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一例猫传染性鼻气管炎的诊断及治疗研究摘要该病例来源于本人在延边大学动物医院实习期间接诊的一例患有传染性鼻气管炎的猫咪。在进行正式治疗前,我们对病猫进行了全面且细致的体格检查,检查结果显示该猫的血液中出现炎性细胞显著增高的现象,且白细胞数略高,血红蛋白数、红细胞总数、红细胞压积均明显高于正常指标,血液中的磷离子沉积,除此以外未见其他的数据异样情况。在进行连续两天的消炎后,又纠正了其酸碱平衡失调以及电解质、水的代谢紊乱。但在进行进一步的诊断过程中,我们发现该病的情况较为复杂,与多种疾病的症状极为相似,难以确诊,所以我们采用了PCR荧光定量检测技术,以便对疾病的确定结果进行判断。在确诊之后,我们对病猫进行了连续数日的喂服以及输液的药物治疗,病猫在七日后完全恢复正常的饮食活动,预后良好。本次治疗取得了圆满的成功,为今后有关疾病的诊疗提供参考。关键词:猫;传染性鼻气管炎;诊断;治疗目录TOC\o"1-3"\h\u6147前言 前言我国部分城市的宠物医院近些年来常会有猫传染性鼻气管炎的病例出现,而且该病毒迅速传播。猫病毒性鼻气管炎(FVRs)是由猫单纯疱疹病毒I型引起的猫上呼吸道急性高度接触性传染病,属于疱疹病科甲型疱疹病毒亚科,是传染性极强的恶性疾病,也会引起眼部的疾病[1]。该病毒属于大型病毒,拥有典型囊膜的线状双股DNA,病毒粒子为圆形或椭圆形,20面体对称[2],不同成熟状态的病毒粒子直径不同,它是由核心、衣壳、囊膜组成的,核心是一个匀称的圆形电子致密区,其中有一些可见斑纹样的构造,外围衣壳由162个壳粒构成,所述囊膜包含纤突和病毒膜。疱疹病毒首先从美国发现,Crandell和Maurer于1958年初次从幼猫体中分离出了病毒,但是国内关于FHV-1分离的报导却相对较少[3]。1958年,该病毒首次被中国学者从幼猫体内分离出来,它对外界抵抗力较弱,在相对干燥的环境下,12h就会完全丧失活性,可被甲醛和苯酚灭活。该病的病程可以分成感染期、潜伏期、发病期和死亡期。另外,传染性鼻气管炎的发病率达到了100%,2个月-3个月的幼猫是最容易被感染的,一旦感染死亡率高达50%[4],但成年猫的死亡率相对较低。FHV-I主要是通过肠胃、鼻、结膜、口等接触传播的,当病毒进入机体后,大多数汇集在咽部、鼻腔、中隔等上呼吸道,有的则通过鼻泪管在眼结膜的上皮细胞等地方大量增殖,从而引起局部上皮细胞脱落坏死,最终导致打喷嚏、流鼻涕、体温升高、流泪、咳嗽、结膜炎、角膜炎等临床病症。由于大量分泌物在鼻道和眼睑处排出,从而导致局部组织水肿,严重者可能会导致视力丧失、呼吸困难等。发病后期病毒在眼角膜、结膜处快速繁殖,引发角膜溃疡,甚至穿孔、失明。当病毒在口腔、舌、咽部大量增殖时,会引起口腔、齿龈、舌的溃疡甚至糜烂从而,影响猫的正常进食。严重的可感染到肺部,引起肺炎。若出现重度急性脱水、反复发烧、每天都绝食甚至绝水等严重症状,治疗会非常困难[5]。猫患此病可终身带毒、排毒。FHV-I与杯状病毒、衣原体、支原体、呼肠弧病毒、萼状病毒、猫瘟病毒等引起的上呼吸道病症极为相似[6],因此本病的诊断需要通过血清学诊断、病原学诊断等,但在实践中我们一般采用分子生物学诊断方法来进行确诊。分子生物学诊断包含了普通PCR、荧光探针-PCR、RT-PCR等。检测的方法是通过采集染病动物的眼鼻处分泌物、血液、尿液等,利用FHV核酸检测试剂盒或者送至相关机构,进行PCR扩增反应,点样进行凝胶电泳和紫外线成像观察,从而确定是否扩增出特定的条带,最终判断该动物是否被感染。