（正式版）DB35∕T 2275-2025 《托里桉组培育苗技术规程》

35Codeofpracticefortissue-culturedseedlingsofCorymbiatorellianaI 2 2 3 3 3 4 4 4 4 5 6 7 8 9本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件起草单位：漳州市林业科学研究所、福建省林业科学研究院、漳州市林木种苗本文件确定了托里桉组培育苗技术流程，规定了托里托里桉组培育苗的培养基配制和处理、外植体材积和处理、诱导培养、继代培养、生根培养、炼苗、洗苗和移栽、苗期管理和档案管理的技术要求，以及上述阶段之间的转换条件，描述了标记、过程记录等追溯方法。本文件适用于托里桉组培育苗。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T23473林业植物及其产品调运检疫规程LY/T1882林木组织培养育苗技术规程LY/T2289林木种苗生产经营档案DB35/T805桉树造林苗木质量3术语和定义LY/T1882界定的以及下列术语和定义适用于本文件。原产澳大利亚，又名毛叶桉、澳洲梧桐，桃金娘科伞房属常绿乔木树种。4技术流程托里桉组培技术流程见图1。外植体采集和处理(见第6章)(见第7章)苗期管理(见第12章)(见第8章)洗苗和移栽(见第11章)(见第5章)生根培养(见第9章)(见第10章)图1托里桉组培育苗技术流程图25.1培养基配制5.1.2.1诱导培养基1MS改良培养基+L-半胱氨酸5mg/L+KI0.83mg/L+核黄素4mg/L+6-BA(6-苄氨基嘌呤)0.5mg/L+NAA(1-萘乙酸)0.35mg/L+卡拉胶6000mg/L+白糖30000mg/L。5.1.2.2诱导培养基2MS改良培养基+L-半胱氨酸5mg/L+KI0.83mg/L+核黄素4mg/L+6-BA0.45mg/L+NAA0.35mg/L+卡拉胶6000mg/L+白糖30000mg/L。MS改良培养基+L-半胱氨酸6mg/L+KI0.83mg/L+核黄素4.8mg/L+6-BA0.4mg/L+NAA0.3mg/LMS改良培养基+L-半胱氨酸1mg/L+IBA1mg/L+ABT1号生根粉0.4mg/L+VB19.6mg/L+活性炭粉0.05g/L+卡拉胶7000mg/L+白糖20000mg/L。将配制完成的培养基均匀分装到培养容器内，加盖封口，做好标记和记录。高压蒸汽灭菌器湿热灭菌，蒸汽压力0.105MPa,温度120℃~122℃,时间20min～22min。培养基灭菌后转移到洁净、平整、干燥的环境中自然冷却至3记录采集信息，见附录B。外植体被采集后，立即进行保湿处理，置冷藏取样箱保存，及时送至实验室处理。100g/L～200g/L洗衣粉溶液浸泡15min~30min,边浸泡边用毛笔刷洗，再用清水洗净，备用。在超净工作台上，将清洗后的茎段用无菌水浸泡1min,沥干水分；用2.6%次氯酸钠溶液浸没外植体材料，并滴入吐温-20(溶液中吐温-20浓度1mL/L～2.5mL/L),摇晃7min~10min;用无菌水浸泡将消毒后茎段置于超净台无菌的中性滤纸上，用刀片切成1cm～2cm长的茎段，每个茎段至少保留1个芽点，每瓶培养基接入1个茎段。先接入诱导培养基1中培养10d～15d,再接入诱导培养基2中培养无菌培养室温度25℃~28℃,每次接种后，先在200Lx～300Lx弱光环境培养5d～7d,再在1000Lx～2000Lx强光环境继续培养，每天光照8h～12h。无菌培养室温度25℃~28℃,光照强度2000Lx～3000Lx,每天光照10h～12h。培养基，深度为茎芽长度的1/3,茎芽间距1cm～1.5cm。记录生根培养信息，见附录D。49.2培养无菌培养室温度25℃~28℃,先在200Lx～300Lx的弱光环境下培养7d~8d直至长出侧根，再在将生根瓶苗转入遮阴度为70%～80%的炼苗大棚中培养10d～12d,至苗高3.5cm~4.0cm。当炼苗大棚温度高于40℃时，及时通风降温。基质为红心土，营养袋直径≥3.5cm,高度≥6cm,用0.1%～0.3%高锰酸钾溶液浇透基质消毒，苗木移栽后，早晚各浇水1次，保持叶面湿润，基质田间持水量宜在60%～70%、遮阴度70%～80%、湿度80%～90%、温度15℃~28℃。苗木成活后减少每次浇水量。每7d～10d喷施N-P₂O₅-K₂0=15:15:15复合肥0.2%～0.5%水溶液1次，夏季施肥宜在早晨或傍晚，出圃前30d停止施肥并减少浇水量。移栽后，每7d～10d喷1次杀菌液防病，杀菌液可选择50%多菌灵600～800倍液、70%甲基托布津700～900倍液等；虫害治理宜用4.5%氯氰菊酯1500～3000倍液或90%敌百虫晶体1000倍稀释液等喷检疫应符合GB/T23473的规定。出圃苗木高度不低于20cm,苗木质量应符合DB35/T805的规定。5MS基础培养基成分