电穿孔在基因编辑中的应用-洞察及研究

1/1电穿孔在基因编辑中的应用第一部分电穿孔技术概述 2第二部分基因编辑技术背景 4第三部分电穿孔应用于基因编辑的优势 9第四部分电穿孔操作原理解析 12第五部分电穿孔与CRISPR-Cas9技术结合 16第六部分电穿孔在动物基因编辑中的应用 19第七部分电穿孔在植物基因编辑中的应用 22第八部分电穿孔技术未来发展趋势 26

第一部分电穿孔技术概述

电穿孔技术在基因编辑中的应用

电穿孔技术是一种通过电场诱导细胞膜发生瞬间的通透性改变，从而实现物质跨膜传递的一种技术。在基因编辑领域，电穿孔技术被广泛应用于将外源DNA或RNA等物质导入细胞内，实现基因的敲除、敲减或替换等操作。本文将简要概述电穿孔技术的原理、方法以及应用。

一、电穿孔技术的原理

电穿孔技术是基于电场作用对细胞膜产生瞬时通透性的原理。在电场的作用下，细胞膜上的磷脂双层结构会形成瞬时孔洞，从而导致离子和分子等物质跨膜传递。电穿孔过程中，电场强度、脉冲宽度、电场频率等参数对孔洞的形成和维持具有显著影响。

二、电穿孔技术的方法

1.电穿孔仪：电穿孔技术通常采用电穿孔仪进行操作。电穿孔仪可以输出不同电压、频率和脉冲宽度的电脉冲，从而实现电穿孔过程。

2.电穿孔介质：电穿孔介质是指用于电穿孔操作的溶液，主要包括细胞培养液、缓冲液等。电穿孔介质的性质对电穿孔效率具有重要影响。

3.电穿孔参数：电穿孔参数主要包括电场强度、脉冲宽度、电场频率等。电场强度是影响电穿孔效率的主要因素，通常在100～1000V/cm范围内。脉冲宽度是指电脉冲持续时间，一般为几十毫秒。电场频率是指电脉冲的重复频率，一般为1Hz～10Hz。

三、电穿孔技术在基因编辑中的应用

1.基因敲除：电穿孔技术可以将外源DNA片段导入细胞内，与细胞内的基因组发生同源重组，从而实现基因敲除。例如，CRISPR/Cas9系统是目前应用最为广泛的基因编辑技术之一，通过电穿孔将Cas9蛋白和sgRNA导入细胞内，实现基因敲除。

2.基因敲减：电穿孔技术可以将外源RNA片段导入细胞内，通过与靶基因mRNA结合，实现基因敲减。例如，RNA干扰（RNAi）技术通过电穿孔将siRNA导入细胞内，实现基因敲减。

3.基因替换：电穿孔技术可以将外源DNA片段导入细胞内，与细胞内的基因组发生同源重组，实现基因替换。例如，通过电穿孔将靶向基因的修复片段导入细胞内，实现基因替换。

4.基因治疗：电穿孔技术在基因治疗领域具有广泛的应用前景。通过电穿孔将目的基因导入患者体内，可以治疗遗传性疾病、癌症等疾病。例如，利用电穿孔技术将治疗性基因导入肿瘤细胞，实现肿瘤的基因治疗。

四、电穿孔技术的优势与局限性

1.优势：电穿孔技术具有操作简单、效率高、适用范围广等优势。此外，电穿孔技术在基因编辑领域具有较高的成功率和较低的细胞毒性。

2.局限性：电穿孔技术也存在一定的局限性，如对细胞损伤较大、电穿孔效率受细胞类型、DNA和RNA分子大小等因素影响等。

总之，电穿孔技术在基因编辑领域具有广泛的应用前景。随着电穿孔技术的发展和优化，其在基因编辑、基因治疗等领域的应用将越来越广泛。第二部分基因编辑技术背景

基因编辑技术背景

随着生物学和生物技术的快速发展，基因编辑技术已成为现代生物学研究的重要手段。基因编辑技术可以通过精确地修改或替换基因序列，实现对生物遗传信息的精确调控，从而在疾病治疗、生物育种、生物制药等领域展现出巨大的应用潜力。本文将介绍电穿孔技术在基因编辑中的应用，并对其背景进行阐述。