猫传染性鼻气管炎的治疗以对症疗法、预防感染为首要原则。治疗过程中可以选择注射猫用干扰素,同时有眼部疾病的患猫可以适量滴加抗菌消炎的眼药水,对于有上呼吸道症状的病猫则采用雾化治疗。猫传染性鼻气管炎主要依靠疫苗防控,药物治疗效果欠佳[7],主要原因是其确诊较为困难[8],容易造成继发感染,因此在诊疗的过程中应当使用抗菌药,对于饮食欲废绝的病猫应当适当进行静脉输液,补充葡萄糖、维生素、电解质等。特别应当增补赖氨酸,因为当赖氨酸缺乏时,容易使机体对疱疹病毒的抵抗力降低。此外,对于染病动物特别是幼猫要注意保暖。早发现、早治疗一般能降低本病的死亡率[9],急性损伤性的患猫,可能会出现鼻甲骨和黏膜的永久性损伤,导致其患上慢性细菌性鼻炎、鼻窦炎等。该病的普遍传播与猫群的活动密度和环境被病原污染的情况有关。对于猫传染性鼻气管炎处于恢复期时,病毒可潜伏在三叉神经节内,当病猫抵抗力下降时,可能会复活病毒,引起反复感染。目前,该病对我国宠物行业存在着非常大的威胁。因此,进一步完善FHV-1病原学、流行病学数据库,进行病原诊断与疫苗研发等工作的研究,对FHV-1的防治与风险评估意义重大。为帮助病猫减轻传染性鼻气管炎带来的痛苦,本课题主要研究该病的临床症状、诊断技术及治疗方案,为今后该病的防治提供参考。材料与方法1.1病例来源该病猫为雌性,体重2.8kg,年龄6个月,于2天前发病,主诉突然精神沉郁、食欲不振,同时伴有咳嗽、张嘴喘息、打喷嚏、呕吐、腹泻等病症。1.2实验药品药品生产厂家产品批号泼尼松龙片四川飞扬动物药业有限公司220721589氨茶碱片广西梧州市正通瑞和牧业有限公司200291308塞拉菌素溶液硕腾企业管理有限公司2191565速诺美国辉瑞动物保健品有限公司51738833猫干扰素天津瑞普生物技术股份有限公司2017079黄芪山西兆益生物有限公司041102715维生素C黑龙江省汇丰动物保健品有限公司0801814095%葡萄糖注射液吉林省都邦药业股份有限公司16120213090.9%氯化钠注射液吉林省都邦药业股份有限公司1601070506庆大霉素湖北武当动物药业有限责任公司170081505地塞米松浙江大飞龙动物保健品股份有限公司110111146头炮哌酮钠悦康药业集团有限公司01570130氨苄西林青岛天元普康生物技术有限公司152206285盐酸多西环素河南后裔制药有限公司163191353神经康泰邯郸市神康药业有限公司030665084猫鼻支特效滴眼液北京博莱得利生物技术有限责任公司0251652391.3实验仪器输液泵(HX-1型)购自华玺医疗;血液分析仪(PROKANPE-6800VET)购自深圳市普康电子有限公司;X射线摄影机购于南京普爱医疗设备股份有限公司;FHV-1免疫荧光抗体购自青岛瑞尔生物科技有限公司;高速离心机购自湖南湘仪实验室仪器开发有限公司;电泳仪购自济南鑫宇鑫医疗设备有限公司。2.1临床检查通过问诊、视诊、听诊、叩诊、触诊等对患猫进行全面且细致的检查,即对病猫进行整体的检查以及各系统的检查。2.2实验室检查从病猫的内侧前肢的头静脉皮下采血,将血液注入抗凝管,混合均匀后,静置两分钟,按照血液分析仪常规使用方法进行检验。2.3X光检查对病猫进行腹背位及右侧位X光检测。腹背位检查:使病猫处于仰卧状态,前肢向前拉,后肢自然地放置和弯曲呈“蛙腿”样,X线束中央与脐部对齐,投射范围为剑状软骨至耻骨;右侧位检查:使患猫右侧卧,前肢向前拉,后肢向后拉,头部和颈部自然舒展,胸骨抬起,胸部扭转。