草莓脱毒育苗技术规程

2003-10-01发布2003-10-10实施本标准2003年10月1日首次发布本标准起草单位：成安县草莓协会成安县技术监督局木标准主要起草人：杨建军杨峰梁领军刘建民范振海申光辉本标准规定了草莓脱毒育苗技术的灭菌、育苗、移栽及称苗后初期管理。2定义2.1脱毒育苗(组织培养简称组培)植物组织培养是指在无菌条件下，将离休的植物器官、组织、细胞以及原生质体，培养在人T2.2有菌指暴露在空气中或曾经接触过自然水源的物体表面，在自然条件下形成的或附带的织菌。2.3无菌指利用高温、射线等杀菌或滤膜过滤除菌等物理措施而进行的灭菌，主要包括：干热、湿热、指利用各种化学药剂，杀灭细菌的技术措施，常用的灭菌剂有：氯化汞、福尔马林、双氧水、3.1洗涤用1%稀盐酸或洗衣粉、肥皂将可溶性无机物除去然后用清水洗净。称40g工业用重铬酸钾加入100ml水中，加热致溶解然后冷却，再慢慢注入浓流酸800m,边加将待洗的器具、用具浸泡在洗液中，浸泡时间不低于4小时，再用清水冲洗干净，在洗涤过程中应防止洗液溅到衣服和皮肤上损坏衣服或灼伤皮肤。3.2.1接种玻璃、金属用具灭菌，宜使用干烘法灭菌，把器皿或用具放胃在电热烘箱或红外线干燥箱内干烘，保持温度170℃干烘2小时，玻璃器具还可用高压蒸汽灭菌。3.2.2接种常用金属器械(如：刀、剪、镊子等)灭菌，在使用前应用70%酒精棉球仔细擦净，浸泡在70%酒精液中，使用时先在酒精灯外焰上灼烧，侍冷却后使用。用高温、混热法灭菌，将洗净晾干的衣、帽、口罩用纸包好后放入高压灭荫锅中，待温度达到121℃、湿度达到100%,压力达到1.05MPa时，灭菌30分钟。用高压蒸汽灭菌法灭菌，将耐热培养基物质置于高压灭菌锅中，当温度达到121℃,压力达到应采用过滤灭菌法灭菌，将固体物质置.入溶器内然后向溶器内加水，边3.4.1冲洗3.4.1.2将清洗干净的植物材料置入每100ml加40g洗衣粉的洗衣粉溶液中，用木棒轻轻搅拌5分3.4.2.2将处理好的植物材料和接种用具、灭菌溶液、无菌水、空烧杯、待用培养基等置于无菌工3.4.2.3把沥干的植物材料转放到灭过菌的三角瓶或广口瓶中，倒入0.1%氯化汞溶液或20%新沽尔灭溶液，轻轻摇动三角瓶或广口瓶灭菌7分钟-8分钟。3.4.2.4在灭荫时间大于7分钟，小于8分钟时，将灭菌溶波倒出，倒出灭菌溶液不得倒出植物材料，然后立即倒入无菌水轻轻摇动冲洗，每次冲洗3分钟，冲洗3--10次。4接种在接种前10分种，工作人员穿戴好工作服、工作帽，然后用70%酒精擦试工灭菌处理的植物材料和接种用具放置工作台上，将待用试管或三角瓶，水平拿着靠近酒精火焰上烤4.2选材应选用生长8天—10天的茎尖或造取休眠的茎段经人工催芽15天的顶芽和腋芽。4.3接种将经过表面灭菌茎尖材料在解剖镜下，用解剖针一层一层地仔细剥离叶片，直到暴露出圆滑生长点，用锋利的解剖刀小心切取0.5mm大小的带1-2个叶原基的茎尖，然后用右手拿镊子夹住送入试管轻轻插入培养基上，放入培养室进行培养，镊子灼烧后放回架上。4.4培养4.5.1炼苗 应选用疏松、排水性和透气性的良好物质(如石珍、珠岩),并用0.3%-0.5%高锰酸钾彻底塑料薄膜，容器苗在膜内培养10天-15天，揭膜段练3天-5天后可移植到大田。试管苗移栽应适应密植，株距应为30cm,行距应为50cm。移栽时应选择在阴天进行，先确定株距、行距，用花铲挖成深5cm,底部成圆锥形的小穴，然后将容器苗轻轻置入穴，注意根要舒展，不可窝根，再覆土轻压根颈部的周围浮土，压实后以土表与小苗根颈部持平，及时浇透水，使土与苗根接紧.移植时灌水后隔3天-5天游第2次水，以后根据墙情15天-20天港水一次，保持土壤水分不低于田间持水量的70%,移栽7日后应喷施0.2%磷酸二氢钾和0.2%尿素溶液进行叶面施肥。(规范性的附录)A.1培养基组成成分A.1.1无机营养成分A.1.2.1含氮物质A.1.2.2碳源主要是浓度为2%-5%的燕糖。A.1.3生长激素主要有吲哚乙酸IAA、明哚-3T酸IBA、萘乙酸NAA,二氯苯氧乙酸2,4D,这些激素广泛用于生根，并与细胞分裂素相Ⅱ作用促进茎的增殖。A.1.3.2细胞分裂素主要有苄基腺嘌呤D·-BA和赤霉素(A₃,主要用于促进细胞分裂和由愈伤组织或器官A.1.4琼脂是一种由海藻得平的习糖类物质主要用干使用浓度为0.7%—1%。A.2配制方法A.2.1将琼脂蔗糖按使用景放入容器，按使用浓度加入蒸馏水并加热至溶解。然后分别按使用浓度加入培养基各种元素，包括生长调节物质和其他特殊成分。A.2.2把配制好的营养液分别装入培养器中，用寒或盖封严瓶日，装入高压灭菌锅在温度分类无机物质分类硝酸铵(NH₄NO₃)硝酸钾(KNO₃)氯化钙(cacl₂·2H₂0)硫酸镁(MgSO₄·7H₂o)一磷酸二氛钾(KH₂PO)微量元素碘化钾(KI)硼酸(H₃BO₃)硫酸锌(ZnSO4·7H₂0)钼酸钠(Na₂MoO4·2H2o)铁盐硫酸铜(CuSO4·5H₂o)55氯化钴(CoCl₂·6H₂o)硫酸亚铁(FeSO₄·7H₂o)乙二胺四乙酸二钠(Na2一EDTA)有机物质烟酸(VB₃)盐酸吡哆醇(VB₆)盐酸硫胺素(VB₁)起始期浓度茎芽增殖期111赤霉素((A3)琼脂%33我县草莓是八十年代初，引进种植的，有二十多年的种植历史。草莓是一种生产周期短、效益高的经济作物，也是具有营养、药用和医疗价值的高样水果。县委、县政府把草莓种植列入县农业经济发展之道。在草莓种植过程中，病苗、死苗逐年上升，严重地阻碍了草莓种植的发展。为此经成安县草莓协会提出、并与成安县技术监督局菜编写，参照了《河北林果研究》等科学先进资料，结合县农艺师和经