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文档简介
DB××/T××××—××××范围本文件规定了刺参Apostichopusjaponicus(Selenka1867)“鲁海1号”新品种苗种繁育的环境条件、培育设施、亲参、采卵与受精、孵化与选优、浮游幼体培育、稚参培育、苗种质量与运输等技术内容,描述了对应的证实方法。本文件适用于刺参Apostichopusjaponicus(Selenka1867)“鲁海1号”新品种的苗种繁育。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T32756刺参亲参和苗种NY5052无公害食品海水养殖用水水质NY5071无公害食品渔用药物使用准则NY5072无公害食品渔用配合饲料安全限量SC/T2003刺参亲参和苗种术语和定义本文件无术语和定义内容。环境条件育苗场地选择水质稳定,水源充足,无大量淡水流入、风浪较小、无赤潮频发的开放、半开放式海域附近。通讯、交通运输方便,电力充足,海水或地下海水资源丰富,盐度稳定,有淡水水源。育苗用水水质应符合NY5052的规定,应经沉淀、多级过滤,盐度不低于25,pH7.4~9.0,溶解氧不低于5mg/l。培育设施育苗室通风条件好,室内光线控制在不大于500lx。培育池呈长方形,池深1m~1.5m,容积为16m³~20m³。砂滤池滤料为不同粒径的砂石,每层滤料铺设厚度15cm以上,细砂层铺设厚度为40cm~60cm。配套设施应具备供电系统、供水系统、调温系统等。沉淀池与蓄水池的总纳水量满足每日用水量。亲参亲参选择以前期选育的刺参“鲁海1号”为亲本,规格不低于200g/头,采捕及运输符合SC/T2003的要求。亲参蓄养入池时间l0月底至11月上旬,或根据各地水温,待自然水温降至8℃~10℃时。入池前的准备水池及用具消毒入池前一周用高锰酸钾等将越冬池、附着物进行彻底洗刷消毒。若时间充足,在刺参入池前一个月左右用100g/m³~200g/m³的漂白粉溶液泡池3天以上,泡池期间将附着物及其他生产用品一并放入池内浸泡,泡完后将车间所有池子、工具连同下排水管道全部用清水冲洗干净,阴干数日待漂白液气味完全消失后往池内加注新水。刺参消毒刺参入池前用30mg/L~50mg/L抗菌素药物药浴0.5h。用药须符合NY5071要求。蓄养密度5头/m³~10头/m³。投饵蓄养2d~3d后开始投喂饲料,以鼠尾藻粉、马尾藻粉、海带粉、刺参配合饲料、海泥为主,添加少量螺旋藻粉、干酵母、扇贝边粉、鸡蛋黄等。入池初期日投饵量为刺参体重的0.5%左右,水温升至14℃后稳定在1%左右。水质控制水温低于10℃时日全量换水1次,10d倒池1次;水温10℃~15℃时日换水2次,每次1/2,,7d倒池1次;16℃后,日换水1次,每次换水时留水30cm原池水,避免亲参的干露,7d倒池1次。光照光照控制在不大于500lx。温度调控亲参入池后前3d不升温,之后逐步升温,温差±2℃。升至15℃时恒温培育,直至采卵前10d~20d将水温升至16℃~17℃,水温波动不超过2℃。刺参“鲁海1号”生殖腺发育的生物学零度为6.14℃,当积温达到800℃·d~1200℃·d时,亲参的性腺能够成熟并自然排放。采卵与授精采卵将亲参先阴干10min,再用流水刺激30min~40min,放入温度为22℃~23℃产卵池内待产。受精控制精子浓度为每个卵子周围有3个~5个精子,及时捞出雄性个体以免精液过多影响受精。孵化与选优孵化密度3粒/ml~5粒/ml。孵化条件23±1℃,盐度26~32,pH7.8~8.6。搅池孵化过程中每隔30min~60min上下搅动池水1次。选优采用拖网法、虹吸法将浮于中上层的幼体选入培育池中进行培育。