实验用猪 第1部分：微生物学监测编制说明

1上海市地方标准《实验猪第1部分：微生物学监测》编制说明本标准于2020年由上海市科委、上海市实验动物标准委员会推荐，获得上海市市场监督管理局的上海市实验猪地标立项支持（沪市监标技〔2020〕304号由中国农业科学院上海兽医研究所、上海实验动物研究中心、上海交通大学、上海市农近年来，相关科研领域对实验动物的需求量呈逐年增长趋势，需求的品种、品系和动物模型种类逐渐丰富，对保障实验质量也提出了更高的要求。随着生物科学和技术的发展，人们对实验研究、鉴定和测试结果的可靠性和精确度的要求愈来愈高。实验动物质量的标准化与否直接影响着科学研究水平的高低，只有实现实验动物标准化，动物试验结果才能够具有均一性、可重复性及可比性。标准的研究制定与发布实施是实验动物标准化的技术措施，是开展实验动物标准化管理的重要依据，也是促进实验动物资源整合优化、开放共享的基础保障。地方标准的发布实施对推动实验动物质量标准化和新资源共享服务、保证动物试验结果可靠性和医用生物材料使用安全性，以及进一步完善我国实验动物标准体系等方面发挥着重要作用。制定相关质量控制标准及监测方法，对实验用猪进行质量监测，保证实验用猪种群质量，不仅能够在实验动物资源开发研究中发挥积极的作用，保证科研教学活动的正常开展。同时还有利于猪病诊断与治疗、新药研发等应用研究的发展，更好地服务于生物医药、疾病防治等科学技术的研发，从而满足上海市重点规划领域—生物医药的发展需求。然而，实验猪上海市地方标准已经过期，为了保证实验用猪的质量，加快研究重新制定相关地方标准显得尤为迫切。这一地方标准的重新制定，为上海市实验用猪的行政管理提供技术支撑，为上海市实验用猪的生产、使用单位（尤其是医疗单位）提供质控标准，便于器官移植和手术医疗标准和指导，为上海市实验动物管理2部门的监管提供依据，为上海市所有相关单位GLP/GCP平台建设服务，为提升上海所有相关研发机构科研成果转化服务，尤其是非洲猪瘟等重大疫病疫苗研制，需要标准化的猪群进行疫苗生产，预期产值达百亿。写工作，初稿发送至起草小组成员讨论。起草小组于2021年12月完成初稿，2022年1月～6月，发送给在沪相关单位进行技术评审，评审专家包括：上海交通大学，上海市农业科学院、复旦大学、上海动物疫病预防控制中心、上海实验动物研究中心、上海开纯洁净有限公司、光明集团、上海沁浓集团、上海祥欣集团、勃林格公司殷格翰有限公司等。汇总意见并修改讨论稿。本标准征求意见稿共发出8份。期间，回函单位有3个，提出书面修改意见的单位有3个，未提出书面修改意见的单况见《征询意见汇总处理表》。2022-2023年因为新冠疫情影响，工作停滞。2024年1月重新启动，于10月形成最终审定稿，建议标准名称改为《实验用猪第1部分：微生物学监测》，标准起草组根据审定意见对标准送审稿及编制说明进一步修改和完善。本文件规定了实验用猪需要监测的微生物种类及相应微生物的监测方法，适用于实验用猪（包括实验用小型猪）微生物学等级监测。2主要技术内容2.1实验用猪监测项目的确定2.1.1按照《实验用猪微生物学等级及监测》（NYT3466—2019）中猪主要控制的病原种类，确定猪监测项目24种：非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、口蹄疫病毒、猪水疱性口炎病毒、日本脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪流感病毒、猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、布鲁氏菌、猪链球菌2型、多杀性巴氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、沙门氏菌、支气管败血波氏杆菌、猪肺炎支原体、猪痢疾短螺旋体、钩端螺旋体、红斑丹毒丝菌、皮肤病原真菌。2.1.2上海市2021年度猪群疫病流行病学调查显示，各区动物疫控中心按照本市年3度监测与流行病学调查计划，2024年于上、下半年开展了2次猪群疫病定点流调工作，调查范围涉及全市7个区37场次规模猪场和8场次生猪屠宰场。共对采集的1711份猪血样开展了猪O型口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病共3个项目的抗体检测。检测结果显示猪O型口蹄疫和猪瘟免疫抗体平均合格率分别为82.1%和88.9%，猪蓝耳病抗体阳性率为88.3%。同时对上述1711份血样同步开展了非洲猪瘟病原学检测，检测结果均为阴性。2024年上、下半年对嘉定和崇明2个区9个市级定点流调猪场开展了2次主要疫病的定点流行病学调查，共采集猪血样297份，进行了口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、弓形虫病、衣原体病、流行性腹泻等11个项目的抗体（或抗原）检测。