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DB36/T2219—淡水生物环境DNATechnicalspecificationsformonitoringenvironmentalDNAoffreshwater 江西省市场监督管理 发DB36/TDB36/T2219—DB36/TDB36/T2219— 前 DB36/TDB36/T2219—DB36/TDB36/T2219—DNAPCR下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用)环境微生物宏基因组检测高通量测序法HJ494HJ1295(试行GB/T29859GB/T30989大型底栖动物型动物。本文件特指不能通过500μm筛网的大型底栖无脊椎动物,主要包括节肢动物门(ArthropodaMolluscaAnnelida引物聚合酶链式反应polymerasechainDNADNAenvironmentalDNADNA利用高通量测序获取环境介质(如水、沉积物、土壤、空气等)DNADNAcImitochondrialcytochromecoxidaseDNADNAmetabarcodingDNADNA扩增序列变体ampliconsequenceDNAPCRDNAASV操作分类单元operationaltaxonomic——PCR0~1006/sPCR200——湖泊:根据区域内湖泊形态、水文状况、水生生物分布等因素的差异,将湖泊分为不同的2km21115km21——河流:将河流划分成河口区、下游河段、中游河段、上游河段,以及支流和干流的汇口区1<50m1个50<200m1200m1eDNA保存。未现场过滤的,水体低温(4℃)6h24h-20~-802L;当水体藻按照HJ494100g451滤膜样品(水样)1.5mLDNAmLDNAeDNAGB/T40226DNADNA1ng/μL10ng/μL~100ng/μL。OD260nm/OD280nm1.8~2.0OD260nm/OD230nm2.0。eDNA20℃1引物序列(545℃~5545℃~551%~2%PCR以及扩增过程中产生的引物二聚体信息。电泳后,PCRDNAGB/T30989GB/T35537c)IndexOTUASVPCROTUOTUASVASVPCRASVASVASVc)统计表:每个样品的生物多样性统计表由分子分类单元(OTUsASVs)名称、序列、物种未检出的物种所占比例,即假阴性率(FN)10

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