戴安U3000高效液相色谱仪系统组成与操作指南

20XX/XX/XX戴安U3000高效液相色谱仪系统组成与操作指南汇报人:XXXCONTENTS目录01

仪器概述02

系统硬件组成03

操作环境要求04

样品与流动相准备CONTENTS目录05

开机与系统启动06

核心模块参数设置07

系统维护与注意事项08

关机流程01仪器概述戴安U3000HPLC应用领域生物样品分析

适用于复杂生物基质中活性成分、代谢物的分离检测，如蛋白质组学研究中的多肽分离，依托其高灵敏度和分辨率。环境监测领域

可对水体、土壤中的污染物（如农药残留、持久性有机污染物）进行定性定量分析，流动相过滤与脱气步骤确保检测准确性。食品检测领域

用于食品中添加剂、兽药残留、真菌毒素等分析，样品需经0.45μm滤膜过滤，保障系统不受污染且结果可靠。化学化工领域

支持化工产品的纯度分析及反应过程监控，双梯度系统可灵活实现复杂样品的多维分离，提升分析效率。制药行业应用

满足药物研发、生产及质量控制需求，如原料药含量测定、有关物质检查，严格的系统清洗流程（含无机盐流动相使用后需甲醇/水清洗）确保数据稳定性。主要技术参数

流速范围200–10,000µL/min压力范围0.1–50MPA(7250psi)梯度延迟体积690µL,360µL检测范围190-900nm最大采样速度100Hz噪音<±2.5µAUat254nm飘移<0.1mAU/h核心性能特点双梯度系统设计具备独特的双梯度系统，支持串联或并联工作模式，可轻松实现多维分离与在线固相萃取方法开发，兼容现有分析方法。高样品处理通量配备全自动进样器，支持高效样品序列运行，结合快速方法切换装置，显著提升实验室样品处理效率与灵活性。宽流速与压力范围流速范围覆盖200–10,000µL/min，压力范围达0.1–50MPa(7250psi)，满足常规分析至半制备的多样化应用需求。高精度检测性能检测器波长范围190-900nm，最大采样速度100Hz，噪音<±2.5µAU（254nm），漂移<0.1mAU/h，确保高灵敏度与数据稳定性。02系统硬件组成输液泵模块

核心功能与技术参数作为流动相输送核心部件，支持流速范围200–10,000µL/min，压力控制范围0.1–50MPa(7250psi)，具备精准的流量稳定性和梯度混合能力，适配等度与梯度洗脱模式。

操作控制与气泡排除通过Chromeleon工作站设置流动相比例和流速，支持溶剂通道独立控制；配备Purge阀排气功能，拧松混合器Purge阀后点击工作站"Purge"按钮可快速排除流路气泡，确保输液平稳。

流速调节与压力保护采用步进式流速调整（建议0.2ml/min步进，每步平衡0.5分钟以上），压力上下限可设置（常规下限8psi、上限280psi），当比例调整幅度超40%时需分阶段过渡，防止系统冲击。

维护与清洗要求日常需保持泵头清洗液（5%-10%甲醇水溶液）充足，每批样品分析前后需冲洗流路；含无机盐/酸流动相使用后，需依次用5%甲醇水冲洗30min、100%甲醇冲洗30min，避免盐结晶堵塞。自动进样器基本功能与连接自动进样器是戴安U3000液相色谱系统的样品引入核心部件，需在控制面板中点击“连接”按钮建立与工作站的通讯。其主要功能包括样品瓶盘控制、进样针操作及温度控制，支持FullLoop（满环）和Partial（部分环）两种进样模式，满足不同进样体积需求。温度控制在“温箱控制”模块可设置样品瓶所需的温度参数，确保样品在分析过程中处于稳定的温度环境，减少温度波动对检测结果的影响。进样针维护若注射器内存在气泡，可通过点击“灌注针”功能排除气泡；进样前需进行“清洗针”操作，保持进样针洁净，避免样品交叉污染。对于满环进样（如20uL），需在“更多选项”的“进样模式”中选择“FullLoop”。样品盘操作通过“盘控制”命令可实现样品盘的移动，点击“移动盘到前部”可将样品瓶托盘送至操作位置，便于放置试样瓶；样品分析时需确保托盘盖关闭，且仅在非批处理状态下进行样品盘操作。柱温箱柱温箱基本功能用于设置并控制色谱柱的温度，确保分离过程在稳定的温度条件下进行，提高分析结果的重复性和准确性。柱温设置时机在仪器电源打开后，应及时将柱温箱温度设置到预定值并启动，以保证在系统平衡和样品分析过程中温度稳定。温度设置方式在Chromeleon工作站控制面板的“Col.p”下进行柱温参数的设定，根据实验方法要求输入所需温度值。待机状态流速要求柱温箱在待机状态时，系统流速最低需达到0.5ml/min，以维持柱温箱的正常运行和温度稳定性。检测器系统

