CN112566898B 12(s)-脂氧合酶（12-lox）的选择性抑制剂及其使用方法 （密歇根大学董事会）

2020.12.17PCT/US2019/0277852019.04.17WO2019/204375EN2019.10.24US2017001955A1,2017.01.05WO2015054662A1,2015.04.16DianeK.Lucietal.SynthesisandStructure_ActivityRelatiobenzenesulfonamideDerivativesas本文公开了12(S)_脂氧合酶(12_LOX)的小化并治疗疾病，如血小板止血和血栓形成的方2e中的每一个独立是H。3或其药学上可接受的盐。14.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或盐在抑制细胞中(S)一脂氧合酶活化15.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或盐在抑制细胞中血小板因子4释放的16.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或盐在抑制细胞中PF4一肝素复合物形17.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或盐在抑制细胞中血小板活化的药物20.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或盐在治疗有需要的受试者的血栓性22.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或盐在预防受试者中血栓形成的药物23.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或盐在治疗有需要的受试者的血小板4[0002]本申请要求2018年4月17日提交的美国临时专利申请第62/658,936号的优先权，[0004]血管损伤部位处的血小板粘附和聚集对于维持正常止血和防止失血是必不可少栓形成和血管闭塞的形成。参见RuggeriZM,《自然·医学(NatMed.)》,8:1227_1234塞、缺血性中风和肺栓塞，这是全世界发病率和死亡率的主要原因。参见Go等人,《循环磷脂中释放的花生四烯酸作为底物形成生物活性代谢物(12_(S)_氢过氧二十碳四烯酸和5板反应性并从血小板颗粒中释放PF4(2)抑制12-LOX防止FcγRIIa依赖性免疫介导的血小化为目前使用凝血酶抑制剂进行临床治疗的更安全替代方案。ML355还已显示出具有合理超过ML355的改进的体内效力和溶解性而不引Rcd在一些2是2在各种或CF36R2是3或R3是H或F4是H5是H。cc[0014]本公开的特别考虑的化合物包括表A中列出的化合物或其药学上可接受的盐。在使细胞与有效抑制12-LOX活化的量的本文所述效抑制PF4-肝素复合物形成的量的本文所述γRIIa介导的血小板活化。者施用治疗有效量的本文所述的化合物或组合物。血栓性病症的实例包括动脉血栓形成、7[0029]图5描绘了如实例部分中进一步所述的，在肝素诱导的血小板减少和血栓形成预防与血小板止血和血栓形成有关的疾病。本文公开的化合物表现出超过与ML355的改进[0033]本文公开的化合物可以剂量依赖性地抑制人血小板聚集和12_LOX氧脂素的产85环烷基是指在环中具22多种症状或者预防或延迟特定疾病或病状的多种症状中的一种的发作的化合物或治疗活93-8氟环烷基或卤基。在一些2是2在各种或CF3R2是3或R3是H或F4是H5是H。cc[0058]可以使用本领域技术人员已知的常规技术和容易获得的起始材料合成本文提供[0064]12_LOX已显示出减弱人血小板活化中的凝血酶PAR4介导的信号传导路径和GPVI的方法，其包含使细胞与有效抑制PAR4和/或GPVI信号传导的量的本文公开的化合物(例含使细胞与有效抑制血小板活化的量的本文公开的化合物(的受试者中抑制血小板活化、血小板减少症和/或血栓形成的能力提供了在治疗多种血栓[0067]在下文的实例部分中可以找到使用本文公开的化合物抑制12[0069]本文提供的方法包括制造和/或使用药物组合物，所述药物组合物包括本文提供分离和纯化期间原位制备，或通过单独地使纯化的化一些实施例中，本文提供的组合物可以以含有约0.1_10％w/v的本文公开的化合物以及其[0090]4氨基一N(3氯苯基)苯磺酰胺(2A)(Zheng等人,《生物有机和药物化学[0093]将4((2羟基3甲氧基苄基)氨基)苯磺酰胺(5A)(Luci等人,《药物化学杂志续15分钟)，然后加热到70℃持续24小时。将混合物冷却至室温，并用饱和氯化铵水溶液的N(3氯2氟苯基)4硝基苯磺酰胺(1B)。1HNMR(4(3氯2氟苯基)苯磺酰胺(2B)。1HNMR(400MHz,DMSOd6)δ9.92(s,1H),7.34(d,J=[0099]4((2羟基3甲氧基苄基)氨基)N(3(1(三氟甲基(4×40mL)萃取深色溶液。合并的有机萃取物用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干到1.0g的N(3氯4氟苯基)4硝基苯磺酰胺(3)。1HNMR(400HNMR[0107]4((2羟基3(三氟甲基)苄基)氨基)N(3(三氟甲基)苯基)苯续10分钟)，然后加热到70℃持续24小时。将混合物冷却至室温，并用饱和氯化铵水溶液成[[0113]将4_((2_羟基_3_甲氧基苄基)氨基)苯磺酰胺(5A)2(Lu之间关系的线性由线性回归获得的相关系数(檬酸右旋糖(2.5％柠檬酸钠、1.5％柠檬酸、2.0％D_葡萄糖)和腺苷三磷酸双磷酸酶中。[0130]将洗涤后的人血小板制备为3×108血小板/ml，并在4通道Lumi凝集计(Chonolog24小时)监测小鼠(n＝3)中血浆的药物浓度并且通过如同以上所描述的PK分析评估小鼠中[0134]C57BL/6野生型(WT)对照小鼠购自杰克逊实验室(JacksonLaboratories)(美国管以促进呼吸。在整个实验过程中，准备睾提肌并用预热的碳酸氢盐缓冲盐水灌注。DyLight488结合的大鼠抗小鼠血小板GP1bβ抗体(0.1μg/g；EMFRETAnalytics)和AlexaFluor647结合的抗纤维蛋白(0.3μg/g)或AlexaFlour647大鼠抗小鼠CD62P(3μg/小鼠)在血管损伤之前通过颈静脉插管施用。通过激光切除系统(Ablate！光消融系统；的小动脉(直径为30_50μm)中诱发出多个独立的血栓。用配备固体激光发射系统(LaserStack；IntelligentImagingInnovations)和高速sCMOS相机的ZeissAxioExaminerZ1荧光显微镜在63倍水浸物镜下实时获取损伤的小动脉部位处的血栓形成的图[0139]如上所述麻醉在其血小板上表达人FcγRIIa受体的成年转基因小鼠(10_12周[0140]来自对照(