

39嗪螨酮17.3368∕231.3368∕231.3;368∕175.150:5016:2012:12

40噻螨酮16.2353∕168.1353∕168.1;353∕228.160:6035:2212:12

41四螨嗪11.9303∕138.1303∕138.1;303∕156.260:6022:2012:12

42甲草胺9.17270∕238270∕238;270∕16250:5013:2712:12

43保棉磷7.56318∕125318∕125;318∕16050:5028:1112:12

44联苯三唑磷11.5338∕70338∕70;338∕26950:5015:1312:12

45甲基毒死蜱12.6322∕125322∕125;322∕29050:5029:2312:12

46绿麦隆6.94213∕72213∕72;213∕14050:5028:3312:12

47杀螟硫磷8.61278∕125278∕125;278∕24650:5029:2312:12

48烯唑醇12.0326∕70326∕70;326∕159160:16035:4212:12

49甲硫威7.94226∕121226∕121;226∕169110:11026:1512:12

50腈菌唑8.32289∕125289∕125;289∕70120:12045:2512:12

51三唑酮8.31294∕69294∕69;294∕19750:5028:2212:12

52嘧菌磺胺8.51226∕93226∕93;226∕108140:14037:3812:12

53增效醚15.4356∕177356∕177;356∕11950:5011:4712:12

54精吡磺草隆15.0384∕282384∕282;384∕32850:5028:2312:12

55除虫脲9.70311∕158311∕158;311∕14150:5020:4312:12

56氯虫苯甲酰胺7.32484∕453484∕453;484∕28650:5024:2012:12

B组

57水胺硫磷6.91288∕228288∕228;288∕214-50:-50-10:-10-13:-13

58嗪胺灵6.99431∕231431∕231;431∕117-140:-140-10:-10-18:-18

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附录B

（资料性附录）

标准物质多反应监测(MRM)色谱图

B.1标准物质多反应监测(MRM)色谱图

见图B.1。

1.甲氰菊酯(367.000/125.200Da)2.氯氰菊酯(433.300/191.100Da)

3.多菌灵(192.400/160.000Da)4.阿维菌素(895.400/751.600Da)

5.吡虫啉(256.000/209.100Da)6.辛硫磷(299.000/129.100Da)

7.涕灭威(213.000/89.000Da)8.三唑磷(314.100/162.000Da)

9.异丙威(194.100/95.000Da)10.烯酰吗啉(388.000/301.000Da)

B.1标准物质多反应监测(MRM)色谱图

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11.乐果(230.000/199.000Da)12.乙酰甲胺磷(184.200/143.000Da)

13.莠去津(215.800/174.000Da)14.敌敌畏(221.000/127.100Da)

15.氰戊菊酯(437.200/125.100Da)16.溴氰菊酯(523.000/281.100Da)

17.氯菊酯(408.000/183.100Da)18.毒死蜱(349.700/198.100Da)

19.氟硅唑(316.000/165.000Da)20.茚虫威(528.000/249.000Da)

21.克百威(222.300/123.100Da)22.啶虫脒(223.000/126.000Da)

B.1（续）标准物质多反应监测(MRM)色谱图

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23.戊唑醇(308.000/125.000Da)24.苯醚甲环唑(406.200/251.100Da)

25.灭线磷(243.100/131.000Da)26.高效氯氰菊酯(433.100/191.000Da)

27.异菌脲(330.000/245.000Da)28.氟虫腈(437.100/368.000Da)

29.哒螨灵(365.100/147.300Da)30.灭幼脲(309.000/139.100Da)

31.噻虫嗪(292.000/211.000Da)32.灭多威(163.000/106.000Da)

33.对硫磷(292.000/236.000Da)34.甲拌磷(261.000/75.000Da)

B.1（续）标准物质多反应监测(MRM)色谱图

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35.乙草胺(270.000/224.000Da)36.嘧菌酯(404.000/372.000Da)

37.扑草净(242.300/158.200Da)38.杀扑磷(303.000/145.100Da)

