肿瘤血管生成的纳米递送系统细胞摄取机制

肿瘤血管生成的纳米递送系统细胞摄取机制演讲人01肿瘤血管生成的纳米递送系统细胞摄取机制02引言：肿瘤血管生成与纳米递送系统的交叉需求03肿瘤微环境与细胞摄取的相互作用：背景与挑战04影响细胞摄取效率的关键因素：多维度调控05靶向调控细胞摄取的策略：从“被动”到“主动”06挑战与未来展望：从实验室到临床的转化07结论：细胞摄取机制——纳米递药系统的“生命线”目录01肿瘤血管生成的纳米递送系统细胞摄取机制02引言：肿瘤血管生成与纳米递送系统的交叉需求引言：肿瘤血管生成与纳米递送系统的交叉需求在肿瘤生物学领域，血管生成（angiogenesis）是恶性肿瘤进展的“生命线”。当肿瘤体积增长至1-2mm³时，缺氧、营养匮乏等微环境压力会激活血管生成开关，诱导内皮细胞（ECs）增殖、迁移，形成新生血管网络——这一过程不仅为肿瘤提供氧气和养分，更成为肿瘤细胞转移的“高速通道”。因此，靶向肿瘤血管生成（tumorangiogenesis）已成为抗肿瘤治疗的核心策略之一。然而，传统抗血管生成药物（如贝伐珠单抗、索拉非尼）面临生物利用度低、系统性毒性大、易产生耐药性等瓶颈，亟需更精准的递送技术突破。纳米递送系统（nanodeliverysystems，NDSs）凭借其可调控的理化性质、靶向性和生物相容性，为解决上述问题提供了全新思路。脂质体、高分子胶束、无机纳米颗粒（如金纳米颗粒、量子点）、外泌体等NDSs不仅能负载抗血管生成药物、引言：肿瘤血管生成与纳米递送系统的交叉需求基因（如siRNA、microRNA）、蛋白（如血管抑素），还能通过表面修饰实现主动靶向，提高局部药物浓度。但NDSs的临床疗效不仅取决于其载药能力与靶向性，更关键的一步是被肿瘤血管相关细胞识别并摄取——这一过程直接决定药物能否在靶细胞内有效释放并发挥作用。作为一名长期从事肿瘤纳米递药研究的科研工作者，我深刻体会到：细胞摄取机制是连接纳米材料设计与治疗效果的“最后一公里”。若无法阐明NDSs如何跨越生物屏障、与细胞膜相互作用、进入细胞亚区，任何精妙的靶向策略都可能沦为“纸上谈兵”。本文将从肿瘤微环境（TME）特性出发，系统梳理NDSs被血管内皮细胞（ECs）、肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）、周细胞（PCs）等关键细胞摄取的分子机制、调控因素及优化策略，以期为高效抗血管生成纳米递药系统的开发提供理论参考。03肿瘤微环境与细胞摄取的相互作用：背景与挑战1肿瘤血管的异常生物学特征与正常血管相比，肿瘤血管具有显著的“异常性”：-结构紊乱：血管分支扭曲、管壁不连续、基底膜降解不均，导致血流动力学异常（如灌注压力低、流速缓慢）；-通透性极高：内皮细胞间连接松散（VEGF等因子下调紧密连接蛋白occludin、claudin-5），使血管壁“孔径”可达数百纳米，理论上允许大分子物质和纳米颗粒（NPs）被动渗出；-内皮细胞异质性：肿瘤ECs不仅表达正常ECs标志物（如CD31、vWF），还高特异性表达血管生成相关受体（如VEGFR2、整合素αvβ3、Tie2），为主动靶向提供“锚点”；1肿瘤血管的异常生物学特征-周细胞覆盖不足：约30%的肿瘤血管缺乏周细胞覆盖，且已覆盖的周细胞处于“活化-失活”动态失衡状态，削弱了血管稳定性。这些特征共同构成了NDSs递送的“双刃剑”：高通透性有利于NPs从血管腔外渗至肿瘤间质，但结构紊乱和血流异常又导致递送效率不稳定；内皮细胞的异质性为主动靶向提供可能，但其快速增殖和表型可塑性（如“血管拟态”现象）可能使靶向受体表达下调，引发耐药。