T-CITS 455-2025 临床微生物检验质控品的选择、使用 和评估要求

ICS11.100CCSC05CITS团体标准中国检验检测学会发布T/CITS455—2025前言 2规范性引用文件 3术语和定义 4常用质控品及分类 4.1常用质控品 4.2质控品分类 5质控品的选择 5.1基本要求 5.2选择要求 6质控品的使用与评估 6.1接收与检查 6.2评估与验收 6.3储存与使用 6.4使用及评估 附录A（资料性）临床微生物实验室自制质控品管理要求 6参考文献 T/CITS455—2025本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由上海市临床检验中心和国军标（北京）标准化技术研究院提出。本文件由中国检验检测学会归口。本文件起草单位：上海市临床检验中心、国军标（北京）标准化技术研究院、湖北省临床检验中心、重庆市人民医院、同济大学附属东方医院（上海市东方医院）、郑州安图生物工程股份有限公司、北京实安科技有限公司、北京医学检验学会、北京中检体外诊断工程技术研究中心、复旦大学附属华山医院、复旦大学附属浦东医院（上海市浦东医院）、南京医科大学第一附属医院、上海标源生物科技有限公司、上海健康医学院、上海健康医学院附属周浦医院、上海交通大学医学院附属瑞金医院、上海市儿童医院、西湖大学医学院附属杭州市第一人民医院/杭州市临床检验质控中心、西安交通大学第一附属医院、天津一瑞生物科技股份有限公司。本文件主要起草人：王敬华、何智纯、刘万阳、曾明、颜令、吴文娟、刘美丽、陈蓉、徐蓉、李娜、穆红、戴其全、蒋晓飞、常东、夏文颖、张健、王大利、张凤华、韩立中、翁文浩、王贤军、曾晓艳、苑庆华。1T/CITS455—2025临床微生物检验质控品的选择、使用和评估要求本文件规定了临床微生物检验质控品的分类、选择、使用和评估要求。本文件适用于各级各类医疗机构实验室和医学检验实验室开展临床微生物检验过程中的质量控制管理。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。WS/T805临床微生物检验基本技术标准WS/T807临床微生物培养、鉴定和药敏检测系统的性能验证3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1质量控制qualitycontrol质量管理的一部分，致力于满足质量要求。[来源：GB/T19000—2016，3.3.7]3.2质控品/控制物质controlmaterials被其制造商预期用于验证体外诊断医疗器械性能特征的物质、材料或物品[来源：GB/T29791.1—2013，3.13]3.3室内质量控制internalqualitycontrol检验人员按照一定的频度连续测定稳定样品中的特定组分，并采用一系列方法进行分析，按照统计学规律推断和评价本批次测量结果的可靠程度，以此判断检验报告是否可发出，及时发现并排除质量环节中的不满意因素。[来源：WS/T641—2018，2.2]2T/CITS455—20253.4室间质量评价externalqualityassessment；EQA能力验证proficiencytesting；PT利用实验室间比对，按照预先制定的准则评价参加者的能力。[来源：WS/T644—2018，2.15]3.5标准菌株referencestrain由菌种保藏机构保藏，遗传学特性得到确认和保证并可追溯的菌株。[来源：WS/T807—2022，3.4]3.6性能验证verification通过提供客观证据，确认微生物检测系统在用于患者样品及样品分离株检测之前能达到与制造商说明书一致的性能。[来源：WS/T807—2022，3.5]4常用质控品及分类4.1常用质控品4.1.1标准菌株：由国家或国际标准机构提供，用于确保检测结果的准确性和一致性。