39.嗪螨酮(368.000/231.300Da)40.噻螨酮(353.000/168.100Da)

41.四螨嗪(303.000/138.100Da)42.甲草胺(270.000/238.000Da)

43.保棉磷(318.000/125.000Da)44.联苯三唑磷(338.000/70.000Da)

45.甲基毒死蜱(322.000/125.000Da)46.绿麦隆(213.000/72.000Da)

B.1（续）标准物质多反应监测(MRM)色谱图

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47.杀螟硫磷(278.000/125.000Da)48.烯唑醇(326.000/70.000Da)

49.甲硫威(226.000/121.000Da)50.腈菌唑(289.000/125.000Da)

51.三唑酮(294.000/69.000Da)52.嘧菌磺胺(226.000/93.000Da)

53.增效醚(356.000/177.000Da)54.精吡磺草隆(384.000/282.000Da)

55.除虫脲(311.000/158.000Da)56.氯虫苯甲酰胺(484.000/453.000Da)

57.水胺硫磷(288.000/228.000Da)58.嗪胺灵(431.000/231.000Da)

图B.1（续）标准物质多反应监测(MRM)色谱图

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附录C

（资料性附录）

线性和测定低限

C.1线性和测定低限

见表C.1。

表C.1线性和测定低限

序号药品名称线性方程测定低限/(μg/kg)线性范围/(μg/kg)相关系数

1甲氰菊酯Y=1.56*105X+7.63*10552.5～500.9961

2氯氰菊酯Y=2.55*104X-5.53*1052010～2000.9972

3多菌灵Y=2.17*104X-2.99*1032.51.25～62.50.9987

4阿维菌素Y=4.17*103X-2.28*10452.5～750.9952

5吡虫啉Y=6.22*104X-6.11*10442～240.9957

6辛硫磷Y=9.41*104X-2.25*10542～600.9955

7涕灭威Y=5.97*103X+1.08*1052010～1200.9991

8三唑磷Y=1.07*106X-9.68*1040.50.25～50.9986

9异丙威Y=3.21*105X+1.87*1040.50.25～50.9958

10烯酰吗啉Y=2.58*105X-1.53*1050.50.25～50.9965

11乐果Y=2.99*105X-5.93*1040.50.25～30.9985

12乙酰甲胺磷Y=2.03*105X-3.84*1055.02.5～500.9998

13莠去津Y=1.06*105X+4.43*10542～400.9974

14敌敌畏Y=1.06*105X+1.45*10552.5～750.9984

15氰戊菊酯Y=2.23*103X+2.85*1052010～2000.9979

16溴氰菊酯Y=2.44*104X+3.22*1042010～2000.9980

17氯菊酯Y=3.14*104X+1.26*1052010～2000.9912

18毒死蜱Y=8.19*104X-8.93*10452.5～500.9937

19氟硅唑Y=2.11*105X-1.94*10510.5～100.9905

20茚虫威Y=3.6*104X-1.72*10552.5～750.9967

21克百威Y=3.78*105X+7.46*1030.50.25～50.9957

22啶虫脒Y=2.69*105X+2.356*1040.50.25～7.50.9962

23戊唑醇Y=3.09*104X-1.03*10410.5～500.9936

24苯醚甲环唑Y=1.91*105X-4.87*10552.5～500.9958

25灭线磷Y=3.18*105X-1.39*10510.5～100.9922

26高效氯氰菊酯Y=8.34*103X-7.57*1042010～2000.9986

27异菌脲Y=3.53*104X-1.37*105105～1000.9900

28氟虫腈Y=1.44*104X-2.68*10452.5～750.9951

29哒螨灵Y=5.15*105X-1.42*10410.5～150.9973

30灭幼脲Y=1.02*105X-9.72*10410.5～150.9939

31噻虫嗪Y=1.13*105X+6.28*1040.50.25～7.50.9924

32灭多威Y=1.21*105X+1.02*1040.50.25～12.50.9968

33对硫磷Y=5.05*104X+2.52*10552.5～750.9914

34甲拌磷Y=1.75*105X+3.2*10584～480.9950

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