生物工程生物技术企业生物工程师实习报告

生物工程生物技术企业生物工程师实习报告一、摘要2023年7月1日至2023年8月31日，我在一家生物工程生物技术企业担任生物工程师实习生，参与基因编辑实验平台的搭建与优化工作。核心工作成果包括完成10组CRISPRCas9基因敲除实验，成功构建3个稳定表达菌株，并通过qPCR验证基因沉默效率达92%；运用流式细胞术分析细胞周期，数据重复性达98%。专业技能应用涉及分子克隆、蛋白质表达纯化及生物信息学数据分析，熟练掌握湿实验操作流程与自动化设备使用。提炼出的方法论包括标准化实验方案设计以降低误差，以及利用生物信息学工具进行数据快速筛选与验证，这些方法可直接应用于后续科研或生产环境。二、实习内容及过程1实习目的想看看实际工作环境里生物工程是怎么运作的，把学校学的那些分子生物学实验技能用到真刀真枪的项目上，了解下企业里一个完整的项目流程是怎么走的，特别是基因编辑这块技术怎么落地到实际应用里。2实习单位简介我实习的单位是家做细胞治疗和基因治疗技术的公司，主要搞CART和基因递送系统研发，实验室有挺多先进的设备，像高通量测序仪、流式细胞仪什么的，而且他们用的实验体系还挺多的，从病毒载体构建到细胞培养、基因编辑验证，整个链条都能接触到。3实习内容与过程刚进去先跟着导师熟悉了CRISPRCas9系统的实验流程，7月5号开始独立负责一个针对B细胞淋巴瘤的基因敲除实验。主要工作就是设计gRNA序列，然后通过双酶切把sgRNA表达盒和线性化的靶向质粒转进HEK293T细胞里，用lipofectamine3000转染，48小时后挑单克隆，然后用qPCR验证敲除效率。整个实验过程踩了不少坑，最头疼的是载体转染效率不稳定，有时候一皿细胞转了三次还接不到，8月10号为了解决这个问题，试了三种不同的转染试剂，最后发现用PEI纳米颗粒包载质粒效率能提高40%，数据记录本上最后记录的转染效率稳定在65%以上。还参与了一个CART细胞系的构建项目，主要是帮忙做质粒扩增和纯化，用了Qiagen的EndoFree系列试剂，最后得到的质粒纯度能达到98%，符合后续病毒包装的要求。4实习成果与收获完成了10组基因敲除实验，成功构建了3个沉默效率超过90%的稳定细胞系，其中一个被导师拿去做后续的药物筛选实验了。学会了怎么用BioRad的iQ5实时荧光定量系统跑qPCR，而且把实验数据整理成了标准化的报告模板。最大的收获是理解了从实验室研究到工业化生产之间的衔接问题，比如基因编辑实验要考虑成本和可重复性，不能只追求效率，得把每一步的失败率降下来。还发现企业里做实验特别注重细节，像枪头用完就得马上高压灭菌，试剂不能用超过三个月的，这些在实验室里可能没人管你。5问题与建议实习期间发现单位的管理确实有挺多问题，比如实验耗材的申领流程特别慢，有时候等一批枪头能用一个月了还没批下来，最后只能用别人用剩的，这样很容易造成交叉污染。建议可以搞个电子化申领系统，按需配货，或者把常用耗材集中采购降低成本。培训机制也一般，只给了两天的新人培训，很多实验细节都是自己摸索出来的，比如怎么调转染试剂的浓度，怎么判断细胞状态最合适转染，这些信息没人教，只能靠试。建议可以搞个在线实验库，把每个实验的标准操作流程和注意事项都录成视频，新人先看视频再上手。岗位匹配度上，我所在的实验组主要是做基础研究的，但公司更缺能直接对接生产的同学，所以如果想去企业工作，最好提前学点细胞培养和质粒大规模生产的知识，这里面的挑战可不少。这段经历让我意识到，光会做实验还不够，还得懂项目管理、成本控制这些，不然好想法最后也实现不了。三、总结与体会1实习价值闭环这8周，从7月1号第一天进实验室懵懵懂懂，到最后一天8月31号离开时能独立跑完整的基因编辑验证流程，感觉像经历了一次小型蜕变。学校教的理论知识，比如CRISPRCas9的原理、质粒图谱分析，终于能在实际操作中对应上来了。记得刚开始做gRNA筛选时，一条条查文献设计序列，跑完验证结果还不太理想，导师就带着我复盘实验设计，后来我们调整了gRNA的靶向位点，最后敲除效率从75%提升到92%，这个数据点我记很清楚。这让我明白，理论联系实际不是一句空话，解决实际问题才是学习的真谛。实际工作中接触到的实验细节，比如转染试剂的选择对细胞存活率的影响（用lipofectamine3000转染时细胞活力能维持在85%，用PEI纳米颗粒则降到70%），这些在课本上根本学不到。整理实验数据时，我发现规范化的记录能极大降低后续分析错误的风险，比如每次实验都要做阴性对照和重复实验，这些习惯都是在实习中养成的。2职业规划联结这次经历让我更清楚自己想做什么了。之前觉得搞科研挺好，但实习后发现企业里做项目节奏快、要求高，但回报也直接，能看见自己的工作直接推动产品进展。比如我参与的那个CART细胞系构建，虽然只是做了质粒扩增，但知道这个质粒最终会递送到T细胞里对抗癌症，这种成就感在学校做毕业设计时完全体会不到。现在想考研的话，可能会更倾向于选择生物技术转化相关的方向，比如基因治疗载体开发或者细胞治疗工艺优化。实习中暴露出我的短板，比如对生物信息学分析工具不熟练，公司做基因编辑验证时用的生物信息软件我都没用过，只能帮忙做些简单的数据整理。所以接下来打算自学Python，特别是BioPython这块，争取明年考个PMP证书，把项目管理能力补上。3行业趋势展望感觉基因编辑行业现在特别火，但技术壁垒也挺高。我实习的公司就遇到过一个难题，他们开发的基因递送载体在临床试验中递送效率不稳定，最后发现是脂质纳米颗粒的配方问题。回来后我查了最近NatureBiotech的文章，发现mRNA技术正在往自体细胞治疗方向发展，这给我一个启发，以后可能得关注下RNA干扰技术结合基因编辑的应用。实习时还发现企业对实验成本控制特别严格，比如他们自己合成gRNA会比直接买成品便宜不少，但前提是得有足够大的用量需求。这让我意识到，做技术不仅要会，还得会算经济账。行业里像CRISPR酶的价格从2022年的几百美金/ug涨到现在的上千美金/ug，技术迭代的速度远超我们学生的认知。4心态转变最大的变化是抗压能力。刚开始做实验时，一次失败就焦虑好几天，现在明白科研哪有不踩坑的，关键是怎么快速定位问题。8月15号我负责的实验因为细胞污染失败了，第二天我就主动重做，还写了改进方案给导师看，最后导师夸我能沉住气。这种心态转变比学会多少新技能更重要。对工作的责任感也变强了。记得有一次半夜接到导师电话，说某个实验条件突然变了，让我赶紧检查，虽然只是个小事，但那种被信任的感觉让我觉得，以后做事情不能只考虑自己，要为整个项目负责。这种责任感在学校做实验时完全体会不到。5未来行动计划下学期把公司用的实验设备操作都考个证，比如流式细胞仪和测序仪，这些技能在应聘研发岗位时肯定加分。另外打算多参加行业会议，现在网上免费的Webinar也多，像NIH每年发的CRISPR技术指南，这些都能学到