标本采集手册范本微生物学标本采集

标本采集手册范本】微生物学标本采集01血液及骨髓培养标本1.采集时间(1)一般原则患者发热初期或发热高峰、使用抗生素前，已经用药者，应在下次用药前。(2)针对性采样1)布鲁杆菌感染：最佳时间为发热期，可多次采血，24小时抽3~4次。2)沙门菌感染：可在不同时间采集标本，肠热症患者在病程1~3周内采集标本。3)亚急性心内膜炎：除发热期外，应多次采集。4)急性心内膜炎：治疗前1~2小时内分别在3个不同部位抽血样培养。5)急性败血症：脑膜炎、骨髓炎、关节炎、急性未处理的细菌性肺炎和肾盂肾炎除在发热期采血外，应在治疗前短时间内在身体不同部位采血，分别作需氧、厌氧培养。6)不明原因发热：发热期内多次采血，如果24小时培养为阴性结果，应继续采集2~3份或更多次血样进行培养。7)肺炎链球菌感染：最佳时期为高热、寒战或休克时。8)分枝杆菌感染：感染初期采血。9)导管相关性血流感染：对怀疑有导管相关性血流感染，需要保留导管的患者至少做2套血培养。2.采集部位及频率成人不明原因发热、血流细菌感染时应在不同部位(左、右侧)抽血2套，每套2瓶(需氧、厌氧各一瓶),例如以下情形。1)急性败血症：24小时内抽血3次或更多，在不同部位如左、右手臂或颈部采集。2)急性心内膜炎：治疗前1~2小时内，在三个不同部位采集血标本。3)亚急性心内膜炎：第一天在身体不同部位取三次标本。如果24小时培养为阴性结果，应继续采集2~3份或更多次多部位采集血样进行培养。4)无名热：不定期多次、多部位。24小时内不超过3次，如果培养为阴性结果，应继续采集送检。5)导管相关性血流感染：对怀疑有导管相关性血流感染，需要保留导管的患者至少做2套血培养：即外周血至少一套，导管血一套，并标记明确。两个来源的采血时间必须接近(<5分钟)即采血时间尽可能一致。3.采集方法(1)静脉血采集消毒肘静脉穿刺部位皮肤及周围，选择静脉和穿刺点，用75%乙醇从中心点向外消毒皮肤，再用碘酊按同样的方法消毒，待干(0.5~1分钟),再用酒精棉球擦去碘迹，不能用手再摸穿刺点，用双针采血系统直接穿刺肘静脉。(2)骨髓标本采集对穿刺一侧的准备工作如同外科切口一样，穿刺取到的骨髓注入儿童培养瓶内送检。(3)留置导管血标本采集1)对怀疑有导管相关性血流感染，需要保留导管的标本采集方法(适合隧道式/非隧道式中心静脉导管和静脉输液管)至少做2套血培养：经外周无菌操作静脉穿刺采血至少一套并标记明确，标本类别为外周血；另一套从导管中心或输液港(venousaccessport,VAP)隔膜无菌操作采血并标记明确，标本类别为导管血。两个来源的采血时间必须接近(<5分钟)即采血时间和采血量尽可能一致。2)对怀疑有导管相关性血流感染，需要移除导管的标本采集方法(适合隧道式/非隧道式中心静脉导管和静脉输液管):无菌操作静脉穿刺采血，获得2套独立的血培养(两个部位左侧和右侧做好标记);拔掉可疑的导管，无菌方式剪取导管尖端5~7cm片段，放入无菌痰液杯送实验室，用Maki半定量培养法对导管尖端片段进行培养。4.采集量成人推荐采血量为每套16～20mL(每瓶8～10mL),婴儿和儿童推荐采血量1~3mL。5.采集注意事项1)用75%酒精消毒瓶盖，不用碘酒消毒，待干30秒以上。2)严格做好抽血部位的无菌操作。3)若采血量充足，注射器采集的血液先注入厌氧瓶，后注入需氧瓶，碟形针采集的血液反之。