投射范围从肩前至第一腰椎,投射中央在第4-5肋间隙(肩胛骨后缘1-2指处),胸廓的厚度以第13肋骨处的厚度为标准;2.4荧光定量PCR检测收集病猫的眼鼻排泄物,采用PCR扩增反应进行传染性鼻气管炎病毒的分子生物学诊断,通过判断是否扩增出特定条带,以确定该病猫是否被感染。引物序列为F:5’-GCGAAGTACCTGGTCAGAGC-3’;R:5’-TAGTGGGCGGTGATATAGGC-3’。产物大小182bp。反应条件为:预变性,95℃,10min,1个循环;变性,95℃,30s,退火,60℃,30s,延伸,72℃,30s,30个循环;充分延伸,72℃,7min。扩增产物于1%的琼脂糖凝胶中电泳,紫外线下观察产物大小[10]。3.1治疗通过临床病症以及实验室检测结果进行综合性分析,可以确定该病为传染性鼻气管炎。本病的主要治疗原则是对症支持疗法、预防感染和增强免疫力。具体治疗措施如下:第1天:氨茶碱:0.12ml,泼尼松龙:1.5mg,速诺:0.32ml混合皮下注射;并使用大宠爱1支滴于肩颈部。第2天:庆大霉素:8mg,地塞米松:2mg混合滴鼻。全价营养液:3ml,0.9%Nacl:15ml混合静脉注射;第3天:头孢哌酮钠:0.1g,地塞米松:1mL,ATP:1mL,肌苷:1mL,COA:1mL,0.9%Nacl:20mL,混合静脉注射,维生素C:2mL,50%葡萄糖5mL,静脉注射。黄芪:8mL,5%葡萄糖:10mL,静脉注射;第4天:使用猫鼻支特效滴眼液,滴鼻点眼,每天5次。代谢强:1ml,维生素C:0.6ml,5%葡萄糖:15ML混合静脉注射。LA-R:50ML,5%葡萄糖:15ML混合静脉注射。皮下注射猫干扰素半支,呼舒坦:0.3ml。喂食盐酸多西环素,安可舒每日2次,神元康泰10ml,同时使用热水袋对病猫进行保暖。而后在彻底痊愈前坚持每天按时按量用药。结果4.1临床诊断结果该猫精神状态不佳,咳嗽,打喷嚏频繁,呕吐,拉稀且张嘴急促呼吸,体毛杂乱无光,皮肤松弛,大范围脱毛。经问诊得知病猫平时饮食以猫粮为主,零食为辅,一周前该猫因主人外出工作被送去宠物店寄养,寄养室环境良好,无病猫病狗相互传染的情况。随后进一步进行体格检测,结果显示:心率133次/min,心跳未见异常。呼吸45次/min,呼吸急促且张口呼吸。触诊腹部空虚,未见明显紧张感和疼痛感。4.2实验室检查结果(1)血常规检查结果患猫在治疗前、治疗后及复查时都做了血常规检查,结果见表1:血常规检测结果表1检查项目英文治疗前治疗后复查单位参考范围白细胞总数WBC19.822.219.4109/L5.5-19.5血红蛋白数HGB161.0158.5151.6g/L80.0-150.0淋巴细胞LYM#61.452.346.1%20.0-55.0中间细胞MID#1.71.51.2109/L0.1-1.8粒细胞GRAN#20.315.711.6109/L4.0-12.6红细胞总数RBC11.1510.437.361012/L5.0-10.0红细胞压积HCT53.746.947.9%24.0-45.0就诊第一天,患猫在治疗前的血常规见第一次结果:该猫的白细胞数略高,且血红蛋白数、红细胞总数、红细胞压积呈显著的上升趋势,炎性细胞也随之升高。结果表明:该猫状态极其不佳,由于病猫眼鼻部分泌物过多,引发了感染,所以淋巴细胞、粒细胞的数量也会增加。在整个治疗结束后,患猫来再次进行检查,血常规结果见第二次结果:白细胞总数升高,血红蛋白数略有降低,淋巴细胞数回归到正常范围,粒细胞数略高但较治疗前有明显的下降,红细胞总数和红细胞压积仍处于高于正常值。结果表明:虽然炎性细胞的指标依染处于较高状态,但低于治疗前血常规结果,说明该猫处于恢复期,体内炎症仍未完全清除。