国内临床微生物实验室常用标准菌株，主要来源于：a)美国典型菌株保存中心（Americantypeculturecollection，ATCC）；b)英国国家典型菌株保存中心（nationalcollectionoftypecultures，NCTC）；c)中国工业微生物菌种保藏管理中心（Chinacenterofindustrialculturecollection，CICC）。4.1.2自制质控品：即模拟样品，模拟实际样品制备的质控品，用于评估检测方法的适用性和稳定性；4.1.3商业质控品：具有相关质控品生产资质的专业公司生产的质控品，包含多种微生物，用于实验室质量控制。4.1.4质控菌株：主要来源于国家临床检验中心及通过中国合格评定国家认可委员会ISO17043体系认可的能力验证提供者发放的室间质量评价项目的质控品，应具有良好的溯源性。4.1.5质控血清：含有特定微生物抗体、抗原的血清，用于评估免疫学检测方法的性能。4.1.6临床分离株：实验室从临床样品中分离的菌株，应采用公认的微生物鉴定参考方法（如宏基因组测序）验证，并经过多次传代证明其生物学特征恒定。4.2质控品分类4.2.1按质控品剂型可分为：a)标准品/标准菌株；b)冻干质控菌株；c)患者临床样品；d)模拟体液样品；3T/CITS455—2025e)载玻片附型质控品；f)图片/电子图片资料；g)模拟患者检验结果/病历资料；h)影像资料。4.2.2按质控品用途可分为：a)微生物分离培养及鉴定评价用质控品；b)抗菌药物敏感性试验质控品；c)微生物特殊成分及代谢物检验评价用质控品；d)微生物涂片镜检技术质控品。4.2.3按质控品检验要求可分为：a)定量检测质控品，包括高浓度质控品、中浓度质控品、低浓度质控品；b)定性检测质控品，包括阳性质控品、阴性质控品、弱阳性质控品。5质控品的选择5.1基本要求5.1.1适用性：质控品应与检测目的和方法相匹配，能够模拟实际样品的特性；质控品基质与患者样品之间的差异，应不会对检测结果产生影响。5.1.2代表性：质控品应包含检测目标微生物或其成分。5.1.3稳定性：质控品应具有良好的物理和化学稳定性，在储存和使用过程中应保持其特性不变。5.1.4均匀性：质控品中的目标微生物或成分应均匀分布，每次测试结果应一致。5.1.5可追溯性。质控品应有明确的来源或制备过程，以及相关的质量控制证书，具备可追溯性。实验室应优先选择和使用标准菌株及由其制备的质控品。5.1.6多样性：宜选择能够覆盖不同种类微生物的质控品，质控品的浓度应覆盖检测方法的动态范围，包括低、中、高不同浓度水平。5.1.7挑战性：质控品应能够评估检测方法的极限性能。5.1.8安全性：生物源性基质（如血清、血浆、羊水等）的质控品应随同提供生物安全性资料。生物安全性检测应采用相关国家权威管理机构认可的、且不低于我国法定用于血源筛查体外诊断试剂灵敏度的检测试剂进行检测。5.1.9便捷性：质控品应易于操作和使用，且能够在规定的条件和时间内转运到实验室。5.2选择要求质控品的选择应考虑以下内容：a)根据检测项目和目的，明确需要控制的微生物种类和特性，并提出申请；b)参考ISO15189、CNAS-GL005等，选择合适的质控品；c)评估供应商的资质、产品质量、技术支持、服务质量和市场供应能力；d)了解质控品性能特征，至少包括稳定性、均匀性和可追溯性；e)根据质量控制计划和设定的质控规则（如Westgard多规则），确定质控品的使用频率和需求数量，并制定采购方案，包括采购合同中的关键技术参数等。4T/CITS455—20256质控品的使用与评估6.1接收与检查6.1.1质控品到货后，应核对制造商信息、品名、批号、有效期等信息与采购订单一致。