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编号:CNALC2002.01A3-Protein—PeptidemassfingerprintingofcytochromeC—Matrixassistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry中国实验室国家认可委员会公布 检测/校准标准和方法对于检测/校准活动的有效性具有至关重要ISO/IEC17025CNALCNAL经CNAL审查通过且纳入CNAL凡意愿将其非标准方法纳入CNAL检测方法目录的机构,均可向CNAL提出确认申请,经CNALCNALCCNALC2002.01A3-蛋白质—细胞色素CProtein—PeptidemassfingerprintingofcytochromeC—Matrixassistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry鉴定细胞色素C。肽质量指纹谱(peptidemassfingerprinting,PMF)是指蛋白质被酶切位点专一的蛋白C(胰蛋白酶裂解位点在精氨酸(Arg)和赖氨C。或用数据库检索软件将实验所得肽质量指纹谱与数据库中每种细胞色素C细胞色素C11701.58Da,商品化细胞色素C(含HEME)12384.09Da。细胞色素CPeptideMonoAvg试剂:胰蛋白酶(测序纯),胰岛素,α氰基-4-羟基肉桂酸,Tris-HCl,pH7.5,(2μL,20μL℃)MilliporeZiptipC18Tip10%三氟乙酸(TFA):量取分析纯的TFA0.1ml,1.0ml将细胞色素C100~250μg100~250μlpH8.550mmol/L1:50(w/w)加入胰蛋白酶,37172l10%三氟乙酸(TFA)溶液终止反应。1l23KV。以CCA20%~40%。采用混合肽标准品作外标校正仪器。7m/z1046.54、1296.69、1347.74、1619.82、2093.09、2465.203147.47。(m/z2000100登录数据
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