治愈约两周后,病猫再次来到医院进行复查,血常规结果见第三次结果:血红蛋白数略高,其他各项都已经恢复到了正常的范围。结果表明:患猫恢复良好,且未引起其他并发症,本次的治疗非常成功。(2)生化检查结果患猫在治疗前、治疗后及复查时都做了血常规检查,结果见表2:生化检测结果表2检查项检测值单位参考范围ALB(白蛋白)3.5g/dL2.3-4.0ALT(丙氨酸转氨酶)59U/L10-100ALKP(碱性磷酸酶)82U/L0-111AMYL(胰淀粉酶)1342U/L500-1500BUN(尿素氮)8.3mg/dL2.5-9.6CREA(肌酐)106mg/dL44-159AST(天门冬氨酸转氨酶)-U/L0-48GGT(谷氨酰转肽酶)-U/L0-7LIPA(脂肪酶)-U/L200-1800PHOS(磷)0.71mg/dL08-2.2TP(总蛋白)73g/dL57-89TBIL(总胆红素)6.8mg/dL0-15.4GLOB(球蛋白)3.8g/dL2.5-4.5GLU(血糖)6.4mg/dL22.9-8.3CHOL(胆固醇)5.2mg/dL1.4-5.7CA(钙离子)2.48mg/dL2.0-9.3通过上表可以看出,磷总量较低,疑因两天未进食造成低血磷,说明后期治疗需进行营养补充,其他未见异常。4.3X光检查结果X射线检查胸腔内未见明显异常,支气管处有明显炎症反应,故诊断该病为支气管部位的疾病。4.4荧光定量PCR检测结果可见约182bp的条带出现,检测结果为阳性。该病猫最终被诊断为患有传染性鼻气管炎。5.1治疗结果治疗第1天:患猫呈现皮肤松弛,大范围脱毛,咳嗽,打喷嚏频繁的情况,眼鼻处有少量分泌物。治疗第2天:患猫食欲不振,精神沉郁,张嘴喘息,眼鼻处分泌物较多,皮肤松弛,有皮屑,且无饮无食。治疗第3天:频繁仰颈,呼吸困难,拉稀,精神沉郁,口腔有腐烂迹象,眼部红肿并伴有脓性分泌物。治疗第4天:呼吸困难症状稍有缓解,从病猫眼部及鼻部流出的脓性分泌物颜色转淡,打喷嚏,拉稀等症状依旧持续,全身脱毛,进行性消瘦。治疗第7天:症状减轻,体温39.1℃,全身脱毛并伴有大量皮屑,鼻眼分泌物显著减少,食欲开始恢复,打喷嚏,咳嗽次数减少;治疗第9天:病情逐渐好转,体温38.7℃,饮食恢复正常,咳嗽,打喷嚏等症状得到根本性缓解,偶有拉稀现象;治疗第11天:鼻眼分泌物消失,体温38.5℃,偶见轻度咳嗽,血常规检查正常,基本痊愈。讨论传染性鼻气管炎的病因很多。主要是猫咪感染疱疹病毒I导致的。本病没有更好、更准确的治疗方法,只能通过对症疗法防止继发感染。治疗前给患猫做了血常规,结果显示炎症细胞较高,初步诊断为哮喘导致,并没有做进一步的检查。但是在消炎连续两天后症状没有明显的缓解,才进行其他实验室检查。经问诊得知该猫平时饮食主要以猫粮为主,但近期吃喝及排便均出现异常。在实施进一步检测及治疗时,由于病猫长期输液,导致其机体的水、电解质失衡,所以,在进行进一步的诊断和治疗前,需要通过静脉滴注补液来纠正电解质失衡和脱水。待病猫的身体状况良好后方可进行下一步诊断。治疗过程中选择对症治疗、预防感染和增强免疫力的方法。本病的治疗常采取抗菌药物疗法,可以有效防止继发感染,联合对症治疗效果最佳。对于患有眼鼻部感染的猫,治疗期间应经常擦拭其眼鼻周围的皮肤,避免分泌物刺激。眼部分泌物较多的猫,可使用氯霉素、氯四环素或氧四环素眼膏,局部喷雾可以起到软化分泌物、防止结痂的作用。如果患猫出现鼻黏膜严重充血的情况,短期使用收敛性药物可以改善通气。另外,对于出现疱疹性角膜炎的猫,使用抗疱疹的药物可对该症状起到有效的改善作用,内服猫干扰素则可以作为辅助的抗病毒治疗措施。继发性慢性鼻窦炎的治疗相对比较困难,但抗生素治疗可以缓解该症状,但需坚持使用,因为其停药后极易重现。