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文档简介
备案号:37440-20132013-06-01实施2013-06-01实施吉林省质量技术监督局发布I本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由吉林省林业厅提出并归口。本标准起草单位:吉林市林业科学研究院。本标准主要起草人:张海军、陈玉宝、王有菊、王江、李茂军。1件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。又名卵孢白僵菌,一种半知菌类的虫生真菌,分类上属于真菌门(Eumycota),半知菌亚门(Deuteromycotina),丝孢纲(Hyphomycetes),丛梗孢目(Moniliaceae),丛梗孢科(Moniliaceae)、习惯上称“母种”,由固体培养基培养保藏的原始纯化菌马铃薯200g切块(1cm×1cm×1cm)煮沸30min,过滤,取滤液,定容至1000ml,加入琼脂20g,2试管直立于高压灭菌锅中,灭菌温度121℃~126℃,压力0.1Mpa~0.15Mpa,时间30min。无菌接种针挑取原种25mm²~50mm²,接种于一级斜面培养基上,用接种针轻轻来回拉动2次~3次,在25℃恒温培养箱中培养10d~12d,观察剔除污染试管;保存在4℃~5℃冰箱中备用。按麦麸、稻糠和谷糠5:3:2的比例混合,用0.1%KmnO₄水溶液按与培养料质量比1:1的比例将培养料装入600ml普通培养瓶,装瓶至容积的2/3,用耐高温聚丙烯塑料薄膜封口。灭菌温度121℃~126℃,压力0.1Mpa~0.15Mpa,时间30min。灭菌12h后,在超净工作台上,用无菌接种针,按每支一级菌种试管接7瓶~9瓶的数量,将一级3在无阳光直射,23℃~25℃的条件下培养8d~10d。将培养料袋分层置于高压灭菌锅中,灭菌温度121℃~126℃,压力0.1Mpa~0.15Mpa,时间35min。下储藏期不超过6个月。4含水率标准为≤10%。8.3含孢量测定含孢量测定方法应参照GB/T25864-2010中5.3条执行。含孢量≥100亿/g。8.4活孢率测定准确称取蛋白胨0.5g、蔗糖0.5g、磷酸氢二钾0.1g,倒入250mL锥形瓶中,用蒸馏水定容至100mL,放入待测菌粉0.2g,振荡2min,将混合菌液滴在清洁的载玻片上,将载玻片放入垫有湿滤纸的培养皿中,置于25℃恒温箱中培养16h~20h,盖上盖玻片,600倍显微镜镜检;芽管大于孢子半径的孢子为萌发孢子;查数10个视野萌发芽孢子数和检查孢子总数;按(1)公式计算孢子萌发率:式中:R—孢子萌发率,%;N—萌发孢子总数;M—检查孢子总数。每个样品设3个重复,取3个重复均值作为该批次菌粉的活孢率。储藏期6个月时,活孢率≥80%。5(资料性附录)布氏白僵菌形态特征图表中名学名菌落特征菌丝特征分生孢子椭圆形至亚圆使明胶培养基底淡黄色,菌落茸有横隔膜,部呈深红色至紫菌培养的后期变直径为1.5m,生于产孢细胞顶端所
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