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文档简介
移液管和加样枪的使用试剂使用1、仔细辨认标签,确定所需试剂及浓度。2、吸量管与所需试剂号码务必对准。3、用后盖好瓶盖,归还原处,以免影响她人使用。本学期实验内容1刻度吸管、可调式移液器得校正与误差分析-教师讲解2分光光度法测定物质得浓度-教师讲解3血清碱性磷酸酶活性测定:1、2、3组讲演4血红蛋白与核黄素得凝胶层析分离:4、5、6组讲演5
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳:1、2、36酶得竞争性抑制:4、5、67血糖测定:1、2、38血清谷丙转氨酶(GPT)活性测定:4、5、69质粒DNA得提取:1、2、310DNA得琼脂糖凝胶电泳分析:4、5、6,实验总结:1-6组实验课教学改革改革方案:前2次实验由老师讲解,从第3次实验开始,同学们参与实验教学,担任“小老师”,具体安排如下:本实验室共分为6个小组,每组4~5人,各组推选1名组长;第3个实验,由1、2、3组各自准备与本次实验内容相关得ppt,并各选派1位同学讲演,每位同学讲演时间10~12分钟,讲演结束后为自由提问、讨论与老师点评时间(30分钟);第4个实验,由4、5、6组进行ppt准备与发言,方法同上;第5-10个实验依次类推;注意:每次得ppt准备需全小组同学共同参与,但由小组内得不同同学发言,做到每个同学都有发言机会;ppt制作(包括材料得收集准备、内容得条理性与演示效果等)、每个同学得讲演(内容得熟悉程度、讲解得条例性、对同学问题得回答情况)、回答问题、团队合作都将计入实验成绩。实验成绩计算方法实验成绩占生化总成绩得35%实验成绩考勤:10%实验报告:20%操作:30%ppt制作、讲演、回答问题情况:40%自评:每次讲演完后,各组评出自己组内得前两名互评:非讲演组(如4、5、6组)给讲演组(如1、2、3组)分别从ppt制作、讲演、回答问题、团队合作方面进行排序教师评价:教师从ppt制作、讲演、回答问题、团队合作等方面对讲演组进行评价,提出表扬与改进意见等实验评分标准考勤:迟到扣10分;旷课为0分操作:不穿白大褂,-10分不带实验教材,-10分没有预先预习实验,-10分实验操作不规范,-5分过失造成玻璃器皿损坏,-5分过失造成仪器损坏,-10分没有清洗玻璃器皿与还原仪器,-10分没做清洁,-10分实验报告:
没有实验目得,-5分没有实验原理,-5分没有实验过程,-10分涂改实验数据,-20分没有分析与实验讨论,-15分没有报告临床意义,-5分刻度吸管&微量可调式移液器得使用、校正与数据处理彭帆E-mail:Tel:Officetel:生物化学基本实验技能训练(一)实验目得清楚生物化学实验室规章制度与实验要求掌握刻度吸管得分类与使用方法掌握微量可调式移液器得原理与使用方法,了解可调式移液器得校正方法建立实验误差、准确度与精确度得概念,掌握误差分析计算方法问题:将溶液从一容器转移到另一个容器。用什么量具?如何确定容量?就是否精准?一、刻度吸管(pipette)得分类与操作
分类:10mL,5mL,2mL,1mL,0、5mL,0、2mL,0、1mL(吹?)
刻度吸管得操作方法1、使用前:检查刻度吸管就是否配套。2、吸液:排→插→吸→按3、调节液面:放→靠4、放出溶液:靠→放→停;*若吸管上标有“吹”,则需将管内残余液体吹出。
12大家应该也有点累了,稍作休息大家有疑问的,可以询问和交流工欲善其事,必先利其器微量可调式移液器(俗称“加样枪”)得构造与操作
5mL移液器(1-5mL)1mL移液器(200-1000uL)200uL移液器(20-200uL)100uL移液器(20-100uL)10uL移液器(0、5-10uL)2uL移液器(0、1-2uL)微量可调式移液器得构造扭动转轴,可调整移液器容量手指把手吸头得排出器容量指示窗口吸头排出器套筒吸头圆锥体加样枪得操作方法1、容量调节:选定加样枪,调定所需容量读数。*请勿将按钮旋出量程以外!!!2、枪头装配:将加样枪垂直插入枪头中,稍用力左右转动使其紧密结合。*请勿使劲敲击枪头盒!!!4、放出溶液:按1st→按2nd→松
3、吸液:按1st→插→松→靠
(a)StartDispensing
(b)1stStop=Dispense(c)2ndStop=Expel5、弃去枪头:按排注意事项
加样枪得正确放置当加样枪得枪头里有液体时,应垂直放置加样枪。维护保养不使用时,把加样枪得量程调至最大刻度;定期清洗移液枪(肥皂水或60%异丙醇+蒸馏水+自然晾干);重复称量蒸馏水进行校准,环境温度为20-25℃。问题获得实验数据后,所得数据就是否准确?可靠性如何?如何正确记录与处理实验数据?三、实验结果得数据处理
准确度:分析结果与真值得接近程度,用误差表示、
误差:测定结果(X)与真实值(XT)之间得差值、
系统误差:
偶然误差:
绝对误差(Absoluteerror):E=X-XT
相对误差(Relativeerror):
准确度与误差(Accuracy&Error)
系统误差:由于分析过程中某些固定得原因造成得误差、1、性质:(1)单向性、重复性(2)与测定次数无关(3)可以校正,大小、正负可以测定2、产生原因:(1)方法误差(2)仪器与试剂误差(3)操作误差(4)主观误差3、校正:改变方法,校正仪器,采用高等级试剂等。
偶然误差
1、性质:(1)大小可变(2)方向不定,有时正、有时负。(3)只能减小,不能消除。
2、产生原因:温度、气压、湿度、仪器性能、人为得终点判断得变化等。
3、校正:不能消除,只有增加平行实验次数、
精密度与偏差(Precision&Deviation)精密度:在相同条件下,各次分析结果间得接近程度,用偏差表示、偏差:测定结果(X)与平均值()之间得差值、偏差小,表示数据集中,精密度高;反之,数据分散,精密度低、偶然误差影响分析结果得精密度、绝对偏差(Absolutedeviation,di)
:
di=单个测量值(Xi)-平均值()相对偏差(Relativedeviation,dr)
:
均值:
X=
标准偏差(Standarddeviation,SDorS)
相对标准偏差(RelativeStandardDeviation,RSD),又称变异系数(CoefficientofVariation,CV)
??准确度与精确度B
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