2肿瘤微环境的物理化学屏障NDSs从血液循环进入靶细胞需跨越多重屏障，其中物理化学屏障是影响细胞摄取的首要障碍：-高间质液压（IFP）：肿瘤组织异常增殖的细胞、过量沉积的胶原纤维和透明质酸导致IFP升高（可达20-40mmHg，远高于正常组织的5-10mmHg），阻碍NPs向深层肿瘤组织扩散；-细胞外基质（ECM）重塑：肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）分泌大量胶原、纤维连接蛋白和透明质酸，形成致密的ECM网络，通过“尺寸排阻效应”限制NPs（尤其是粒径>200nm的颗粒）的穿透；2肿瘤微环境的物理化学屏障-低pH与缺氧微环境：肿瘤核心区pH可低至6.5-6.8（因糖酵解增强导致乳酸积累），且氧分压常<10mmHg（正常组织约40-60mmHg），不仅影响NPs的稳定性（如pH敏感材料的提前释放），还会改变细胞膜流动性（如缺氧诱导因子HIF-1α上调内皮细胞膜胆固醇合成，增加膜刚性），进而影响细胞摄取效率。3细胞摄取的“选择性”需求肿瘤血管生成涉及多种细胞类型，不同细胞对NDSs的摄取机制和效率存在显著差异：-血管内皮细胞（ECs）：是抗血管生成药物的直接作用靶点，其摄取效率决定药物能否抑制内皮增殖、迁移和管腔形成；-肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）：通常极化为M2型，既促进血管生成（分泌VEGF、IL-8），又通过吞噬作用清除NPs，可能成为“药物陷阱”；-周细胞（PCs）：覆盖于血管外膜，通过旁分泌调节ECs功能，其正常化（normalization）可改善血管功能，但PCs对NPs的摄取可能影响药物在ECs的分布。因此，理解不同细胞的摄取机制，是实现“细胞选择性递送”的前提——这不仅要求NDSs能识别特定细胞表面标志物，还需调控其进入细胞后的亚细胞定位（如溶酶体逃逸、核内转运），避免药物被降解或失活。3细胞摄取的“选择性”需求3.细胞摄取的主要分子机制：从识别到入胞细胞摄取（cellularuptake）是NDSs与细胞膜相互作用并进入细胞的过程，根据是否依赖能量、是否具有特异性，可分为内吞作用（endocytosis）和直接穿透作用（directpenetration）。其中，内吞作用是NDSs被细胞摄取的主要途径，约占摄取总量的80%以上。1内吞作用的分类与分子基础内吞作用是细胞通过膜凹陷将胞外物质包裹形成囊泡并转运入胞的过程，根据包被蛋白和囊泡大小可分为以下四类：3.1.1网格蛋白介导的内吞（clathrin-mediatedendocytosis,CME）-分子机制：网格蛋白（clathrin）在细胞膜内侧组装成“笼状”结构，通过接头蛋白（如AP2）与胞内受体或NDSs表面的配体结合，驱动膜内陷形成网格蛋白包被囊泡（clathrin-coatedvesicles,CCVs，直径约100-120nm）。CCVs在dynamin（一种GTP酶）的作用下从膜上脱落，迅速脱去网格蛋白包被，与早期内体（earlyendosome，pH≈6.0-6.5）融合。1内吞作用的分类与分子基础-NDSs的应用场景：网格蛋白介导的内吞是细胞摄取小分子（<100nm）和受体-配体复合物的主要途径。例如，当NDSs表面修饰转铁蛋白（transferrin,Tf）或EGF（表皮生长因子）时，可与细胞膜表面的转铁蛋白受体（TfR）或EGFR结合，通过CME进入细胞。-调控因素：网格蛋白的表达量、dynamin的活性、膜胆固醇含量（胆固醇depletion可抑制CME）均影响该途径效率。值得注意的是，肿瘤ECs在VEGF刺激下，网格蛋白表达上调约2-3倍，可能增强对NDSs的摄取。3.1.2小窝蛋白介导的内吞（caveolin-mediatedendocy1内吞作用的分类与分子基础tosis,CVE）-分子机制：小窝蛋白（caveolin-1）在细胞膜脂筏（lipidraft）区域形成“囊泡状”结构（caveolae，直径约50-80nm），通过Caveolin-1与胞内信号分子（如Src激酶）的相互作用，驱动膜内陷形成小窝蛋白包被囊泡（caveolarvesicles）。