结果显示，猪O型口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病、猪流行性腹泻和猪伪狂犬病免疫抗体平均合格率分别为81.1%、83.5%、83.2%、1.5%和94.6%；口蹄疫非结构蛋白、猪伪狂犬病、弓形虫病和衣原体病感染抗体阳性率分别为0.7%、16.5%、12.5%和1.3%；非洲猪瘟感染抗体和猪瘟抗原阳性率分别为20.9%和0%。对本市5家生猪屠宰场进行了上下半年2次上市肉猪主要疫病专项流行病学调查工作。采集上市肉猪组织样品740份（其中脾脏240份、肺脏180份、扁桃体和肝脏各120份，颌下淋巴结60份、猪肉20份）、全血样品371份，进行了非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪口蹄疫病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒、猪细小病毒和猪流感病毒共10个项目的病原学检测，结果显示，在脾脏、扁桃体和淋巴结样品中非洲猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型核酸阳性率为0.5%、0.6%、45.8%、21.7%和61.1%。对全市12家种猪场和4家生猪屠宰场开展了致病微生物专项流行病学调查工作。共采集种猪场唾液样品120份，生猪屠宰场猪肺脏、脾脏、扁桃体和颌下腺等组织样品共245份，环境拭子样品211份，总计576份样品。分别进行了猪链球菌、副猪嗜血杆菌等8种主要致病菌的检测。结果显示，猪链球菌、副猪嗜血杆菌、猪丹毒丝菌、沙门氏菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和空肠弯曲菌检出率分别为23.8%、0.5%、30.7%、2.4%、1.4%、2.8%、31.8%和5.4%。因此，经病原学检测，非洲猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型均有阳性检出，且猪细小病毒和猪圆环病毒2型、3型阳性率较往年同期有所上升，表明该两种病毒在屠宰场假定健康猪中仍存在较高感染率，带毒现象较为普遍；从致病微生物检测结果看，猪丹毒丝菌和猪链球菌检都有较高检出率。3监测程序4参考《实验用猪微生物学等级及监测》（NYT3466—2019）、《实验动物微生物、寄生虫学等级及监测》（GB14922—2022）规定了实验用猪微生物监测的程4检测方法参考《实验用猪微生物学等级及监测》（NYT3466-2019）、《实验动物微生物、寄生虫学等级及监测》（GB14922—2022）制定了不同微生物的检测方法。5监测规则猪的采样比率、检测频次、采样方式、送检要求参考《实验用猪微生物学等级及监测》（NYT3466—2019）、《实验动物微生物、寄生虫学等级及监测》（GB14922—2022《兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范》（NY/T541）制定。6结果判定根据每种病原检测参考标准《实验用猪微生物学等级及监测》（NYT3466-2019）制定病原微生物检测结果的判定标准。7判定结论参考《实验用猪微生物学等级及监测》（NYT3466—2019）中微生物学等级合格的判定标准和检测报告应包括的内容。本标准制订编写过程中未产生重大分歧意见。1加强该标准的宣贯实验动物在科技领域的广泛应用，对国民经济发展发挥了重要作用，已经受到各国的高度重视。随着我国科技水平的日益提高，动物试验的应用范围越来越广，实验动物使用规模愈来愈大。制定实验用猪的微生物学等级及监测标准，健全监测标准体系，对于推进猪用疫苗的标准化生产和管理，提升我国实验动物科学及相关领域的研究水平具有重要意义。我国制定了实验用猪的《实验用猪微生物学等级及监测》（NYT3466—2019）、《实验用猪—微生物学和寄生虫虫学等级及监测》（DB51/T2757—2021）、实验动物微生物学等级及监测（DB11T1459.1—2017）等。但是，实验用猪微生物学监测的上海地方标准是根据之前过期的地方标准制定，可为上海市实验用猪微生物监测5提供技术规范指导。建议借助该标准的发布之际，加强标准的宣贯工作，促进实验用猪技术规范更好地服务于生物医药和兽医兽药产业。2加强该标准的推广有关实验用猪的整套标准可以借鉴的资料很少，上海实验用猪的技术规范研究和应用更是空白。本标准制定时，充分借鉴了《实验用猪微生物学等级及监测》（NYT3466—2019）、《实验