浮游幼体培育培育密度0.15个/ml~0.3个/ml。水质控制可在选优后将培育池加1/2的水,前3d~5d逐渐把水加满,培育后期每日换水1~2次,每次换1/3。投饵投喂单胞藻、酵母、光合细菌或藻膏,每日2次,日投饵量2×104cell/ml~4×104cell/ml,并根据幼虫的密度、摄食情况等因素调整。增氧微量充气,每3m2~5m2一个气石。培育条件水温21℃~23℃,溶氧不小于4mg/L,盐度26~34,光照50lx~100lx。稚参培育附着基材质聚乙烯网片、波纹板或聚乙烯薄膜。预处理用草酸、稀盐酸、火碱等清洗干净,有条件的应提前接种底栖硅藻。投放时间樽形幼体达30%左右时投放附着基,附着变态后逐渐降低培育水温,直至常温培育。培育密度不大于1头/cm2。日常管理投饲初期投喂含底栖硅藻的新鲜海泥和稚参配合饲料,用300目筛绢网过滤后,按0.5L/m3~1.5L/m3投喂,每日2次。体长2mm后投喂含底栖硅藻的新鲜海泥和海藻粉浸泡液,前期用200目,中后期用80目~40目筛绢网过滤,每日分2次投喂,日投喂量为30mg/L~100mg/L。饲料须符合NY5072要求。增氧稚参附着后必须不间断地充气,充气量控制在30L/m3∙h~40L/m3∙h。换水日换水50%~100%或流水培育。倒池每隔7d~10d,倒池一次。更换附着基采用水冲或敲打震击的方法使附着基上的稚参脱落,收集后泼洒到新的干净附着基上,宜结合倒池进行。培育条件水温22℃~27℃,光照50lx~100lx,盐度25~32,溶氧4mg/L~5mg/L。分苗与选留稚参培育后期,个体生长差异较大,需用不同网目规格的筛苗器进行筛选并分级培育,同时结合参苗摄食、活力情况进行高强度选留(选择强度为3.6~4.0),作为后续子代选育的基础群体。苗种质量及运输符合GB/T32756要求。山东水产学会团体标准《刺参“鲁海1号”苗种繁育技术规范》(送审稿)编制说明山东省海洋科学研究院二〇二一年十一月PAGE3山东水产学会团体标准《刺参“鲁海1号”苗种繁育技术规范》编制说明一、制定本标准的项目背景上世纪90年代中期开始,我国的刺参市场消费需求空间不断拓展,特别是2003年“非典”事件之后,产业发展速度和生产规模均达到前所未有的水平,现已成为国内海水养殖的主导产业之一。山东省作为我国刺参的重要原产地和第一养殖大省,近年来充分发挥海洋科技强省优势,开展了一系列刺参生产重大关键技术的研发与成果转化推广,形成了从育种、养殖、加工到市场流通较为完善的全产业链体系,生产技术水平居全国首位。2020年产参苗332.9亿头(占全国60.5%),增养殖规模119.5万亩(占全国32.8%,占全省海水养殖面积的13.73%),年产商品参9.89万吨(占全国50.3%,占全省海水养殖产量的1.92%),养殖年产值约160亿元,用仅占全省海水养殖2%的产量创造了约17%的产值。种质是养殖产业能否健康持续发展的根本,随着刺参增养殖产业的不断发展,人们对优质健康刺参苗种的需求日益强烈。2021年4月21日,农业农村部发布“十四五”期间将通过实施“五大行动”来推进水产绿色健康养殖,明确要求开展水产种质资源基本情况普查,摸清原种、地方品系、新品种和引进种的种类、群体数量、区域分布和保护利用等情况,持续推进水产原良种生产体系建设。刺参“鲁海1号”国审新品种(品种登记号:GS-01-011-2018)是山东省海洋科学研究院(原山东省海洋生物研究院)李成林研究团队以2003年-2004年从我国烟台、威海、青岛、大连、日照野生刺参中收集挑选的2700头个体为基础群体,以体重为目标性状,采用群体选育技术,经连续4代选育而成,在相同养殖条件下,与未经选育的刺参相比,具有明显的生长速度快、抗逆性强等优势生产性状,24月龄刺参“鲁海1号”体重平均提高24.8%,养殖成活率平均提高23.5%,目前在全省核心示范规模已超过50万m3,有效提高了我省刺参良种覆盖率10%以上。