一、基因编辑技术的起源与发展

1.重组DNA技术的诞生

20世纪70年代，重组DNA技术的出现为基因编辑技术的诞生奠定了基础。通过将不同来源的DNA片段连接起来，科学家们能够将外源基因导入到宿主细胞中，实现对基因的精确操作。

2.限制性核酸内切酶的应用

限制性核酸内切酶（RestrictionEnzymes）是基因编辑技术中的重要工具，它们能够识别特定的DNA序列，并在该序列处切割DNA链。这一发现使得科学家能够精确地切割DNA分子，为基因编辑技术的应用提供了基础。

3.基因敲除和基因敲入技术

在20世纪80年代，科学家们成功地将基因敲除和基因敲入技术应用于基因编辑。这些技术通过引入特定的DNA序列，实现对目标基因的精确修改或替换。

4.CRISPR-Cas9技术的兴起

2012年，CRISPR-Cas9技术的发现标志着基因编辑技术进入了一个新的阶段。CRISPR-Cas9系统是一种基于细菌免疫机制的基因编辑技术，具有操作简单、成本较低、效率高、特异性强等优点。这一技术的出现使得基因编辑变得更加广泛和便捷。

二、电穿孔技术在基因编辑中的应用

1.电穿孔技术的原理

电穿孔技术是一种利用电场使细胞膜暂时性的通透性增加，从而实现外源DNA分子进入细胞的技术。在这一过程中，电场产生的瞬时高压会导致细胞膜上的脂质双层发生重构，形成短暂的孔隙，使得DNA分子得以进入细胞内部。

2.电穿孔技术在基因编辑中的应用优势

（1）操作简便：电穿孔技术无需复杂的设备，操作过程简单易行。

（2）应用范围广：电穿孔技术适用于多种细胞类型，包括真核细胞和原核细胞。

（3）效率较高：电穿孔技术具有较高的DNA转化效率，能够快速实现外源DNA分子的导入。

（4）特异性强：电穿孔技术结合基因编辑工具，可以实现外源DNA分子的精确导入和编辑。

三、电穿孔技术在基因编辑中的挑战与展望

1.电穿孔技术的挑战

（1）细胞损伤：电穿孔过程中，电场产生的瞬时高压可能导致细胞膜损伤，影响细胞活力。

（2）电穿孔效率不均：电穿孔效率受细胞类型、DNA分子大小等因素影响，导致电穿孔效果不均。

（3）基因编辑的脱靶效应：电穿孔技术结合基因编辑工具时，可能存在脱靶效应，影响基因编辑的准确性。

2.电穿孔技术在基因编辑中的展望

（1）优化电穿孔技术：通过优化电穿孔设备、优化电场参数等方式，提高电穿孔效率，降低细胞损伤。

（2）提高基因编辑特异性：结合新型基因编辑工具，提高基因编辑的特异性，减少脱靶效应。

（3）拓展应用领域：电穿孔技术在基因编辑领域的应用将不断拓展，为疾病治疗、生物育种、生物制药等领域提供更多可能性。

总之，基因编辑技术在生物学和生物技术领域具有广泛的应用前景。电穿孔技术在基因编辑中的应用，为基因编辑技术的推广和应用提供了有力支持。随着技术的不断发展和完善，基因编辑技术将为人类带来更多福祉。第三部分电穿孔应用于基因编辑的优势

电穿孔技术在基因编辑中的应用优势

一、概述

基因编辑技术是近年来生物科学领域的重要突破，其中电穿孔技术作为一种高效的基因导入方法，在基因编辑中扮演着关键角色。相较于传统的基因导入方法，电穿孔技术在基因编辑中具有显著的优势，本文将对其进行详细阐述。

二、电穿孔技术在基因编辑中的应用优势

1.高效的基因导入效率

电穿孔技术是将外源DNA通过电场作用，使细胞膜产生瞬时孔隙，从而实现外源DNA与细胞内DNA的重组。相较于传统的基因导入方法，如化学转染、显微注射等，电穿孔技术在基因导入效率上具有显著优势。

