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文档简介

实验课题：观察DNA和RNA在细胞中的分布一、实验原理1.碱性染料能使核酸着色，甲基绿和吡罗红均为碱性染料；

DNA﹢甲基绿→绿色，RNA﹢吡罗红→红色。甲基绿与吡罗红作为混合染料使用可显示细胞中DNA和RNA在细胞中的分布。2.盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。补：高温﹑酸﹑碱等条件能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞。我们观察到细胞核中的DNA被染成绿色而细胞质中的RNA被染成红色。操作步骤注意问题解释取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片在酒精灯下烘干防止污迹干扰观察效果保持细胞原有形态消毒为防止感染，漱口避免取材失败固定装片水解将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中，用300C水浴保温5min改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片洗去残留在外的盐酸染色滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min观察先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察使观察效果最佳步骤总结

斐林试剂苏丹Ⅲ橘黄色红色砖红色沉淀紫色苏丹Ⅳ

双缩脲试剂鉴定物质试剂实验现象还原性糖脂肪蛋白质淀粉

碘

蓝色生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质和DNA的鉴定1、实验原理：还原性糖+斐林试剂→砖红色沉淀还原性糖：葡萄糖、麦芽糖、果糖非还原性糖：蔗糖、淀粉等+→2、配制斐林试剂：实验一：还原性糖的鉴定水浴加热实验一：脂肪的鉴定1、实验原理：脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色取少量脂肪样液，加入苏丹Ⅲ，震荡，可看到溶液呈了橘黄色，本实验我们用苏丹Ⅲ做染液。实验一：蛋白质的鉴定1、实验原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色络合物2、材料用具：豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。本实验我们用蛋清做实验材料，在用蛋清做实验材料时，要注意将蛋清稀释，如果稀释不够，反应后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底。问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？作对照2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能过量？

过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？

时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。深化比较项目斐林试剂双缩脲试剂不同点使用方法甲液和乙液混合均匀后方可使用，且现配现用使用时先加A液再加B液呈色反应条件需水浴加热不需加热即可反应反应原理还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原为Cu2O具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2＋反应生成络合物颜色砖红色紫色浓度乙液CuSO4溶液浓度为0.05g/mLB液CuSO4溶液浓度为0.01g

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