若采血量不足，优先注入需氧瓶。需氧瓶可更有效分离出真菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食假单胞菌。4)注入标本的培养瓶应尽快送检，如不能尽快送检时，放室温保存，切勿放冰箱或培养箱内。02尿液微生物学标本1.采集时间宜采集晨尿，嘱患者睡前少喝水或不喝水，尿液在膀胱内潴留至少4小时以上，可降低假阴性率。2.采集方法(1)清洁中段尿采集清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应分开大阴唇，男性应上翻包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围。留取中段尿10mL于无菌容器中立即送检。(2)留置导尿管采集采用无菌技术用注射器经导尿管抽取尿液。先消毒导尿管采样口，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液。如果需要，将导管夹闭在管中采集尿标本，但夹闭时间不能超过0.5小时。(3)导尿法采用无菌技术用注射器经导尿管抽取尿液。用注射器穿刺导尿管留尿10mL于无菌容器中立即送检。3.注意事项1)收集尿液容器为广口的无菌防漏容器，收到尿液标本后应立即接种。2)标本采集后，应尽快送检，若不能尽快送检，置4℃冰箱保存，不得超过24小时。3)冷藏的标本不能用于淋病奈瑟菌培养。4)尿液标本应尽快送到实验室，若不能及时送达，应4℃冷藏或添加防腐剂(含0.5mL的硼酸-甘油或硼酸-甲酸钠),但均不能超过24小时。5)尿液标本不能通过收集袋引流管口流出的方式采集。6)中段尿液标本不能进行厌氧菌培养。03粪便微生物学标本1.送检原则1)在感染急性期采集腹泻粪便标本。2)排除一些病原体的携带状态，需要连续3份标本阴性。若需要连续采集3份标本，则两次采集6份标本间隔48小时。3)艰难梭菌感染：住院超过3天或入院诊断不是胃肠炎的患者出现腹泻宜进行艰难梭菌的检验。2.采集方法1)自然排便法：自然排便后，用无菌竹签挑取有异常部分(脓血、黏液和血液部位)的粪便于无菌螺帽容器中，立即送检。2)直肠拭子法：婴儿或重症患者腹泻时且暂时没有粪便时，才可采集直肠拭子检验腹泻病原菌。3.注意事项1)标本新鲜，置于无菌无渗漏的密闭容器中。2)标本采集后，应尽快送检，若不能尽快送检，置4℃冰箱保存，不得超过24小时。3)粪便标本常规不进行厌氧培养。4)肠炎和发热患者应同时送检血培养。04痰液及上呼吸道微生物学标本1.采集时间1)痰液：最好选择晨起漱口后，咳出的深部痰送检。2)鼻咽拭子：用于细菌学检验的拭子，插回采样装置或适宜的转运装置中，不推荐鼻咽拭子做普通细菌培养。2.采集方法1)自然咳痰液法：清晨起床后，清水反复漱口后用力深咳第一口痰液于无菌容器中立即送检。2)上呼吸道标本：采用无菌拭子转运培养基。3.注意事项1)标本需置密闭的无渗漏的容器内送检。2)标本采集后，应尽快送检，若不能尽快送检，置4℃冰箱保存，不得超过24小时。3)若需培养流感嗜血杆菌的标本，必须立即送检，不可冷藏。4)常规涂片找抗酸杆菌标本应取晨痰液，并应至少连续三日送检。05化脓和创伤部位微生物学标本1.采集方法1)开放性脓肿：用无菌生理盐水或75%酒精擦拭去除表面分泌物，尽可能采集抽吸物，或将采样拭子插入至病灶的底部或脓肿壁取其新鲜边缘部分。