根据相关研究，电穿孔技术在基因编辑中的导入效率可达到90%以上，而传统的化学转染方法，其效率仅为20%左右。这说明电穿孔技术在基因导入方面具有更高的效率。

2.广泛的细胞适用性

电穿孔技术具有广泛的细胞适用性，适用于多种细胞类型，如原代细胞、细胞系等。这一特点使得电穿孔技术在基因编辑中具有更广泛的应用前景。

研究表明，电穿孔技术在基因编辑中的细胞适用性得到了充分验证。例如，电穿孔技术在人胚胎干细胞、小鼠胚胎干细胞、癌细胞等多种细胞类型中均取得了良好的基因编辑效果。

3.可控的基因编辑深度

电穿孔技术可以通过调节电场强度、脉冲时间等参数，实现对基因编辑深度的精确调控。这一特点使得电穿孔技术在基因编辑中的应用更具灵活性。

相关研究表明，电穿孔技术在基因编辑中的应用可以使基因编辑深度保持在一定范围内，避免过度编辑导致的基因突变或细胞死亡。例如，在一项针对人类胚胎干细胞的基因编辑实验中，通过调节电穿孔参数，成功实现了对特定基因的精确编辑，且未对细胞造成明显损伤。

4.低毒副作用

相较于传统的基因导入方法，电穿孔技术在基因编辑中的应用具有较低的毒副作用。这是因为电穿孔技术是通过电场作用实现基因导入，无需使用化学试剂，从而降低了细胞损伤和突变的风险。

据相关研究，电穿孔技术在基因编辑中的应用，细胞死亡率仅为0.5%左右，远低于传统的化学转染方法。这说明电穿孔技术在基因编辑中的应用具有更低的毒副作用。

5.可重复性强

电穿孔技术在基因编辑中的应用具有可重复性强的特点。这是因为电穿孔技术操作简单，参数可控，便于实验的重复进行。

在一项针对电穿孔技术在基因编辑中应用的研究中，研究人员在同一批次细胞中进行了多次电穿孔操作，结果显示，基因编辑效果稳定，可重复性良好。

6.经济高效

电穿孔技术相较于传统的基因导入方法，具有更高的经济性和效率。电穿孔设备操作简便，且可重复使用，降低了实验成本。

据一项针对电穿孔技术在基因编辑中应用的成本分析，结果显示，电穿孔技术在基因编辑中的应用成本仅为化学转染方法的1/10左右。

三、结论

综上所述，电穿孔技术在基因编辑中具有以下优势：高效、广泛适用、可控、低毒副作用、可重复性强、经济高效。这些优势使得电穿孔技术在基因编辑领域具有广泛的应用前景。随着生物科学技术的不断发展，电穿孔技术在基因编辑中的应用将得到进一步的拓展和深化。第四部分电穿孔操作原理解析

电穿孔技术在基因编辑领域中的应用日益广泛，其操作原理解析对于理解该技术的实际应用具有重要意义。本文将从电穿孔的基本概念、电穿孔操作的原理及影响因素等方面进行详细阐述。

一、电穿孔的基本概念

电穿孔技术是利用电场对细胞膜施加瞬时高压，使细胞膜产生可逆性孔洞，从而实现细胞内外物质交换的一种技术。电穿孔技术在基因编辑中的应用，主要是通过电穿孔将外源DNA或RNA等基因物质导入细胞内，实现基因的转移和表达。

二、电穿孔操作的原理

1.电场作用

电穿孔操作过程中，细胞膜上的电荷会在电场作用下发生重新分布。当电场强度达到一定阈值时，细胞膜上的电荷密度将超过介电饱和，导致细胞膜产生瞬时可逆性孔洞。这一过程中，电场强度、电脉冲宽度、电脉冲频率等因素都会影响电穿孔效果。

2.孔洞形成

当电场强度超过细胞膜的介电强度时，细胞膜上的电荷密度增加，使得细胞膜发生形变。在形变过程中，细胞膜上出现局部应力集中，形成瞬时可逆性孔洞。这些孔洞具有以下特点：

（1）可逆性：电穿孔过程中形成的孔洞在电场消失后能够自然闭合，不会对细胞造成永久性损伤；

（2）方向性：孔洞主要在细胞膜与电场方向垂直的平面形成；

（3）数量：孔洞数量与电场强度、电脉冲宽度等因素有关。

3.物质交换

电穿孔孔洞的形成使得细胞内外物质交换成为可能。在此过程中，外源DNA或RNA等基因物质可以通过孔洞进入细胞内部，与细胞内的DNA或RNA等分子发生相互作用，从而实现基因编辑。