紫外检测器（VWD）核心配置标配氘灯，支持190-900nm波长范围，具备快速光谱扫描功能。使用前需提前开启氘灯预热，基线稳定时间通常需20分钟以上，噪音水平<±2.5µAU（254nm条件下）。

荧光检测器（FLD）可选配置作为紫外检测器的扩展模块，适用于高灵敏度荧光标记化合物检测。需在控制面板中独立设置激发光与发射光波长，开机后需预热30分钟确保信号稳定。

检测器参数设置规范通过Chromeleon工作站"检测器"面板设置波长（如254nm、280nm等特征波长）、信号采集频率（最高100Hz）及显示范围（常规设置-5～100mV），支持多波长同时采集。

基线采集与稳定性判断系统平衡后点击蓝色圆点图标启动基线采集，需观察20分钟以上，当基线漂移<0.1mAU/h且无明显杂峰干扰时，方可进入样品分析阶段。辅助设备

01稳压电源为仪器提供稳定电力输入，如JJW-3KVA稳压器，开机后需等待2-3分钟稳定，确保仪器各部件正常运行。

02废液处理装置用于收集仪器运行过程中产生的废液，使用前需确认废液瓶连接及废液管通畅，保证实验环境安全。

03超声波清洗器用于流动相脱气，功率≥200W、频率≥40KHZ，超声时水位需高于流动相瓶水位，时间约10-20分钟，避免温度过高导致溶剂挥发。

04过滤装置包含有机系和水系0.45μm滤膜，分别用于有机相和水相（含缓冲盐）流动相的过滤，去除杂质颗粒，保护色谱系统。

05样品瓶与托盘放置待分析样品，自动进样器样品盘可移动，放置样品时需在进样针清洗结束且进样阀处于“Inject”位置时操作，确保进样准确。03操作环境要求电源与电压工作电压要求戴安U3000高效液相色谱仪操作条件中明确规定，电压需满足220V。稳压电源使用规范应先打开稳压电源，如JJW-3KVA稳压器“ON”位置，等2-3分钟稳定后，再按下相关蓄电池电源前面板的“ON”，继续等待2-3分钟。开机电源顺序先打开仪器各部件（如泵、自动进样器、检测器）后面板电源线下方的电源开关，仪器自检成功后，再打开电脑。温湿度控制

