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文档简介
猪繁殖与呼吸综合征病毒第1页一、PRRSV形态特征1、套式病毒目动脉炎病毒科动脉炎病毒属
2、基本形态及核酸病毒粒子呈卵圆形,直径50~65nm。
核衣壳直径30~35nm,呈二十面体对称。
有囊膜。
单分子线状单股正链RNA病毒。第2页3、病毒蛋白有核衣壳蛋白(N,分子质量10u)和两种主要囊膜蛋白(M和GP5)。M是非糖基化嵌膜蛋白,分子质量160000u。GP5为糖蛋白,分子质量约25000u。GP5与M经过二硫键形成二聚体,对病毒感染力及中和作用至关主要。另外,还有4种次要囊膜蛋白(GP2、GP3、GP4及E)及两种大分子非结构蛋白(NSP)。第3页4、基因组大小为13000~15000nt。
5′端帽,约75%为RNA聚合酶基团。3′端聚A尾,有编码病毒结构蛋白基因。
有感染性。5、表面有约5nm大小突起,无血凝活性,不凝集哺乳动物或禽类红细胞。第4页
二、PRRSV增殖与变异
1、病毒增殖病毒增殖细胞:猪单核细胞-巨噬细胞系统内增殖猪肺泡巨噬细胞外周单核细胞肺间质巨噬细胞最为敏感在宿主细胞浆空泡膜及滑面内质网小池膜上“出芽”,成熟病毒粒子多蓄积在空泡腔内。
病毒增殖数量与其适应宿主细胞程度有亲密关系。
第5页病毒增殖过程:
鼻黏膜或上呼吸道系统(巨噬细胞)血液循环初级复制部位
第6页病毒增殖特点:增殖特点有严格宿主专一性
对巨噬细胞有专嗜性。
抗体依赖性增强作用即在亚中和抗体水平存在情况下,在细胞上复制能力反而得到增强。第7页2、病毒变异PRRSV分为两个型:(1)以Lelystadvirus(LV株)为代表欧洲型(简称A亚群)。(2)以ATCCVR-2332毒株为代表美洲型(简称B亚群)。
二者在抗原上有显著差异,只有极少交叉反应。
A亚群:广泛基因组变异。
B亚群:呈较为保守性。不一样毒株之间在毒力和致病力上有显著差异。
我国PRRSV均属美洲型,迄今还没有发觉欧洲型株,同时我国分离毒株也存在变异现象,现已发觉有缺失变异毒株存在。第8页三、PRRSV致病机理
畜体病毒巨噬细胞广泛性血管炎其它组织破坏脾广泛坏死淋巴结严重破坏第9页四、PRRSV抵抗力1、病毒稳定性受pH和温度影响比较大。在pH﹤5或pH﹥7条件下,其感染力降低95%以上。病毒在-70℃可保留18个月,4℃保留1个月,37℃48h,56℃45min完全失去感染力。
2、干燥可很快使病毒失活。3、对有机溶剂十分敏感,经氯仿处理后,其感染性可下降99.99%。4、对惯用化学消毒剂抵抗力不强。
第10页五、PRRSV流行病学1、易感动物PRRSV只感染猪。各种品种、不一样年纪和用途猪均可感染,但以妊娠母猪和1月龄以内仔猪最易感。2、传染源患病猪和带毒猪是本病主要传染源。第11页4、传输路径PRRSV主要传输路径是接触感染、空气传输,也可经过胎盘垂直传输。易感猪可经以下几个路径而感染病毒:经口、鼻腔、肌肉、腹腔、静脉及子宫内接种。与带毒猪直接接触。与污染有PRRSV运输工具、器械接触。感染猪流动也是本病主要传输方式。第12页4、流行病学特点高度接触性传染病,呈地方流行性。连续性感染是PRRSV流行病学主要特征。
*PRRSV可在感染猪体内存在很长时间。
*猪感染病毒后2~14周均可经过接触将病毒传输给其它易感猪。第13页六、PRRSV试验室诊疗该病毒确切诊疗需依赖试验室诊疗技术,包含病毒分离判定、血清学诊疗和分子生物学诊疗技术。(一)病毒分离判定病毒分离判定是诊疗PRRSV最确切方法1、病料首选材料:肺、扁桃体、脾、淋巴结和血清。适宜检验材料:死产和流产胎儿脾肺血清和胸水。检出率最高:弱胎猪和有呼吸道症状急性感染猪。第14页2、分离病毒细胞
原代细胞:PAM。
传代细胞:CL2621、MAl04、Marcl45等细胞系。但就临诊分离率而言,PAM敏感性要高于传代细胞。注意:(1)普通来说日龄小猪对病毒敏感性更高些。(2)首次传代有时可能无CPE,需盲传2~3代。(3)
不一样毒株可能适应不一样细胞系。有些毒株仅能在PAM或仅能在CL2621细胞中生长。欧洲株在PAM上复制速度更加快、效率更高。北美毒株在CL2621上更有利于分离。
第15页3、病毒判定技术(1)单克隆抗体或多克隆抗体免疫荧光抗体技术(2)单层过氧化物酶试验(3)RT-PCR技术(4)电镜技术(二)血清学诊疗采取血清学抗体检测技术是应用最为广泛试验室诊疗方法。当前有4种不一样方法用于检测血清中PRRSV抗体,包含:第16页方法优点缺点间接免疫荧光抗体试验
(IFA)特异性高早期诊疗抗原变异会影响结果结果主观判定免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)
特异性高敏感性高早期诊疗结果主观判定高背景抗原变异会影响结果
血清中和试验(SN)可检测期长敏感性低耗时抗原变异会影响结果酶联免疫吸附试验
(ELISA)自动化操作高品质控制高背景第17页(三)分子生物学诊疗技术1、RT-PCR2、巢式PCR3、原位PCR4、RT-PCR-RFLP5、核酸探针技术
直接检测病料组织中病毒。第18页七、PRRSV防治(1)坚持自繁自养标准,建立稳定种猪群,不轻易引种。(2)规模化猪场应彻底实现全进全出,最少要做到产房和保育两个阶段全进全出。(3)
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