卵巢内注射富血小板血浆治疗卵巢储备功能减退的临床应用及机制研究进展总结2026

卵巢内注射富血小板血浆治疗卵巢储备功能减退的临床应用及机制研究进展总结2026卵巢储备功能减退（diminishedovarianreserve，DOR）是指可用于生育的卵母细胞数量减少和质量减退。依据《卵巢储备功能减退临床诊治专家共识》，DOR的诊断标准包括抗米勒管激素（anti-Müllerianhormone，AMH）<1.1μg/L和（或）两侧卵巢窦卵泡计数（antralfolliclecount，AFC）<5~7和（或）连续2个月经周期的基础卵泡刺激素（follicle-stimulatinghormone，FSH）≥10U/L［1］。DOR人群生育能力降低，自然受孕概率显著降低，辅助生殖技术（assistedreproductivetechnology，ART）周期中常表现为卵巢低反应（poorovarianresponse，POR），卵母细胞及优质胚胎输出率低下，周期取消率高以及反复种植失败，最终导致临床妊娠率显著降低而早期妊娠丢失率升高［2-3］。传统干预手段如个体化促排卵方案、激素替代疗法等能在一定程度上改善助孕结局，但对于部分DOR患者效果仍有限，因此探索新型治疗策略显得尤为重要。自体富血小板血浆（platelet-richplasma，PRP）作为再生医学领域的创新疗法，近年来被引入生殖医学领域。浓缩血小板释放的包括血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）、血小板衍生生长因子（platelet-derivedgrowthfactor，PDGF）、转化生长因子（transforminggrowthfactor，TGF）-β1及胰岛素样生长因子-1（insulin-likegrowthfactor1，IGF-1）等多种生物活性因子可以发挥抗凋亡、组织修复及促血管生成等作用［4-6］。现有研究表明，卵巢内注射PRP技术可以改善卵巢功能，并在一定程度上改善妊娠结局，对女性生育力保存与提升具有潜在的治疗价值，已被探索性地应用于DOR患者的临床干预［7-8］。一.DOR病因及治疗现状DOR的发病涉及多方面因素。①年龄相关性耗竭：原始卵泡池自胚胎期形成后不可再生，随年龄增长呈进行性耗竭，此为生理性DOR的核心病因［9-10］；②遗传易感性：FOXO3基因突变、FMR1基因CGG重复扩增及TGF-β家族信号通路异常等可导致卵泡闭锁加速［11-14］；③自身免疫损伤：抗卵巢抗体、抗磷脂综合征及Th17/Treg免疫失衡可通过诱发卵泡微环境炎症反应损害卵巢功能［15-16］；④医源性损害：卵巢手术、化疗药物及盆腔放疗可造成不可逆的原始卵泡损失［17-19］。临床实践中，改善DOR患者ART结局的措施主要有①药物预处理：部分辅助药物与治疗措施，如脱氢表雄酮、生长激素、抗氧化剂（如辅酶Q10、维生素E、维生素C、褪黑素等）、中医药（包括针灸）等可能通过改善卵母细胞线粒体功能、减轻氧化应激损伤等机制，在一定程度上提高卵巢对促性腺激素（gonadotropin，Gn）的反应性，改善卵泡质量［3，20-22］。②调整卵巢刺激方案：针对DOR患者控制性卵巢刺激，可以通过增加Gn用量、添加黄体生成素等方法来提高获卵率。尽管DOR的病因存在显著异质性，其核心病因均集中于卵巢实质的功能性衰退与原始卵泡池的不可逆性丢失。现有的干预措施整体疗效有限，无法从根本上逆转DOR相关的卵巢功能衰退，仅能作为辅助治疗手段。在此背景下，探索旨在改善受损卵巢功能的再生医学策略，已成为一个重要的探索方向。二.卵巢内注射PRP改善卵巢功能的机制研究PRP是将全血离心获得的浓度至少是正常水平4~5倍的浓缩血小板［23-24］。