为加快该新品种的推广应用,以“良种+良法”共保产业持续健康提升发展,避免新品种良种因苗种繁育技术工艺不合理不规范而造成生产损失,同时推进刺参良种覆盖率的进一步提升,亟需制定本标准规范生产。二、制定本标准的工作简况1.任务来源根据《国务院关于印发深化标准化工作改革方案的通知》(国发【2015】13号)、山东省政府《关于开展国家标准化综合改革试点工作的实施方案》、《山东水产学会团体标准管理办法(试行)》的要求和山东水产学会《关于开展山东水产学会团体标准立项申请的通知》,标准起草小组提出申请,经审查、专家评议,于2021年8月16日获批立项。本标准制定任务由山东省海洋科学院提出,由山东水产学会归口,山东省海洋科学研究院,威海圣航水产科技有限公司,莱阳市海洋渔业有限公司,威海海宽海洋生物科技有限公司承担起草制定工作。2.起草单位标准起草单位山东省海洋生物研究院是我国最早进行刺参育苗及养殖技术研究的单位,现有省级刺参良种场及苗种繁育、养殖生产基地,相关设施及大型分析试验仪器配套齐全,可方便地进行不同样品间的比对。目前,已完成制定《无公害食品刺参》、《栉孔扇贝苗种》、《刺参工厂化养殖技术规程》、《刺参养殖池塘建设规范》、《刺参生态苗种培育技术规范》、《刺参池塘中间培育技术规范》、《刺参浅海网箱养殖技术规范》等近40项国家、行业及地方标准,熟悉相关标准的技术内容,了解标准修订的工作程序,为标准的制定提供了良好的技术基础。此外,标准制定团队拥有我省刺参产业技术体系创新团队首席专家兼育种岗位专家、增养殖岗位专家等多名产业相关高层次人才,学科带头人同时兼任山东省渔业协会特聘专家、“胶东刺参”质量保障联盟特聘专家、省水产专家顾问团专家成员等多个学术团体的重要职务,对全省刺参产业尤其是养殖生产现状与需求有着深入了解,具备丰富的实践经验,相关科研成果已获国家及省部级各类奖项近30项。因此,本单位及标准起草人员完全能够胜任本标准的制定工作。在标准制定过程中,为规范项目组织管理,标准起草单位加强起草小组成员间协同配合,提高各项工作绩效,围绕标准建设的任务要求和标准制定项目的特色,制定了组织管理制度,合理划分了责任任务,强化了协同配合,充分保证了各成员间的交流畅通与资源共享,对项目的顺利实施和按期完成也起到了很好的保障支撑作用。3.协作单位威海圣航水产科技有限公司,是集刺参等海洋生物的原种保存、苗种繁育、良种选育于一体的水产种业企业,先后获评“全国现代渔业种业示范场”、“山东省海洋工程技术协同创新中心”、“山东省海上粮仓遗传育种中心”等。近年来,公司先后承担国家级科研项目3项、省级科研项目4项、市级科研项目4项,同时在生产过程中,公司利用生产经验,申请了并获得授权10项实用新型专利,3项正在受理的发明专利,1项已授权的发明专利,参与制修订国家标准2项。目前正与中国科学院海洋研究所、中国水产科学研究院、山东省海洋生物研究院等科研院所建立起了紧密的产学研协同创新关系,联合开展了保种、选育和现代分子生物学技术的研发工作。公司拥有实验室100m2,配备疾病检测仪器设备、水质分析检测设备、药残快速检测设备等实验器械,实验仪器设备完善。威海洋德海洋生物科技有限公司,位于威海市文登区泽库镇刘家村村东,占地60亩,固定资产总值5000万,主要从事海参苗种的繁育和推广,公司年育苗量达5万斤以上,年产值1000万,场内现拥有现有种质创制车间1栋,种质保存车间1栋,苗种繁育车间1栋,工厂化育苗车间水体15000立方米,海水源热泵机组2台,淀淀池30亩,重力沙滤塔2座,蓄水池1座,实验室、监控室、档案室、展示厅配备齐全。育苗室配套设施齐全、先进,增氧、投饲、水质监测和渔业通远程鱼病诊断系统等设备齐全,运行良好。