2)闭合性脓肿：消毒皮肤后，用注射器抽取脓肿物，无菌转移所有抽吸物至厌氧和需氧转运装置。2.注意事项1)尽量在使用抗生素前采集标本。2)若不能尽快送检标本，放4℃冰箱保存，采用血培养瓶培养的脓液标本，需室温保存，勿放冰箱，但培养淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌标本必须立即送检，不可冷藏。06穿刺液微生物学标本1.脑脊液1)采集时间：怀疑为脑膜炎的患者，在用药前应立即采集脑脊液进行培养。2)采集方法：用腰穿方法采集脑脊液2~5mL于无菌管中立即送检，第二管用于微生物学检验。3)注意事项：细菌检测标本在收集脑脊液后15分钟内送检；行腰穿过程中，严格无菌操作。怀疑隐球菌感染的脑脊液标本：宜同时选择墨汁染色、隐球菌荚膜多糖抗原检验和隐球菌培养。2.胆汁及其他穿刺液1)检测时间：怀疑感染存在，应尽早在用药之前或停止用药后1~2天采集标本。2)采集方法：无菌穿刺抽取标本于无菌管中立即送检，量不少于1mL。3)注意事项：标本量少的标本应加快送检，须在15~30分钟内到达。07烧伤部位微生物学标本1.采集时间1)早期：深Ⅱ度烧伤溶痂和Ⅲ度焦痂分离期。2)后期：每天采集烧伤标本于无菌管中立即送检。2.采集方法用无菌拭子，直接从烧伤创面的脓汁多部位采集。3.注意事项严格无菌操作。08生殖道微生物学标本1.采集方法阴道分泌物、宫颈分泌物、宫腔内容物、前列腺液、精液等严格无菌操作留取于无菌管中立即送检。2.注意事项1)严格无菌操作。2)采取宫颈标本避免触及阴道壁。09组织微生物学标本1.采集时间1)浅表皮肤黏膜：使用抗生素之前采用。2)深部组织：手术或内窥镜检查时采集。3)尸检标本：死后迅速采集。2.采集方法1)谨慎处理组织标本，因其很重要、很难获取。2)采集足够量的组织标本，微生物学检验所需的标本量≥1cm³为宜。3)特别小块的组织标本宜放在一个方形润湿的无菌纱布里送检。3.注意事项1)严格无菌操作。2)各种活检组织标本，立即送到实验室。3)甲醛固定的组织块标本不用于病原微生物分离。10导管标本用75%乙醇清洁导管周围的皮肤，无菌操作将导管尖端约5cm长放入无菌杯中送检，需立即送检，以防导管干燥。尖端与皮端导管标本送检需分开在不同的无菌杯中放置，并清晰注明。11真菌D-葡聚糖检测标本1.采集时间常规患者早上用药治疗前空腹采血。由于应用纤维膜进行血液透析患者、某些纱布或其他医疗物品中含有葡聚糖、某些品牌的静脉制剂(ALB、凝血因子、Ig等)含有葡聚糖，某些细菌败血病患者(尤其是链球菌败血症)、抗肿瘤药物(香菇多糖、裂殖菌多糖)等，会造成结果假阳性。故采集标本应该在用药治疗、血透患者透析前空腹采血。2.采集方法1)无菌操作采集静脉血液、脑脊液、胸腔积液、腹水4mL,放入无热源专用真空采血管，轻轻混匀。2)标本保存：标本采集后应尽量在半小时内送达实验室离心，并在2小时内使用，若不能及时检测，应无菌操作，转移到无热源转移管，-20℃冰箱中进行冷冻保存，1周内使用。3.注意事项1)由于脂血、溶血、黄疸的标本对结果有干扰，建议临床不要送检脂血、溶血、黄疸的标本。2)检测值<60pg/mL,为阴性；检测值介于60~100pg/mL之间，为临床观察期，建议1~2周后再次采血检测；检测值>100pg/mL,阳性，建议再次采血以确诊。12内毒素鲎定量测定标本1.采