自体PRP来源于患者自身血液，具有免疫原性低、规避异体排斥和感染风险的优势，其短期安全性良好，尚无严重不良事件发生［25-26］，根据《自体富血小板血浆制备技术专家共识》［27］，现有研究中PRP的制备均基于二次离心法［28-29］①采集血液：无菌采集外周静脉血液后加入枸橼酸钠等抗凝剂；②第一次离心：室温下以中等速度离心数分钟后血液将被分为3层，从上至下分别为血浆层、白细胞血小板层和红细胞层，将上中层转移至新离心管内；③第二次离心：室温下高速离心数分钟，回收或丢弃上清液，剩余底部即视为浓缩PRP。氯化钙或凝血酶等激活剂激活后的PRP在经阴道超声引导下注射至双侧卵巢皮质和（或）基质内［7-8，30］。卵巢内注射PRP治疗通过多重生物活性因子发挥作用，并涉及复杂的信号通路与分子事件，主要的作用机制概括如下。促进血管生成与改善卵巢微环境：VEGF、PDGF等通过激活血管内皮细胞，显著促进卵巢局部血管新生［4，31］。Chung等［32］研究显示，PRP注射后卵巢组织中CD31阳性血管面积增加，血管密度显著提升。Demyashkin等［33］通过构建电子辐射诱导的大鼠卵巢早衰模型发现，与单独照射组相比，照射前注射PRP可显著上调卵巢组织VEGF表达。这种血管重建作用有效改善了卵巢缺血微环境，增加血供和营养输送，为卵泡存活提供基础支持。此外，低浓度PRP通过平衡促血管生成因子与抗血管生成因子的比例，更有利于功能性血管网络的形成［32］。PRP中的致密颗粒释放的钙离子、二磷酸腺苷和三磷酸腺苷等改善卵巢组织内微环境，增加线粒体活性；此外IGF-1、TGF-β1在卵巢颗粒细胞中发挥抗凋亡和促增殖作用，为卵泡发育成熟提供必要的能量底物和调节因子，促进卵母细胞成熟、排卵［5-6］。激活休眠卵泡与调控发育相关通路：PRP通过激活磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（proteinkinaseB，AKT）/转录因子叉头盒蛋白O3a（forkheadboxO3a，FOXO3a）信号通路触发原始卵泡的募集和发育。Weng等［34］通过小鼠实验表明，PRP处理显著促进AKT磷酸化，诱导FOXO3a核输出，解除其对原始卵泡激活的抑制作用。活化PRP被认为可以通过DNA甲基化重编程（如恢复5-甲基胞嘧啶水平），激活Piwi-piRNA通路抑制转座子活性，上调Oct4等多能性基因，降低衰老标志物β-半乳糖苷酶的表达，重启卵泡发育，逆转卵巢衰老相关的基因沉默［35］。此外，Rosario和Anderson［36］认为PRP可以通过激活Hippo通路，促进卵泡激活和成熟。通过转录组测序，Roberts等［37］观察到PRP组与对照组与卵泡发育相关途径的基因表达显著不同，包括碳水化合物代谢、细胞死亡和存活、细胞生长和增殖以及细胞间信号转导等。3.调节炎症反应与减轻氧化损伤：PRP通过调控炎症因子平衡和抗氧化途径减轻卵巢组织损伤。Ermiş等［38］及Demyashkin等［33］指出，PRP显著降低促炎因子白细胞介素（interleukin，IL）-1β、肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α，TNF-α）及核因子-κB水平，同时增加抗炎因子（IL-4、IL-10）表达，抑制炎症细胞浸润。PRP处理组被证明氧化应激标志物NOX4［33］、总氧化状态及氧化应激指数组织病理学评分均降低［39］。Chung等［32］研究中TUNEL染色显示PRP处理后DNA损伤明显减少，卵泡凋亡减少，保护卵巢储备功能。三.卵巢内注射PRP治疗DOR的临床应用Sills等［40］于2018年首次报道了卵巢内注射PRP可改善体外受精（invitrofertilization，IVF）周期中预后不良的DOR患者的生育结局，其研究证实所有受试者均表现出AMH水平升高、FSH水平下降，并成功完成IVF周期且获得至少一个可冻存囊胚；该发现随后被多项临床研究进一步支持，相关病例报道数量显著增加［41-44］。