场内建有养殖用水净化和废水处理设施设备,养殖废水达标排放。公司发展优势明显,一是养殖资源相对丰富,区位优势比较明显。项目区水源充足,水质优良,无污染,汞、砷、酚、铬及氰化物等五种有毒物质含量均低于国家规定标准。渔业用水的水源和水质有可靠保障。二是科技创新进步,带动示范效果好。育苗场通过加强与国内多家水产科研院所的密切合作,抓好先进水产养殖技术的研究和推广应用,不断增强自主创新能力和产业发展的科技含量,加速科技成果向生产力的转化。育苗场还利用当地渔业科技入户工程,加强与市县渔业技术专家交流学习,有力地促进了育苗场的养殖技术水平的提高。威海海宽海洋生物科技有限公司,成立于2011年7月28日,注册资金5000万人民币,是一家以海参、鱼、虾、蟹、海蜇、贝类养殖,海参育苗及技术研发,生态农业休闲观光服务为一体的综合公司,是山东省集海参良种培育、育苗、养殖、海产品精深加工于一体的龙头企业,是威海市第一批现代化渔业园区、威海市创建食品卫生城示范企业、威海市休闲渔业园区、威海市科技产业创新基地。公司建设围海面积6000亩的海上生态养殖区,所有种苗均来自公司自有占地79亩的工厂化刺参育苗场。公司是山东省海洋与渔业厅“胶东刺参”质量保障联盟二十家发起单位之一,拥有“威海刺参”地理标志,产品已通过“无公害农产品”、正在申请“有机产品”认证和HACCP认证,着力培育发展养殖、增殖、捕捞、加工、休闲渔业五大主导产业。海宽公司以精细选种育苗,绿色养殖加工为生产理念,坚持精心选种,细心保苗,育苗全过程不使用抗生素,为国内首家使用生物方法育苗成功的企业,所用饵料为本地海带海藻经过精粉而成。年产成品鲜刺参100-120万斤,深加工产品有盐渍海参、淡干海参、即食海参等。全部按照国标生产(生产许可证号SC12237108114844)。4.主要工作过程1、成立标准起草小组,明确主要起草人及任务分工。2、收集刺参育种相关参考文献资料,包括专著、国内外公开发布论文、科研成果,结合项目组的前期研究成果,参考刺参相关国家、行业、省地方标准,初步确定了标准的技术内容,并起草了标准草案。3、根据标准草案内容开展刺参“鲁海1号”的苗种繁育试验工作,优化了关键技术参数,为标准的技术内容提供了科学依据。4、调研山东省东营、威海、烟台、青岛以及辽宁等地沿海的刺参苗种扩繁企业,广泛征求并记录了生产企业对刺参苗种繁育标准化工作的意见和建议,为标准数据的制定提供支持,并对标准草案进行修改完善。5、组织科研、生产单位同行专家及相关人员共同开展调研活动,对刺参苗种繁育的环境条件、培育设施、亲参促熟、采卵与受精孵化、幼体和稚参培育、苗种质量与运输等关键技术逐条进行了推敲与核实,形成征求意见稿,呈送有关科研、教学、推广、生产和管理部门的专家征求意见。5.主要起草人及其工作胡炜:项目主持人,负责方案制定、调研、数据采集、标准起草和修改等工作;李成林:主要起草人,负责协调调研、试验开展和标准起草、修改等工作;韩莎:主要起草人,参与数据分析、标准起草、修改等工作;赵斌:主要起草人,参与意见汇总、标准修改等工作;王琦:主要起草人,参与具体实验、标准修改等工作;宋宗诚:主要起草人,参与具体实验、标准修改等工作;陈晓红:主要起草人,参与具体实验、标准修改等工作;姚琳琳:主要起草人,参与具体实验、标准修改等工作;王绍斌:主要起草人,参与具体实验、标准修改等工作。三、编制本标准的原则和依据1、遵循有关方针、政策、法规和规章,按照GB/T1.1-2020标准化工作导则要求编写。主要对环境条件、培育设施、亲参促熟、采卵与受精孵化、幼体和稚参培育、苗种质量与运输等技术内容进行规定。2、本标准的制定,遵循国家有关方针、政策、法规和规章,严格执行强制性国家标准,参考行业标准,充分考虑国际上通用标准。