6.1.2应检查质控品的包装，确认完好无损、无洒漏、编号唯一、标签清晰、完整。6.1.3质控品应附有详细的使用指南，包括储存、制备和使用说明等。6.1.4确认质控品转运和储存条件是否符合要求，如温度、湿度等。6.1.5应如实记录并保存质控品接收、检查和转运信息，包括日期、货物批号、检查结果、接收人员6.1.6检查无误后，应将质控品放入指定区域，并做好显著标识。6.2评估与验收6.2.1应根据项目对检验结果准确性要求和质控规则，制定相应的质控品验收标准，确保质控品符合检测要求。6.2.2在质控品使用前，应对质控品的来源、成分、稳定性、检测时限等关键信息进行详细评估。6.2.3应通过与标准菌株对比，验证质控品的适用性和准确性；通过多次重复实验，评估质控品批间一致性和长期稳定性。6.2.4应记录评估与验收结果，分析数据，综合评估质控品的准确性和可靠性。6.2.5当评估与验收过程中出现偏差时，应及时分析原因，并采取相应的纠正措施，并向供应商进行反馈。6.3储存与使用6.3.1应根据质控品使用说明书要求，选择合适的储存条件，避免因储存不当导致微生物死亡或活性降低。自制质控品也应根据其特性选择合适的储存条件，如温度、湿度等。6.3.2在储存和使用质控品时，均应在无菌条件下操作，如在生物安全柜中操作。6.3.3使用前应检查质控品的有效期，不准许使用过期的质控品。应确定自制质控品的有效期，并在有效期内使用。使用再悬浮或组合质控品时还应核对配制人、配制日期等。6.3.4必要时，应按照制造商的建议，对质控品进行预稀释，并记录开瓶日期，稀释后的浓度应满足实验要求。6.3.5在储存过程中，应定期对质控品进行外观等检查，定期评估和更新质控品，确认其持续符合检测要求。6.3.6在储存过程中，应对质控品储存条件（如温度、湿度等）实施实时监控，并记录每次使用质控品的日期、批号和结果。6.4使用及评估6.4.1概述质控品主要用于室内质量控制和室间质量评价两个关键环节。实验室应制定详细的质量控制标准操作程序（standardoperatingprocedure，SOP），执行WS/T805和WS/T807相关要求，规范实验室的室内质量控制和室间质量评价活动。6.4.2室内质量控制5T/CITS455—20256.4.2.1应建立室内质量控制规则，并通过对质量控制数据的统计学分析，了解检测系统的质控趋势，及时发现潜在的问题。在室内质控过程中，质控品主要应用于：a)常用培养基（包括营养培养基、选择性培养基、鉴别培养基和增菌液体培养基等）质量控制相关试验，如无菌试验、生长试验、生长抑制试验等；b)手工试剂（包括化学试剂、生物试剂、诊断血清等）的质量控制，如凝固酶、过氧化氢酶、氧化酶、β-内酰胺酶等；c)染色液的质量控制,如革兰染色、抗酸染色、荧光染色、乳酸酚棉兰染色及其他微生物特殊染色液；d)微生物培养、鉴定及药物敏感性试验检验程序的性能验证；e)微生物检验仪器设备及配套材料的日常质量控制。6.4.2.2室内质量控制过程中失控处理包括：a)实验室应有规范的失控处理程序，并依照失控处理程序分析并撰写报告；b)实验室应在样品检测前做室内质控，合格后再检测样品；发现失控后应立即停止检测，直至质控合格后才能继续检测样品；c)若失控后检验结果已经发出，应立即追回错误结果，并向临床出示告知书；质控合格后，再行检测与报告；应在质控图上保留失控点与校正点；d)实验室应保留失控处置记录，并认真寻找失控原因和解决问题的方法；e)质量控制是每一位工作人员的责任，任何人员都有责任发现失控并记录。6.4.2.3实验室应充分利用室内质量控制检测数据，定期对质控品检测结果进行总结，包括：a)室内质控运行情况；b)质控结果趋势分析；c)失控结果记录；d)失控原因分析；e)纠正及纠正措施（必要时）；f)潜在的失控风险；g)不良事件等。