三、影响电穿孔操作的因素

1.电场强度

电场强度是影响电穿孔效果的关键因素。一般认为，电场强度在1-3kV/cm范围内时，电穿孔效果较好。过高或过低的电场强度都会降低电穿孔效率。

2.电脉冲宽度

电脉冲宽度决定了电穿孔过程中孔洞形成的时间。一般而言，电脉冲宽度在100-300μs范围内时，电穿孔效果较好。

3.电脉冲频率

电脉冲频率是指单位时间内电脉冲的个数。电脉冲频率过高或过低都会影响电穿孔效果。一般认为，电脉冲频率在1-10Hz范围内时，电穿孔效果较好。

4.温度

温度是影响电穿孔操作的一个重要因素。过高或过低的温度都会降低电穿孔效果。一般认为，电穿孔操作的最佳温度在25-37℃范围内。

5.细胞类型与状态

不同类型的细胞和细胞状态对电穿孔操作的敏感性存在差异。例如，哺乳动物细胞的电穿孔效果优于植物细胞，细胞活力高的细胞对电穿孔操作更敏感。

综上所述，电穿孔操作原理主要包括电场作用、孔洞形成和物质交换。影响电穿孔操作的因素有电场强度、电脉冲宽度、电脉冲频率、温度、细胞类型与状态等。了解和掌握这些因素对于提高电穿孔技术在基因编辑领域的应用效果具有重要意义。第五部分电穿孔与CRISPR-Cas9技术结合

电穿孔技术在基因编辑领域中的应用

一、引言

随着分子生物学技术的不断发展，基因编辑技术已经成为现代生物技术领域的研究热点。CRISPR-Cas9技术作为一种高效、便捷的基因编辑工具，在基因治疗、基因敲除和基因功能分析等方面得到了广泛应用。然而，CRISPR-Cas9技术在基因编辑过程中存在一定的局限性，如转染效率低、细胞毒性高等。因此，如何提高CRISPR-Cas9技术的转染效率，降低其细胞毒性，成为当前研究的热点。电穿孔技术在基因编辑领域中的应用为解决这一问题提供了新的思路。

二、电穿孔技术原理

电穿孔技术是一种利用电脉冲在细胞膜上形成瞬时孔道，实现外源DNA或RNA等物质进入细胞的技术。电穿孔技术在基因编辑中的应用原理如下：

1.电脉冲产生：首先，通过电穿孔仪产生电脉冲。

2.细胞膜穿孔：电脉冲作用下，细胞膜上形成瞬时孔道。

3.外源物质进入：外源DNA或RNA等物质通过瞬时孔道进入细胞内。

4.DNA或RNA与靶标DNA结合：外源DNA或RNA与靶标DNA结合，进行相应的基因编辑过程。

三、电穿孔与CRISPR-Cas9技术结合的优势

1.提高转染效率：电穿孔技术具有高效、便捷的特点，可以有效提高CRISPR-Cas9技术的转染效率。研究发现，电穿孔技术可以使CRISPR-Cas9系统的转染效率提高10-100倍。

2.降低细胞毒性：CRISPR-Cas9技术本身存在一定的细胞毒性。电穿孔技术通过优化电脉冲参数，可以降低CRISPR-Cas9技术的细胞毒性，提高基因编辑的安全性。

3.扩大适用范围：电穿孔技术在基因编辑中的应用可以扩大CRISPR-Cas9技术的适用范围。例如，在难以转染的细胞类型中使用电穿孔技术结合CRISPR-Cas9技术，可以提高基因编辑的效率。

4.提高基因编辑的准确性：电穿孔技术结合CRISPR-Cas9技术可以进一步提高基因编辑的准确性。研究发现，电穿孔技术可以提高CRISPR-Cas9系统的编辑效率，降低脱靶效应。

四、电穿孔与CRISPR-Cas9技术结合的应用实例

1.基因治疗：电穿孔技术结合CRISPR-Cas9技术可以用于基因治疗。例如，将CRISPR-Cas9系统与电穿孔技术结合，实现对靶基因的敲除或修复，从而治疗遗传性疾病。

2.基因敲除：电穿孔技术结合CRISPR-Cas9技术可用于基因敲除。例如，在肿瘤细胞中敲除与肿瘤生长相关的基因，从而抑制肿瘤生长。

3.基因功能分析：电穿孔技术结合CRISPR-Cas9技术可用于基因功能分析。例如，通过电穿孔技术将CRISPR-Cas9系统导入细胞，实现对特定基因的功能验证。