在格式上按照GB/T1.1-2020的规定进行编写,编制说明按国家技术监督局“国家标准管理办法”第三章第十六条和《农业部国家(行业)标准的计划编制、制定、和审查管理办法》第二章的基本要求编写。3、标准的文字表达力求准确、简明、易懂,结构合理、层次分明、逻辑严谨。具有可操作性,便于贯彻实施。标准中的术语、符号统一,与相关标准相协调。4、广泛听取和征求从事刺参相关研究的专家和科研人员、苗种生产企业的意见,进行广泛的调查研究和必要的试验验证工作,全面掌握目前生产实际情况。5、对获得的资料和数据进行综合研究,使数据科学化,在充分考虑可操作性的同时,做到经济合理。6、密切结合我省情况,同时参照国家、行业标准,有利于规范刺参“鲁海1号”的安全保护和高效利用,有利于推动提高刺参产业的良种覆盖率。四、本标准主要内容说明本标准共包括十二部分内容,一是前言部分,包括标准制定规则、提出和归口单位、起草单位、主要起草人;二是范围部分,包括标准规定的技术内容范围、适用范围;三是规范性引用文件部分,包括标准内容中引用到的标准文件和版本说明;四是环境条件部分,包括场址选择要求、水质要求;五是培育设施部分,包括对育苗室、培育池、砂滤池、进排水系统、充气设施、控温设施以及附着基等配套设施的要求内容;六是亲参阶段技术内容,包括亲参选择、蓄养、入池、投饲等技术内容;七是采卵与授精部分内容;八是孵化技术内容,包括孵化密度、孵化条件等;九是选优技术内容;十是浮游幼体培育技术内容,包括培育密度、水质控制、投饵、增氧、培育条件等;十一是稚参培育技术内容,包括附着基处理、投放时间、培育密度以及投饲、换水、倒池、分苗等日常管理要求;十二是苗种质量及运输技术内容。其中,标准第十浮游幼体培育和第十一部分稚参培育部分是本标准核心技术内容,具体参数的确定依据及方法如下:1、环境条件场地水质清净、透明度大、风浪较小的内湾,海区无大量淡水注入,无工业、农业、生活污染。育苗用水水质应符合NY5052的规定,须经沉淀、多级过滤、生物净化处理,盐度≥25,pH7.6~8.6,溶解氧>5mg/l。2、养殖设施育苗室要求通风条件好,室内光线控制在50lx-500lx。培育池呈长方形,池深1m~1.5m,容积为16m³~20m³。砂滤池滤料为不同粒径的砂石,每层滤料铺设厚度15cm以上,细砂层铺设厚度为40cm-60cm。配套设施应具备供电系统、供水系统、增温系统等。沉淀池与蓄水池的总纳量高于日用水量的1倍。3、光照对刺参幼体存活、生长、发育和附着变态的影响标准起草小组开展了不同光照强度(0lx、50lx、500lx和2000lx)和不同光照周期(24L:0D、14L:10D、10L:14D和0L:24D)对刺参浮游幼体存活、生长、发育及附着变态的影响。结果表明:(1)光照强度和光照周期显著影响刺参幼体的生长,幼体在不同光照强度下生长速度的高低顺序为:500lx>50lx>2000lx>0lx,不同光照周期下生长速度的高低顺序为:14L:10D>10L:14D>24L:0D>0L:24D。(2)不同光照强度下,幼体的存活率随光照强度的升高而增大;0L:24D光周期下的幼体存活率显著低于其余3个光周期处理。(3)4种光照强度下,500lx处理组的幼体发育最快,9天时樽形幼体的发生率为30.9%,0lx处理组樽形幼体的发生率仅为5.2%,且致畸率高达17.7%,显著高于其他光照强度处理;4种光照周期下,10L:14D光照周期下的幼体发育最快,9天时樽形幼体的发生率为34.8%,显著高于其余光周期处理组。(4)幼体在不同光照强度和光照周期下变态率的大小顺序分别为:50lx>500lx>2000lx>0lx,10L:14D>14L:10D>24L:0D>0L:24D,光照强度与光照周期均显著影响幼体的变态。可见,提供一定的光照对刺参浮游幼体的生长发育更为有利。