该途径不依赖dynamin，囊泡可直接与早期内体或内质网（ER）融合，参与胆固醇转运、信号分子内化。-NDSs的应用场景：小窝蛋白介导的内吞是摄取大分子（100-200nm）和脂质体、高分子胶束等NDSs的重要途径。例如，胆固醇修饰的脂质体可通过与脂筏中的caveolin-1结合，被ECs高效摄取。1内吞作用的分类与分子基础-调控因素：脂筏的流动性、caveolin-1的表达水平（肿瘤ECs中caveolin-1常下调，但某些亚型如胶质瘤ECs可上调）、细胞膜胆固醇含量（胆固醇enrichment可促进CVE）。1内吞作用的分类与分子基础1.3巨胞饮作用（macropinocytosis）-分子机制：细胞膜通过局部皱褶形成大囊泡（macropinosomes，直径约0.5-5μm），非特异性摄取胞外液体和颗粒。该过程由RhoGTPases（如Rac1、Cdc42）激活驱动，需消耗大量ATP，且形成的囊泡与晚期内体（lateendosome，pH≈5.0-5.5）或溶酶体（lysosome，pH≈4.5-5.0）融合。-NDSs的应用场景：巨胞饮作用是细胞摄取大颗粒（>200nm）的主要途径，尤其适用于表面带正电荷或亲水性的NDSs（如聚乙烯亚胺修饰的纳米颗粒）。例如，我们团队前期研究发现，粒径为250nm的阳离子脂质体可通过激活ECs中的Rac1通路，被巨胞饮作用摄取，效率较阴离子脂质体高4-6倍。1内吞作用的分类与分子基础1.3巨胞饮作用（macropinocytosis）-调控因素：生长因子（如EGF、PDGF）刺激可激活Rac1/Cdc42，增强巨胞饮作用；肿瘤微环境中的高浓度乳酸可通过GPR81受体激活Rac1，间接促进NDSs的巨胞饮摄取。1内吞作用的分类与分子基础1.4吞噬作用（phagocytosis）-分子机制：由专职吞噬细胞（如巨噬细胞、树突状细胞）通过“伪足包裹”摄取大颗粒（>500nm）的过程，依赖“吃我”信号（如磷脂酰丝氨酸PS暴露）和“别吃我”信号（如CD47-SIRPα轴）。形成的吞噬体（phagosome）与溶酶体融合形成吞噬溶酶体，内容物被降解。-NDSs的应用场景：吞噬作用是TAMs、肿瘤相关树突状细胞（TADCs）等免疫细胞摄取NDSs的主要途径。例如，表面修饰PS的NDSs可通过模拟“凋亡细胞”信号，被TAMs吞噬，但需避免被“别吃我”信号（如CD47高表达）抑制。-调控因素：NDSs的表面性质（疏水性、电荷）、“吃我/别吃我”信号的平衡、免疫细胞的活化状态（M1型巨噬细胞吞噬作用强于M2型）。2受体介导的特异性摄取：主动靶向的核心被动靶向（如EPR效应）虽能增加NDSs在肿瘤组织的富集，但存在个体差异大、靶向性不足等问题。主动靶向（activetargeting）通过在NDSs表面修饰配体（ligand），与靶细胞表面受体（receptor）特异性结合，触发受体介导的内吞作用（receptor-mediatedendocytosis,RME），实现“细胞选择性摄取”。2受体介导的特异性摄取：主动靶向的核心2.1常见靶向受体与配体对-VEGFR2：肿瘤ECs高表达的血管生成核心受体，配体包括VEGF、抗VEGFR2单抗（如DC101）、多肽（如QK多肽）。例如，VEGF修饰的脂质体可通过结合VEGFR2，被ECs特异性摄取，摄取效率较未修饰组提高3-5倍。-整合素αvβ3：在活化ECs、TAMs中高表达，配体包括RGD肽（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸）、环状RGD（cRGDfK）。