环境温度要求仪器运行环境温度需控制在10－40℃范围内，以确保各部件稳定工作，避免温度波动对检测结果准确性产生影响。

环境湿度要求相对湿度应保持在10％-85%之间，适宜的湿度环境可防止仪器内部元件受潮损坏，同时避免静电等不良现象的发生。

温湿度控制重要性温湿度的稳定控制是保证高效液相色谱分析结果可靠性的基础条件之一，不符合要求的温湿度可能导致基线漂移、保留时间变化等问题。实验室环境规范

供电要求需接入220V稳压电源，如JJW-3KVA稳压器，开机后需稳定2-3分钟再启动后续设备，确保仪器供电稳定。

温湿度控制工作环境温度范围为10－40℃，相对湿度需保持在10％-85%，以保障仪器电子元件及色谱柱性能稳定。

洁净度要求实验台面需保持清洁干燥，避免灰尘污染流动相和样品。操作区域应远离强电磁干扰源及腐蚀性气体。

安全操作空间仪器周围需预留足够操作空间，特别是泵混合器、Purge阀等部件的操作区域，确保排气泡、更换流动相等操作可安全进行。04样品与流动相准备样品预处理流程

样品过滤要求所有样品必须经过0.45μm滤膜过滤，以去除颗粒物杂质，避免堵塞色谱柱和影响检测结果准确性。

流动相预处理规范流动相（色谱纯除外）需经0.45μm滤膜过滤，并进行超声脱气处理，超声时间建议为10-20分钟，功率≥200W，频率≥40KHZ。

特殊流动相处理含无机盐或酸的流动相必须临用新配，使用后需按规定清洗系统；有机相用有机系滤膜，水相或缓冲盐用水系滤膜分别过滤。流动相配制要求

过滤要求有机相需使用有机系0.45μm滤膜过滤，水相或缓冲盐使用水系0.45μm滤膜过滤（色谱纯除外）。

脱气处理过滤后的流动相需进行超声脱气，超声时间约10-20分钟，避免超声温度过高导致有机相挥发。

特殊流动相配制含缓冲盐或酸的流动相必须临用新配；泵后密封圈清洗液为5%-10%甲醇溶液，需定期更换（如一周2次）。

保存条件一般流动相可保存3天，含缓冲盐的流动相需现配现用，避免长菌或成分变化影响分析结果。过滤与脱气操作流动相过滤要求流动相（色谱纯除外）需经0.45μm滤膜过滤，有机相用有机系滤膜，水相或缓冲盐用水系滤膜，防止颗粒物堵塞系统。样品过滤要求样品必须通过0.45μm滤膜过滤处理，避免样品中的杂质污染色谱柱和影响检测结果准确性。流动相超声脱气操作过滤后的流动相需超声脱气10-20分钟，功率≥200W、频率≥40KHZ，水位高于流动相瓶内液位，避免超声时间过长导致溶剂挥发。特殊流动相处理含无机盐或酸的流动相使用前必须过滤脱气，且每天使用后需按规定程序清洗系统，防止盐结晶损坏仪器。05开机与系统启动开机顺序01开启稳压电源将稳压电源输入端插头插在墙上插孔，按下前面板“ON”键，等待约1分钟稳定供电。02启动仪器各部件电源依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器等仪器后面板电源线下方的电源开关，仪器将自动进行自检，待各部分自检成功后进入待机状态。03启动电脑及工作站打开电脑，等待约1-2分钟，待电脑右下角服务器监测器由黄色变为灰色后，双击桌面“变色龙Chromeleon”图标，进入工作站。04连接仪器与软件在工作站根目录点击快捷栏内“defaultpaneltabset”，展开“MyComputer”选择“ChromeleonServer”并点击“OK”，建立软件与仪器各部件的连接。Chromeleon软件启动

电脑与服务器状态确认打开电脑，待电脑右下角服务器监测器由黄色变为灰色，确保服务器启动完成。

进入工作站系统双击桌面“变色龙Chromeleon”图标，进入工作站根目录界面。

控制界面加载点击快捷栏内“defaultpaneltabset”，展开“MyComputer”并选择“ChromeleonServer”，点击“OK”进入仪器控制界面。系统连接与自检

01电源与硬件连接首先打开稳压电源，待2-3分钟稳定后开启仪器各部件（泵、自动进样器、检测器等）电源开关，检查电源线、数据线和输液管连接是否正常，确保仪器处于待自检状态。

02电脑与工作站启动打开电脑，等待5-7分钟稳定后，双击桌面“变色龙Chromeleon”图标启动工作站。待电脑右下角服务器监测器由黄色变为灰色，表明软件启动成功，可进入控制界面。

03仪器自检与状态确认仪器开机后自动进行自检，需确认各部件（泵、进样器、柱温箱、检测器）自检成功。在软件控制面板主页点击“连接全部”，确保泵、进样器、检测器等显示“Connected”状态，无报错信息。