五、结论

电穿孔技术在基因编辑领域中的应用为CRISPR-Cas9技术提供了新的解决方案。电穿孔技术结合CRISPR-Cas9技术具有提高转染效率、降低细胞毒性、扩大适用范围和提高基因编辑的准确性等优势。随着电穿孔技术在基因编辑领域的不断深入研究，其在基因治疗、基因敲除和基因功能分析等方面的应用前景将更加广阔。第六部分电穿孔在动物基因编辑中的应用

电穿孔技术在动物基因编辑领域中的应用

一、引言

基因编辑技术作为生物技术领域的一项重要进展，近年来在科研和临床应用中取得了显著的成果。电穿孔技术作为一种常用的基因转移方法，在动物基因编辑中具有广泛的应用。本文将简要介绍电穿孔技术在动物基因编辑中的应用及其相关研究。

二、电穿孔技术原理

电穿孔技术是一种通过电场刺激细胞膜形成瞬时孔隙，从而实现外源物质进入细胞的技术。电穿孔过程中，细胞膜上的脂质双层发生局部解离，形成短暂的可渗透通道，使DNA或其他物质从外部进入细胞内部。电穿孔技术在动物基因编辑中的应用主要包括以下几个方面。

三、电穿孔技术在动物基因编辑中的应用

1.电穿孔技术在基因敲除中的应用

基因敲除是通过破坏目标基因的功能，从而研究基因功能的重要手段。电穿孔技术利用其高效的基因转移能力，在基因敲除中具有显著优势。

研究表明，电穿孔技术在基因敲除中的应用效果与基因大小、细胞类型和电穿孔参数等因素密切相关。例如，在基因敲除小鼠胚胎干细胞的研究中，电穿孔技术成功实现了多种基因的敲除，敲除效率高达80%以上。

2.电穿孔技术在基因过表达中的应用

基因过表达技术是通过使目标基因在细胞中过量表达，从而研究基因功能的一种方法。电穿孔技术在基因过表达中的应用同样取得了良好的效果。

研究表明，电穿孔技术在基因过表达中的应用效果取决于基因类型、细胞类型和电穿孔参数等因素。例如，在基因过表达小鼠胚胎干细胞的研究中，电穿孔技术成功实现了多种基因的过表达，过表达效率可达70%以上。

3.电穿孔技术在动物基因编辑中的应用特点

（1）高效性：电穿孔技术在动物基因编辑中的应用具有高效性，可实现多种基因的转移和编辑。

（2）稳定性：电穿孔技术在动物基因编辑中的应用具有稳定性，可实现长期基因表达。

（3）安全性：电穿孔技术在动物基因编辑中的应用具有安全性，对细胞和动物的影响较小。

四、电穿孔技术在动物基因编辑中的应用研究进展

近年来，随着电穿孔技术在动物基因编辑领域的应用逐渐深入，相关研究取得了显著进展。以下列举几个研究实例：

1.电穿孔技术在基因编辑小鼠胚胎干细胞中的应用：研究结果表明，电穿孔技术在基因编辑小鼠胚胎干细胞中的应用具有较高的成功率和稳定性。

2.电穿孔技术在基因编辑小鼠胚胎中的应用：研究表明，电穿孔技术在基因编辑小鼠胚胎中的应用可成功实现多种基因的转移和编辑。

3.电穿孔技术在基因编辑非人灵长类动物胚胎中的应用：研究证实，电穿孔技术在基因编辑非人灵长类动物胚胎中的应用具有较高的成功率和稳定性。

五、结论

电穿孔技术在动物基因编辑领域具有广泛的应用前景。随着技术的不断发展和完善，电穿孔技术在动物基因编辑中的应用将更加广泛，为人类健康和疾病治疗提供更多可能性。第七部分电穿孔在植物基因编辑中的应用

电穿孔技术在植物基因编辑中扮演着重要的角色。作为一种非侵入性的基因转移方法，电穿孔技术能够有效地将外源DNA导入植物细胞中，从而实现基因编辑的目的。本文将深入探讨电穿孔技术在植物基因编辑中的应用，分析其原理、操作方法、优缺点以及在我国的研究现状。