一项纳入13项研究（1289例受试者）的荟萃分析显示，卵巢内注射PRP治疗可显著提高AMH水平，增加AFC、卵母细胞数和胚胎数［45］。目前初步的临床探索证实了卵巢内注射PRP治疗DOR的潜在疗效，使其成为研究者探索DOR治疗新途径的一个方向。本研究通过梳理近3年国内外相关文献，阐述卵巢内注射PRP在改善卵巢功能及妊娠结局方面的最新临床应用及疗效进展。卵巢储备参数的改善：目前，多项研究结果显示PRP治疗后AFC显著增加。Herlihy等［52］的多中心随机对照试验（randomizedcontrolledtrial，RCT）研究显示，PRP干预组患者AFC显著高于无干预的空白对照组（P<0.0001）。吴洪波等［28］的研究也显示，DOR患者经卵巢内注射PRP后AFC从0显著提升至2（P<0.001）。Devenutto等［53］的前瞻性队列研究显示，AFC从3.98显著增加到5.75（P<0.001）。然而，Hosseinisadat等［46］研究表明，PRP治疗后卵巢功能低下患者AFC虽有所增加，但差异无统计学意义。这种差异可能与患者基线特征、PRP制备方法或评估时机及注射剂量有关。值得注意的是，该研究结果还显示，不孕持续时间>5年是AFC改善不良的独立危险因素，为DOR的早期干预提供了依据。多项研究一致表明，PRP治疗可显著提升AMH水平。Hosseinisadat等［46］对POR患者的研究显示，PRP治疗后AMH水平显著升高（P<0.001），表明PRP对卵巢储备功能具有改善作用。类似地，Safarova等［49］的回顾性队列研究（n=60）以及Zhao等［29］的单中心前后对照研究（n=49）也证实了PRP对DOR患者AMH水平的提升效应。除队列研究外，亦有2项对照试验同样观察到PRP干预组患者AMH水平的显著改善［48，52］。在性激素水平方面，多项研究证实PRP能显著降低DOR及POR患者FSH水平［28-29，49-50，54-55，57］。此外，Safarova等［49］及吴洪波等［28］的研究还观察到PRP治疗后DOR患者雌二醇水平显著升高（P<0.05）。促排卵与胚胎实验室指标：卵巢内注射PRP对获卵数及第二次减数分裂中期（metaphaseⅡ，MⅡ）卵母细胞数量的影响呈现出较大的研究间异质性。Davari等［47］的单臂试验（n=20）仅观察到PRP治疗后POR患者获卵数轻微升高，差异无统计学意义，MⅡ卵母细胞数量差异亦无统计学意义，另有几项研究结果与此一致［50，56，58］。而Devenutto等［53］的前瞻性队列研究则报道PRP治疗后POR患者获卵数从2.63枚显著增加到3.65枚（P=0.01）。Zhao等［29］的研究采用PRP联合连续3次温和刺激方案，使DOR患者周期取消率从57.1%显著降低至10.2%，获卵数及MⅡ卵母细胞数量显著增多。彭婀娜等［55］及Li等［57］的研究分别表明经PRP单次注射与双次注射治疗后受试DOR及POR患者获卵数均有提高。在获胚数及胚胎质量方面，证据也呈现矛盾。部分研究认为PRP卵巢内注射PRP治疗可以增加DOR及POR患者获胚数［29，53，56］。但较多研究显示卵巢内注射PRP对DOR、POR及早发性卵巢功能不全（prematureovarianinsufficiency，POI）患者获胚数均无显著影响［50，55，58］。ShahrokhTehraninejad等［48］针对POR患者的非RCT研究（n=56）结果显示，与对照组相比PRP治疗未能增加PRP干预组获胚数。