04通讯状态验证在工作站根目录下，点开“MyComputer”前加号，选择“ChromeleonServer”并点击“OK”，成功出现控制界面，表明软件与仪器各模块通讯正常，可进行后续参数设置。06核心模块参数设置泵参数配置流速设置根据实验方法要求，在泵控制界面设定流速，一般以0.2ml/min的步进速度（每个平衡点保持0.5分钟以上时间）进行流速的增加，达到目标流速后需平衡至压力稳定。流动相比例设置在“Pump”下设置各通道流动相比例，若为梯度洗脱，需按方法要求设定不同时间点的流动相比例；比例调整幅度大于40%时，应分两步或两步以上过渡调整。压力上下限设置根据色谱柱耐受范围，设置压力下限（如8左右）和上限（如280左右），防止系统压力异常对仪器和色谱柱造成损坏。排气泡操作若流路内有气泡，拧松泵混合器上的“Purge”阀，点击控制界面“Purgeoff”前的按钮快速排气泡，待气泡排完后停止排气，拧紧“Purge”阀。柱温箱温度设定设定时机与基本操作仪器电源打开后，应及时进入柱温箱控制界面进行温度设定。在方法要求使用柱温箱时，需将温度设置到预定值并启动，以确保色谱柱在稳定温度环境下工作。温度参数的系统平衡设置温度后，柱温箱需一定时间达到设定温度并稳定。通常在仪器平衡阶段（如泵流速达到0.6ml/min并平衡后），柱温箱应已处于稳定状态，保障分析过程中保留时间的重现性。默认温度与特殊要求若实验方法未明确要求柱温，默认柱温箱温度可设为30℃。实际操作中需严格遵循具体分析方法规定的温度参数，避免因温度波动影响分离效果和定量准确性。检测器参数设置

检测器类型选择与连接在Chromeleon工作站控制面板中，点击"检测器"模块并选择对应类型（如VWD紫外检测器），点击"连接"按钮建立软件与硬件通讯，待状态显示"Connected"确认连接成功。

检测波长设定在检测器控制界面"波长"设置栏输入目标检测波长（如254nm），若需多波长检测可通过"设置波长"向导添加多个检测通道，设置完成后点击"应用"保存参数。

光源控制与预热点击"紫外灯"按钮开启氘灯（可见光检测需开启可见灯），建议预热30分钟以上确保光源稳定；关闭软件或断开连接前需先关闭光源，避免频繁启停影响灯寿命。

信号采集参数配置在方法编辑过程中，选择"采集信号"类型为检测器对应通道（如VWD1），设置采集频率（如10Hz）及数据存储路径，通过"信号显示"模块实时监控基线波动范围（常规设置为-5～100mV）。07系统维护与注意事项日常维护规程

流动相及样品处理维护流动相需经0.45μm滤膜过滤（色谱纯除外）并超声脱气20分钟；样品须经0.45μm滤膜过滤；含缓冲盐的流动相需临用新配，避免长菌。

泵系统维护泵密封圈清洗液为1:9甲醇/水，每周更换2次；流路有气泡时，拧松Purge阀，以3.00ml/min流速Purge排气；含盐流动相使用后，需用5%甲醇水冲洗30min，再用100%甲醇冲洗30min。

进样器维护自动进样器每周更换10%甲醇水溶液作为清洗液；进样前需灌注注射器、清洗缓冲环及进样针，确保无残留污染；样品瓶使用后及时清洗并干燥存放。

色谱柱及检测器维护色谱柱避免使用100%纯水冲洗，最低需含5%甲醇或乙腈；检测器氘灯按需开启，基线稳定后方可进样；柱温箱使用时需提前设置温度并待稳定。

仪器关机与开机维护关机前依次用5%甲醇水冲洗10min，再换流动相平衡；开机时先开稳压电源，待稳定后开仪器各部件电源，最后启动电脑及Chromeleon工作站；长期不用时，每月开机运行1次维护程序。流动相更换周期

含缓冲盐流动相含缓冲盐或酸的流动相必须临用新配，使用当天需更换，不可长时间存放。

纯有机相流动相色谱纯有机相流动相可适当延长使用时间，但建议不超过3天，使用前需确认无沉淀或变质。

混合流动相（不含盐）一般混合流动相（不含缓冲盐）可保存3天，使用前需检查是否有分层、沉淀，必要时重新过滤脱气。

清洗液更换要求泵后密封圈清洗液（5%-10%甲醇溶液）建议每周更换2次，确保清洗效果，防止密封圈堵塞或损坏。常见故障排除

泵系统故障：压力异常若压力过高，检查色谱柱是否堵塞或流路是否有异物；