一、电穿孔技术的原理

电穿孔技术利用电能产生瞬间的高压，使细胞膜形成微小的孔洞，从而实现外源DNA的导入。在这种高压电场作用下，细胞膜的离子通道被短暂打开，导致细胞内外离子迅速交换，使细胞内部电势发生变化。当电场强度达到一定程度时，细胞膜破裂，外源DNA得以进入细胞内部。

二、电穿孔技术在植物基因编辑中的应用

1.基因转化

电穿孔技术在植物基因转化中具有广泛的应用。通过电穿孔，可以将外源DNA导入植物细胞中，实现基因编辑、基因敲除、基因过表达等目的。目前，电穿孔技术在基因转化中的应用主要包括以下几种：

（1）农杆菌介导的基因转化：利用电穿孔技术将农杆菌介导的重组质粒导入植物细胞，实现基因转化。该方法具有转化效率高、转化范围广等优点。

（2）基因枪法：利用电穿孔技术将外源DNA包裹在微弹中，通过高速喷射将微弹送入植物细胞，实现基因转化。

（3）花粉介导的基因转化：利用电穿孔技术将外源DNA导入花粉，通过花粉与卵细胞的结合实现基因转化。

2.基因编辑

电穿孔技术在植物基因编辑中发挥着重要作用。目前，电穿孔技术在植物基因编辑中的应用主要包括以下几种：

（1）CRISPR/Cas9系统：电穿孔技术可以将CRISPR/Cas9系统中的sgRNA和Cas9蛋白导入植物细胞，实现基因编辑。

（2）TALENs技术：电穿孔技术可以将TALENs系统中的sgRNA和TALEN蛋白导入植物细胞，实现基因编辑。

（3）ZFNs技术：电穿孔技术可以将ZFNs系统中的sgRNA和ZFN蛋白导入植物细胞，实现基因编辑。

三、电穿孔技术的优缺点

1.优点

（1）转化效率高：电穿孔技术在植物基因转化中的应用具有较高的转化效率。

（2）操作简便：电穿孔技术操作简单，易于掌握。

（3）转化范围广：电穿孔技术适用于多种植物材料的基因转化。

2.缺点

（1）转化效率不稳定：电穿孔技术的转化效率受多种因素影响，如细胞类型、外源DNA片段大小等。

（2）细胞损伤：电穿孔过程中，细胞可能会受到一定的损伤，影响基因转化效果。

四、我国电穿孔技术在植物基因编辑中的研究现状

近年来，我国在电穿孔技术在植物基因编辑方面的研究取得了显著成果。主要表现在以下几个方面：

1.成功转化多种植物材料：我国科研人员利用电穿孔技术成功转化了多种植物材料，如小麦、水稻、玉米等。

2.实现基因编辑：我国科研人员利用电穿孔技术实现了植物基因编辑，如CRISPR/Cas9系统、TALENs技术、ZFNs技术等。

3.促进植物育种：电穿孔技术在植物基因编辑中的应用为植物育种提供了新的途径，有望培育出具有优良性状的植物新品种。

总之，电穿孔技术在植物基因编辑中具有广泛的应用前景。随着我国科研人员的不断努力，电穿孔技术在植物基因编辑领域的研究将取得更多突破，为我国农业发展和生物技术产业做出更大贡献。第八部分电穿孔技术未来发展趋势

电穿孔技术在基因编辑中的应用已取得了显著的进展，为生物医学研究提供了强大的工具。随着科技的不断进步，电穿孔技术未来发展趋势如下：

1.电穿孔设备小型化、便携化

随着微电子技术和材料科学的发展，电穿孔设备逐渐向小型化、便携化方向发展。根据《2019年全球基因编辑设备市场研究报告》，预计到2025年，全球基因编辑设备市场规模将达到10亿美元。便携式电穿孔设备的出现，将为研究人员提供更加便捷的操作体验，降低实验成本，提高实验效率。

2.电穿孔技术的高效性优化

为了提高电穿孔技术在基因编辑中的应用效果，研究人员致力于优化电穿孔技术。例如，通过改进电极设计，提高电穿孔效率；采用新型电穿孔材料，降低细胞损伤；利用微流控技术，实现电穿孔过程中的精确控制。据《电穿孔技术在生物医学研究中的应用》一文中