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文档简介
中国兽医协会发布I请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。1猪痘病毒荧光PCR检测方法本文件规定了猪痘病毒荧光PCR检测技术的内容、步骤、方法及注意事项本文件适用于猪痘病毒的诊断、流行病学调查、检疫和形病毒粒子形态，直径200~300m。猪痘病毒具有宿主特异性，不感染人类4缩略语5.1组织样品注意与猪丹毒病、猪链球菌2型、猪圆环病毒2型、猪渗出性皮炎25.2拭子样品6.2高速冷冻离心机：离心力12000含SWPVORF16基因重组质粒且浓度>1×103copies/μL，基因片3样品制备和核酸提取参照GB19489规定，在相应等级的生物安全柜中进行操作。工作人员应佩戴一次性灭菌手套或EP手套、外科手术口罩，所使用工具和操作台面应用75%酒精擦拭消毒，组织样品和拭子液经4℃12000g离心5min，收集上清准备提取核酸，0~4℃或冰上完成所有操作。9检测步骤9.1核酸提取按照商品化病毒DNA提取试剂盒说明书提取病毒DNA，所得核酸样本待检样品无Ct值或无典型扩增曲线，Ct值>35，判定为SWP4TCGTCTTTAGTTAATTTATFAM-TCAACGGTCCAAAAACTTGCCACTGATTGTTCAAGAGTCTGATTCTAGGTTCGTTATTTTCCCTATTAAGTATCATGATATCATAAACAATCAGTGGCAAGTTTTTGGACCGTTGAAGAAGTAGATTTATCAAAAGATTTAGATGATTGGGATAAATTAACTAAAGA5体积(μL）2×荧光PCR预混反应液
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