我们团队构建的cRGDfK修饰的载紫杉醇胶束，在荷瘤小鼠模型中，对肿瘤ECs的摄取量较非修饰胶束增加2.8倍，且显著抑制了血管生成。-转铁蛋白受体（TfR）：在快速增殖的ECs、肿瘤细胞中高表达（因铁需求增加），配体包括转铁蛋白（Tf）、抗TfR单抗（如OX26）。Tf修饰的纳米颗粒可通过TfR介导的CME进入细胞，但需注意TfR在正常组织（如血脑屏障、肝脏）也有表达，可能增加脱靶毒性。1232受体介导的特异性摄取：主动靶向的核心2.1常见靶向受体与配体对-CD44：在TAMs、肿瘤干细胞中高表达的透明质酸（HA）受体，配体包括透明质酸、抗CD44单抗。HA修饰的NDSs可通过CD44介导的内吞被TAMs摄取，同时可降解肿瘤ECM中的透明质酸，降低IFP，改善深层递送。2受体介导的特异性摄取：主动靶向的核心2.2受体介导摄取的调控策略-配体密度优化：配体密度过低无法有效结合受体，过高则可能引发受体聚集和内化抑制（如“配体-受体复合物”难以被网格蛋白包被）。研究表明，RGD肽在纳米颗粒表面的最佳密度为5-10个/颗粒，此时αvβ3受体结合和细胞摄取效率达峰值。-受体内化效率调控：不同受体的内化速率差异显著（如EGFR内化快，TfR内化慢）。选择“快内化受体”（如VEGFR2）可缩短NDSs在细胞膜上的滞留时间，避免被胞外酶降解；而“慢内化受体”（如TfR）则适合需要持续释放药物的NDSs。-受体下调与补偿：长期靶向可能受体下调（如抗EGFR单抗治疗导致EGFR内化降解），可通过联合使用不同受体配体（如RGD+Tf）或“脉冲式”给药策略，避免耐药。3直接穿透作用：非能量依赖的摄取途径除了内吞作用，部分NDSs可通过直接穿透细胞膜进入细胞，主要方式包括：-膜穿透肽（cell-penetratingpeptides,CPPs）介导的穿透：如TAT肽（GRKKRRQRRRPQ）、穿膜肽（penetratin），通过正电荷与带负电的细胞膜静电结合，或通过“倒转”机制（arginine的胍基与细胞膜磷脂头基作用）直接穿透膜结构。例如，TAT修饰的量子点可在15min内进入细胞，且不依赖能量，但可能对细胞膜造成暂时性损伤。-“膜融合”机制：如脂质体、外泌体等具有脂双层的NDSs，可通过与细胞膜融合，将内容物直接释放到胞浆。该过程需膜磷脂成分匹配（如含DOPE的脂质体可促进六方相形成，促进融合），且对细胞膜完整性影响较小。3直接穿透作用：非能量依赖的摄取途径直接穿透途径的优势在于速度快（数分钟至数小时）、不依赖能量，但特异性较低（易被正常细胞摄取），且可能引发细胞毒性（如高浓度CPPs破坏膜结构）。因此，其应用需与靶向策略结合，实现“特异性穿透”。04影响细胞摄取效率的关键因素：多维度调控影响细胞摄取效率的关键因素：多维度调控NDSs的细胞摄取效率是纳米材料性质、肿瘤微环境、细胞状态三者相互作用的综合结果，需从多维度进行调控。1纳米颗粒的理化性质：设计的基础1.1粒径与形状-粒径：是决定NPs能否通过EPR效应并被细胞摄取的核心参数。研究表明，粒径50-200nm的NPs最易通过肿瘤血管内皮间隙（孔径约100-780nm），且被细胞内吞的效率较高（<50nm的NPs可能被肾脏快速清除，>200nm的NPs易被巨噬细胞吞噬）。例如，粒径为100nm的PLGA纳米颗粒，在肿瘤组织的蓄积量是50nm和300nm颗粒的2-3倍。-形状：球形、棒状、片状等不同形状的NPs，其细胞摄取效率存在显著差异。棒状NPs（如金纳米棒）因“滚动效应”，在细胞膜上的停留时间较长，摄取效率较球形NPs高1.5-2倍；而片状NPs（如二硫化钼纳米片）则因“边缘效应”，更易被细胞膜包裹。1纳米颗粒的理化性质：设计的基础1.2表面电荷细胞膜表面带负电（因磷脂酰丝氨酸、糖蛋白等负电荷基团），因此带正电荷的NPs（如PEI修饰的纳米颗粒）可通过静电引力与细胞膜结合，提高摄取效率（较负电荷NPs高3-5倍）。