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本方法规定了采用Tg(5×ERE:GFP)转基GB/T34713-2017化学品体外毒性试验替代3.2受精后小时Hourspost-fe生物学术语，受精卵受精后的小时数，Hourspost-fert雌激素可与雌激素受体（EstrogenReceptor,ER）发生特异性结合，形成雌激素-受体复合物；该复合物可进一步结合下游雌激素反应元件（Estrogen在本研究采用的Tg(5×ERE:GFP)转基因雌激素荧光斑马鱼模型中，GFP的存在与否；同时，以荧光信号的阳性/阴性响应率为核心指标，可进一步评CaCl2、0.33mmol/LMgSO4，pH7.4）。）：）：离心管中，用稀释液定容至1mL，涡旋混匀，得到第一级储备液（浓度为转移至10mL容量瓶中。用标准稀释水定容至10mL刻度线，颠倒混匀，即）：用电子天平称取3.5gCMC-Na于500mL烧杯中，加入100mL预热的双蒸水，加热搅拌过夜，使CMC-Na与水充分混匀，直至呈透明状，转移到玻璃）：溶解并定容至100mL，若不溶可放入超斑马鱼孵箱的温度28℃,昼夜明暗交替时间六孔培养板、10cm培养皿、移液枪、15例置于繁殖缸内，采用隔板分隔雌、雄鱼。维持常规饲养光照周期，次日早晨实验第2天：选取发育至24hpf的斑马鱼胚胎，每孔计数30枚并转移至六孔板中。弃去原有培养液，每孔加入5mL含待测样品的培养液，建立受试物暴随机选取至少6尾作为观测样本。采用CMC-Na溶液对样本进行固定，随后置避免因仪器差异、环境波动及操作时长过长对a)试验依据：明确试验所遵循的国家标准、行业规范或自主建立的试验方案依b)试验目的及原理：阐述本试验的核心研究目标，以及基于转基因斑马鱼模型c)试验项目：详细说明试验涵盖的检测项目，包括荧光表型观察、阳性/阴性响d)受试物与阳性对照信息：记录受试物的来源、浓度梯度、处理方式等关键参e)斑马鱼相关信息：注明斑马鱼的来源、品系（如Tg(5×ERE:GFP)转基因荧光f)试验条件与方法：详述试验设计方案（如分组设置、样本量）、试验所用仪g)试验周期：明确试验启动至完成的具体日期，精准记h)试验结果：全面呈现试验获得的原始荧光成像图等图像数据，及分组荧光表i)数据处理与结果评价方法：说

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