如果病症十分严重,也可以结合抗生素和收敛药品,以减轻充血,缓解症状。对于没有食欲或不能自主饮食的猫,应及时进行静脉补液,以保持体内的水盐代谢均衡。对于厌食3天以上的病猫,应强迫进食,并给予适当的营养支持[11]。加强动物饲养环境管理,是预防本病最根本的措施。将猫饲养在通风良好的环境中,同时对新种或引进种的母猫应进行严格的检疫程序,病猫遗体可以通过深埋或盐水处理的方法消除。除了对环境进行消毒以及合理的管控以外,对易感猫进行免疫接种是预防FHV-I最重要的预防方法。虽然FHV-I疫苗不能完全防止病毒的感染,但可以有效预防疾病的产生,缩减病毒的排出。当前市面上使用的疫苗主要有鼻气管炎弱毒疫苗和灭活疫苗,国内外均有弱毒疫苗的供应,该类疫苗可以单独使用或者也可以与猫杯状病毒结合成二联苗,或与猫泛自细胞减少症病毒、猫肺炎衣原体结合成多联苗使用,疫苗一般采用肌肉注射的方法,于60日龄初次免疫,90日龄增强免疫,然后每年免疫1次,可以使猫得到很好的保护。灭活疫苗则需同时使用佐剂,一般仔猫在断乳期接种,免疫2次,间隔时间为30周。猫咪一旦患上了传染性鼻气管炎,就算治愈也会终身带毒。所以,如果治愈后,猫咪免疫力下降,就有可能导致复发鼻支。对于那些得过传染性鼻气管炎的猫咪,建议主人注意做好相应的预防措施,不让猫鼻支有任何复发的机会。首先我们应该知道猫容易得鼻支的具体原因,该病主要是由于猫体内含有大量的精氨酸,且无法自身合成赖氨酸,而人和狗可以自身合成赖氨酸,所以猫鼻支只在猫科动物间传播[12]。所以对于体内有病毒的猫咪来说,定期补充赖氨酸则显得尤为重要。在应激反应和缺乏营养的情况下,猫咪极其容易出现复发猫鼻支的情况,因此主人在平时应注意猫咪的饮食营养均衡,让猫咪多运动、多锻炼,从而增强猫咪的免疫力。同时,猫在感冒着凉时鼻支也容易复发,这是因为在猫感冒的时候会引发支气管炎,如果不及时处理的话,会引发上呼吸道炎症,从而激发体内的病毒[13]。所以,建议猫主人平时一定要多注意给猫做保暖工作,尽量不要让猫咪感冒了,如果猫真的感冒了的话,要及时采取有效的治疗措施,让猫咪尽快好起来。通过临床与实验室检查以及后期的预后治疗和护理,病猫逐渐恢复健康,本病例为后期的临床诊断与治疗提供参考。结论通过实验室检查和临床检查可确诊该猫咪患病为传染性鼻气管炎,且经数日药物治疗后预后良好。参考文献黄明.猫传染性鼻气管炎研究进展[J].山东畜牧兽医,2013,34(9):80-82.牛江婷,伊淑帅,刘宏凯,等.猫传染性鼻气管炎研究进展[C]//中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集.[出版者不详],2017:208.MaedaK,HorimotoT,MikamiT.PropertiesandFunctionsofFelineHerpesvirusType1Glycoproteins[J].JVetMedSci,1998,60(8):881-888.蒋虹,时建东,吴小闲.猫病毒血清学检测方法的建立及初步应用[J].中国实验动物学杂志19999(1):39-41.刘东旭,杨思佳,徐珊,等.猫传染性鼻气管炎及防治[J].畜牧兽医科技信息,2020(07):177.李梁,王娟,张朋丽,等.几例猫传染性鼻支气管炎的诊断和治疗[J].中国动物保健,2020,22(07):82-83.SemenkowSL,JohnsonNM,MaggsDJ,etal.Controlledreleas

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