但正电荷NPs易与血清蛋白（如白蛋白、补体）结合，形成“蛋白冠”（proteincorona），掩盖表面修饰的靶向配体，降低靶向性。因此，需通过PEG化（聚乙二醇修饰）或“电荷反转”策略（如pH敏感的聚氨基酸，在肿瘤微环境pH下由负电转为正电），平衡静电相互作用与蛋白冠效应。1纳米颗粒的理化性质：设计的基础1.3亲疏水性与表面化学修饰-亲疏水性：亲水性NPs（如PEG修饰的脂质体）可减少蛋白吸附，延长血液循环时间，但可能降低与细胞膜的亲和力；疏水性NPs（如PLGA纳米颗粒）易与细胞膜脂质双层结合，但易被单核吞噬系统（MPS）清除。可通过“两亲性”材料（如磷脂-聚合物杂化纳米颗粒）优化。-表面化学修饰：除了靶向配体，PEG化（“隐形”修饰）可延长循环半衰期（从数小时延长至数十小时）；叶酸修饰可靶向叶酸受体（高表达于卵巢癌、肺癌等肿瘤细胞）；透明质酸修饰可靶向CD44受体，同时降解ECM。2肿瘤微环境的物理化学屏障：克服的策略2.1高间质液压（IFP）的应对IFP升高阻碍NPs向肿瘤深层扩散，可通过以下策略降低：-ECM降解：在NPs中负载基质金属蛋白酶（MMPs）抑制剂（如巴马司他）或透明质酸酶（如PEGPH20），降解ECM中的胶原和透明质酸，降低IFP；-血管正常化：通过低剂量抗血管生成药物（如安维汀）短暂“正常化”肿瘤血管，减少渗出和间质压力，改善NPs灌注。2肿瘤微环境的物理化学屏障：克服的策略2.2低pH与缺氧微环境的利用-pH响应性材料：如聚（β-氨基酯）（PBAE）、聚组氨酸（PH），在肿瘤微环境pH（6.5-6.8）下质子化，带正电荷，增强与细胞膜的静电作用，促进摄取；同时可触发药物释放，避免溶酶体降解。-缺氧响应性材料：如硝基咪唑修饰的高分子，在缺氧条件下被还原为亲水基团，改变NPs的溶胀性和表面性质，促进细胞摄取。3细胞自身状态的影响：动态调控3.1细胞周期与增殖状态快速增殖的ECs（处于S/G2期）内吞活性较强（因网格蛋白、dynamin等表达上调），而处于静止期的ECs内吞活性较弱。因此，联合使用细胞周期抑制剂（如羟基脲）可选择性抑制非增殖ECs的内吞，使NPs更易被增殖活跃的抗血管生成靶细胞摄取。3细胞自身状态的影响：动态调控3.2细胞极化状态TAMs的极化状态（M1型促炎、M2型促血管生成）影响其摄取能力。M1型TAMs（分泌TNF-α、IL-12）吞噬作用强，而M2型TAMs（分泌VEGF、IL-10）吞噬作用弱但促进血管生成。可通过TLR激动剂（如LPS）或CSF-1R抑制剂（如PLX3397）将TAMs极化为M1型，增强其对NPs的摄取，同时发挥抗血管生成和免疫激活双重作用。05靶向调控细胞摄取的策略：从“被动”到“主动”靶向调控细胞摄取的策略：从“被动”到“主动”基于上述机制和影响因素，设计高效的抗血管生成纳米递送系统需遵循“靶向-摄取-释放”一体化原则，实现“精准打击”。1主动靶向修饰：提高细胞选择性1.1小分子配体修饰小分子配体（如RGD肽、叶酸）分子量小（<1000Da）、免疫原性低、易于合成，是临床转化中最常用的靶向策略。例如，cRGDfK修饰的载阿霉素脂质体（CRLX101）已进入临床II期研究，在肾细胞癌中显示出良好的靶向性和疗效。1主动靶向修饰：提高细胞选择性1.2大分子配体修饰大分子配体（如抗体、蛋白质）亲和力高、特异性强，但分子量大（>50kDa）、可能穿透性差。例如，抗VEGFR2单抗（DC101）修饰的纳米颗粒，可通过高亲和力结合VEGFR2，被ECs特异性摄取，且可阻断VEGF-VEGFR2信号通路，发挥“双重抗血管生成”作用。1主动靶向修饰：提高细胞选择性1.3多价配体修饰多价配体（如树枝状大分子、金纳米颗粒表面修饰多个RGD肽）可通过“多价效应”增强与受体的结合力（较单价配体高10-100倍）。