6.4.3室间质量评价6.4.3.1室间质量评价过程中，质控品检测满足下列基本要求：a)室间质量评价样品应视为临床样品，与常规工作同步进行，不应特殊对待；b)室间质量评价样品检测，应由在岗的经实验室授权从事相应检测项目的任一检验人员进行，不应安排专人检测；c)室间质量评价样品检测，应使用与常规工作相同的检测系统与操作程序，不应区别对待；d)室间质量评价样品，如果用于实验室内部人员能力比对，应在室间质量评价结果反馈后方可进行，不应在室间质量评价结果反馈前或者同时开展内部人员能力比对。6.4.3.2室间质量评价过程中，质控品的检测结果应用于评估某一轮次室间质量评价计划的合格表现，可代表本次的检测质量满足要求，不能反映持续的检测能力；同样，在某一轮次室间质量评价计划中的不合格表现，也只反映实验室偶然地偏离正常的能力状态。不应将使用室间质量评价作为唯一的质量控制手段。6.4.3.3对于不合格结果，实验室应对导致室间质量评价结果不满意的原因进行分析，对相关人员进行培训，采取纠正以及纠正措施，并保存相关记录；对于合格结果，实验室可进行相应的分析或讨论，关注是否存在趋势或者潜在隐患，如果存在某些趋势或隐患，则应采取预防措施，保存相关记录。6T/CITS455—2025（资料性）临床微生物实验室自制质控品管理要求A.1一般要求实验室自制质控品，所使用的目标微生物应具备良好的生物学溯源性，制备完成后应进行必要的性能验证，保存完整的制备记录，提供详细的使用说明书，其包装应满足实验室生物安全管理相关要求，在适当的条件下进行保存，并在有效期内使用。A.2冷冻干燥菌株制备A.2.1溯源性。目标微生物推荐使用标准菌株，如ATCC、NCTC及CICC提供的参考菌株。A.2.2附型剂。应不影响微生物生物活性，用无菌水可复溶，推荐使用脱脂牛奶，必要时，可以加入A.2.3背景微生物。必要时，除了目标微生物外，可以在一些模拟临床样品的质控品中，加入与目标微生物共生的背景微生物（正常菌群）。A.2.4冷冻干燥工艺。冻干质控品中，目标微生物和背景微生物的生物活性应保持不变，外观色泽均匀，形态饱满，结构牢固，溶解速度快，残余水分低，冷冻干燥品在保存效期内可长期保存。A.3涂片镜检质控品（载玻片）的制备A.3.1溯源性。目标微生物推荐采用标准菌株，经培养和鉴定，确认为纯化的新鲜培养物，并具有微生物典型的生物学特性。A.3.2菌悬液浓度。应以无菌生理盐水调节菌液至合适浓度，推荐使用3麦氏浓度。A.3.3涂片方法。应用无菌滴管涂于干燥、清洁、无油污、无划痕的载玻片白色圈内，均匀涂抹开形成1.0cm×2.0cm大小的椭圆形菌膜，待自然干燥，固定。A.3.4包装。每张涂片正面磨砂处应贴上注明物品编号的标识，装入玻片盒内，置于塑封袋内，贴上标签，注明用途和批号，室温保存。A.4质控品的性能验证A.4.1均匀性检验宜从质控品总体中随机抽取10个或10个以上样品进行均匀性检验，每个样品在重复条件下至少测试2次，参见CNAS-CL03-A001。将测试数据转换为以10为底的对数值后进行均匀性评价。均匀性检应考虑定量质控品和定性质控品相应的均匀性要求。T/CITS455—2025A.4.2定量质控品应针对样品中的微生物水平，采用适当的评定方法进行均匀性和稳定性评定。均匀性评定可基于重复性条件下样品间变异和样品内变异进行评定。A.4.3定性质控品适用时，可采用目标微生物和背景菌群计数来进行均匀性和稳定性评定。A.4.4稳定性评定A.4.4.1评定要求必要时，应将质控品稳定性量化，并考虑作为质控品指定值测量不确定度的补充分量，在能力评定中予以考虑。通常从质控品总体样品中随机抽取足够数量、具有代表性的样品进行稳定性检验，每个样品在重复条件下至少测试两次。将测试数据转换为以10为底的对数值后进行稳定性评价，参见C