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文档简介

逆转录reversetranscription第五节逆转录酶(reversetranscriptase)逆转录(reversetranscription)

逆转录酶一、逆转录病毒的基因组RNA以逆转录机制复制RNADNA逆转录病毒细胞内的逆转录现象:RNA模板逆转录酶DNA-RNA杂化双链RNA酶单链DNA逆转录酶双链DNARNA病毒在细胞内复制成双链DNA的前病毒(provirus)。前病毒保留了RNA病毒全部遗传信息,并可在细胞内独立繁殖。在某些情况下,前病毒基因组通过基因重组(recombination),参加到细胞基因组内,并随宿主基因一起复制和表达。这种重组方式称为整合(integration)。前病毒独立繁殖或整合,都可成为致病的原因逆转录酶催化的cDNA合成

分子生物学研究可应用逆转录酶,作为获取基因工程目的基因的重要方法之一,此法称为cDNA法

以mRNA为模板,经逆转录合成的与mRNA碱基序列互补的DNA链试管内合成cDNA:cDNAcomplementaryDNA逆转录酶

AAAA

TTTTAAAASI核酸酶

DNA聚合酶Ⅰ碱水解

TTTT逆转录酶和逆转录现象,是分子生物学研究中的重大发现逆转录现象说明:至少在某些生物,RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能对逆转录病毒的研究,拓宽了20世纪初已注意到的病毒致癌理论二、逆转录的发现发展了中心法则1、DNA复制的基本特点2、原核生物的复制过程包括起始、延长和终止(1)起始是将DNA双链解开形成复制叉(2)复制的延长由引物或延长中的子链提供3′-OH,供dNTP掺入生成磷酸二酯键,延长中的子链有前导链和后随链之分,复制产生的不连续片段称为冈崎片段(3)复制的终止需要去除RNA引物、填补留下的空隙并连接片段之间的缺口使成为连续的子链3、真核生物复制发生于细胞周期的S期,其过程与原核生物相似,但更为复杂和精致。复制的延长和核小体组蛋白的分离和重新组装有关。复制的终止需要端粒酶延伸端粒DNA4、非染色体基因组采用特殊的方式进行复制本章知识点框架图:DNA复制原核生物复制真核生物复制起始:DNA的解链;引物合成和引发体形成延长:复制的延长指在DNA-pol催化下,dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中的子链上,其化学本质是磷酸二酯键的不断生成

终止:双向复制的复制片段在终止点处汇合起

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