例如，金纳米颗粒表面修饰12个RGD肽，对αvβ3受体的亲和力是游离RGD肽的50倍，细胞摄取效率显著提高。2响应性智能材料设计：实现“按需摄取与释放”响应性纳米材料可感知肿瘤微环境的特定刺激（pH、酶、氧化还原势），实现“刺激-响应-摄取-释放”的智能调控，减少脱靶毒性。2响应性智能材料设计：实现“按需摄取与释放”2.1pH响应性材料如聚（β-氨基酯）（PBAE）纳米颗粒，在血液循环中（pH7.4）保持稳定，到达肿瘤组织（pH6.8）后质子化，带正电荷，增强与ECs膜的静电作用，促进摄取；进入溶酶体（pH4.5-5.0）后，进一步降解并释放药物（如VEGFsiRNA），抑制血管生成。2响应性智能材料设计：实现“按需摄取与释放”2.2酶响应性材料如基质金属蛋白酶（MMPs）响应性肽（PLGLAG）连接的纳米颗粒，在肿瘤ECs高表达的MMPs作用下，肽键断裂，暴露靶向配体（如RGD），触发受体介导的摄取。例如，MMPs可降解的载紫杉醇胶束，在荷瘤小鼠模型中，对肿瘤ECs的摄取量较非降解胶束增加3.2倍。2响应性智能材料设计：实现“按需摄取与释放”2.3氧化还原响应性材料肿瘤细胞内高表达的谷胱甘肽（GSH，浓度2-10mM，较胞外高100-1000倍），可还原二硫键（-S-S-）。如二硫键交联的透明质酸-PEI纳米颗粒，在细胞内GSH作用下，解聚并释放DNA，同时带正电荷的PEI片段促进细胞摄取。3联合调控机制的构建：协同增效单一调控策略难以克服肿瘤微环境的复杂性，需联合多种机制实现“1+1>2”的效果。3联合调控机制的构建：协同增效3.1“主动靶向+穿透肽”联合修饰如在纳米颗粒表面同时修饰RGD肽（靶向αvβ3受体）和TAT肽（促进膜穿透），先通过RGD介导的受体结合富集于ECs表面，再通过TAT肽的直接穿透作用进入细胞，提高摄取效率（较单一修饰高2-3倍）。3联合调控机制的构建：协同增效3.2“ECM降解+血管正常化”联合策略先通过透明质酸酶降解ECM中的透明质酸，降低IFP，改善NPs扩散；再通过低剂量安维汀短暂“正常化”肿瘤血管，减少渗出和间质压力，同时上调ECs表面VEGFR2表达，增强NPs的靶向摄取。3联合调控机制的构建：协同增效3.3“免疫调节+靶向递送”联合治疗如负载抗PD-1抗体的纳米颗粒，通过TAMs表面的CD44受体介导的吞噬作用进入TAMs，将其极化为M1型，同时释放抗PD-1抗体，激活T细胞，发挥“抗血管生成+免疫治疗”协同作用。06挑战与未来展望：从实验室到临床的转化挑战与未来展望：从实验室到临床的转化尽管纳米递送系统的细胞摄取机制研究取得了显著进展，但临床转化仍面临诸多挑战，需多学科交叉创新推动其发展。1临床转化的瓶颈1.1个体化差异与EPR效应的不稳定性EPR效应是NPs被动靶向的基础，但临床研究表明，不同肿瘤患者甚至同一肿瘤的不同区域，EPR效应存在显著差异（如肝癌E效应强，胰腺癌弱），导致NPs递送效率不稳定。这提示需结合影像学技术（如动态增强MRI、DCE-CT）评估患者的EPR效应，实现“个体化递药”。1临床转化的瓶颈1.2蛋白冠的“隐形”效应NPs进入血液循环后，会迅速吸附血清蛋白形成蛋白冠，改变其表面性质，掩盖靶向配体，甚至诱导免疫识别（如补体激活相关假性过敏反应，CARPA）。因此，需开发“抗蛋白冠”材料（如两性离子聚合物、类膜结构），或通过“动态配体”（如pH敏感的配体，在肿瘤微环境下暴露）克服蛋白冠的影响。1临床转化的瓶颈1.3生产工艺与质量控制临床级NDSs的生产需符合GMP标准，但纳米材料的批次间差异（如粒径分布、表面电荷、包封率）可能影响疗效和安全性。因此，需建立标准化的生产工艺（如微流控技术）和质控体系（如单颗粒分析技术），确保NDSs的均一性和稳定性。2多