值得注意的是，两项高质量的RCT均未能证实PRP对胚胎质量的改善作用［51-52］。Barrenetxea等［51］的单中心双盲RCT进一步揭示，虽然PRP组MⅡ卵母细胞数量显著增加（P=0.029），但整倍体囊胚数量差异无统计学意义。Herlihy等［52］的多中心RCT针对<38岁、有≥2次IVF失败史的POR患者，结果显示PRP组在MⅡ卵母细胞数量、囊胚率及持续着床率方面均未显著优于对照组。这些结果提示PRP治疗改善卵母细胞的效益可能未能延续至胚胎层面。3.妊娠与活产结局：卵巢内注射PRP治疗在提高妊娠率和活产率方面的效果尤为有限。多项研究一致表明，尽管PRP改善了部分卵巢储备指标，但这种改善并未转化为POR患者妊娠率的显著提高：Davari等［47］研究中观察到PRP治疗后仅有15%生化妊娠，5%临床妊娠；ShahrokhTehraninejad等［48］研究结果显示，对照组临床妊娠率为0%，PRP组为3%（P=0.6）；Herlihy等［52］研究表明，对照组临床妊娠率为31%，PRP组为29%（P=0.87）；Devenutto等［53］研究中PRP治疗后总妊娠率达11.91%，活产率仅1.19%。Molinaro等［58］的研究通过POR和POI分组分析指出，对于POI患者，PRP未能显著改善其妊娠结局，实现成功妊娠仍需依赖卵子捐赠。部分研究报道了相对积极的结果。Safarova等［49］的研究指出，不孕症持续<3年的POR患者接受卵巢内注射PRP治疗后自然妊娠率显著增加，为早期干预提供依据。特别值得注意的是Zhao等［29］的研究，采用PRP联合累积胚胎移植策略，实现了45.45%的累积临床妊娠率和34.09%的活产率，其中年轻POR患者（POSEIDON3组）的活产率高达58.3%，这表明PRP可能需要与其他策略结合才能发挥最大效益。综上所述，卵巢内注射PRP对DOR患者显示出一定的治疗效果，但效果可能受注射方案及患者基线特征影响，因DOR严重程度而异。在DOR和POR人群中，PRP注射后可显著改善卵巢储备参数，如AMH水平升高、AFC增加和FSH水平降低，并可能增加获卵数、成熟卵母细胞数和优质胚胎数，从而提高临床妊娠率，尤其对于不孕年限较短（如<3年）或年轻患者；对于POI患者，PRP治疗对其卵巢储备参数和妊娠结局改善有限，提示PRP可能对严重卵巢功能衰竭的激活作用较弱。四.卵巢内注射PRP治疗的局限性与安全性当前国内外对于卵巢内注射PRP相关研究尚处探索阶段，其临床应用仍存在较大的局限性，主要在于：①PRP制备及注射尚未标准化。不同研究中所设置的离心条件、环境参数、使用的抗凝剂、激活剂及所获得的血小板浓度均不相同；在实施卵巢内注射过程中，其注射时机、注射部位与深度、PRP剂量与频次不一致。这些将直接影响PRP中生长因子的成分和浓度，或将导致疗效不一［55，57］。②患者群体的异质性。DOR诊断标准涵盖范围广，从轻度DOR至极严重的卵巢早衰，其病因、基线卵巢储备和潜在反应性截然不同。现有研究大多未对DOR的严重程度和病因进行精细分层，可能导致结果偏倚，且无法明确PRP治疗真正适宜人群［28，49，55-56］。③研究数量有限、样本量不足、高质量RCT缺乏。当前证据主体仍为小样本、单中心、非随机的观察性研究，存在选择偏倚和混杂因素干扰的高风险。多数研究缺乏盲法设计，且对照组设置不一（无干预、空白穿刺或生理盐水注射），影响了结果的客观性。目前多数研究报道PRP卵巢内注射的短期安全性良好，严重不良事件少见［25-26］。常见的不良反应多为与穿刺操作相关的一过性轻微腹痛或阴道出血。然而，潜在的理论风险不容忽视。①感染风险：任何穿刺操作均存在感染可能，需严格无菌操作。②出血与脏器损伤：超声引导下操作虽能规避大血管，但仍存在卵巢内或腹腔内出血风险，极少数情况下可能损伤周围肠管或膀胱。③促