9天时,幼体开始变态为樽形幼体,0-2000lx下其占浮游幼体的比例依次为5.2%、24.7%、30.9%和16%。50lx下畸形幼体所占的比例最低(3.2%),而随着光强的升高或降低,畸形幼体的比例也逐渐升高,且0lx下畸形幼体比例(17.7%)显著高于其余光照组(P<0.05)(图1)。光照强度(lx)图1第9天时不同光照强度下幼体发育状况不同光照强度下刺参幼体的附着变态率如图2所示,50lx光照处理下幼体的变态率为72.3%,显著高于0lx下的47.7%、500lx下的57.9%和2000lx下的54.1%(P<0.05)。图2不同光照强度下刺参幼体附着率光照周期对刺参摄食后幼体生长和存活的影响显著(P<0.05)。9天时,无光照的0L:24D处理组的幼体生长率显著高于其他光照组。整个摄食后幼体的实验中,0L:24D处理组的幼体存活率一直低于其余处理组。0L:24D处理组畸形幼体占浮游幼体的比例最高,为17.7%,10L:14D处理组樽形幼体比例最高(34.8%),显著高于0L:24D处理组的5.2%和24L:0D处理组的13%(P<0.05),与14L:10D光照组的20%差异不显著(P>0.05)(图3)。光照周期图3第9天时不同光照周期下幼体发育状况4、不同附着基刺参“鲁海1号”繁育效果试验观察到受精卵发育成樽形幼体时,开始往池中投放附着基。其中实验组1投放消毒好、规格为30厘米×40厘米的波纹板30吊。经过3天培育,参苗全部附着后开始换水,每天换水一次,换水量30%,换水后泼洒微生态制剂5毫升/米³。7天后倒池,将池底参苗泼洒到波纹板上。每天投喂饵料两次,饵料为大叶菜海泥混合物。15天后更换波纹板,一个月后参苗下板。实验组2投放消毒好、规格为40厘米×50厘米的聚乙烯网片100吊。经过3天培育,参苗附着后开始换水,3~4天换水一次,换水量30%,换水后泼洒微生态制剂5毫升/米³。7天后倒池,将池底参苗泼洒到聚乙烯网片上。每天投喂饵料两次,饵料为大叶菜海泥混合物。15天后更换聚乙烯网片,一个月后参苗下板。5、PH对刺参“鲁海1号”生长、存活的影响比较分析了在对照组(pH为8.4)、低pH胁迫组(pH为6.8、7.0、7.2、7.4、7.6和7.8)和高pH胁迫组(pH为8.6、8.8、9.0、9.2、9.4和9.6)的养殖水环境下,胁迫36d对刺参存活、生长及抗氧化酶活性的影响。结果显示,不同pH对刺参存活、生长及抗氧化酶活性有显著影响。在pH7.4~9.0范围内,刺参存活率为100%,随着pH胁迫强度和胁迫时间的增加,刺参存活率逐渐降低,当pH为6.8、7.0和9.6时,自第3天起,刺参处于过度应激状态,继而有死亡个体出现,至30d时刺参死亡率为100%。不同pH显著影响刺参生长,刺参特定生长率随pH胁迫程度增加呈下降趋势,当pH为9.0时,刺参出现负增长。各pH胁迫组刺参超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均高于对照组,且随pH胁迫程度的增加呈先升高后下降的变化趋势。在低pH组中,以pH=7.4时刺参SOD和CAT活性最高,分别达到(74.92±2.24)U/ml和(14.99±2.38)U/ml,显著高于对照组;而在高pH组中,SOD和CAT活性分别以pH8.8和9.0时最高,分别达到(72.90±1.10)U/ml和(15.68±0.89)U/ml,显著高于对照组。结果表明,pH在7.4~9.0范围内是刺参存活与生长的适宜水环境,过高或过低均会引起刺参不同程度的应激反应,进而导致刺参的死亡。五、本标准与国家相关法规和强制性标准的关系目前相关标准包括《GB/T32756-2016刺参亲参和苗种》、《SC/T2003-2012刺参亲参和苗种》、《SC/T2097-2019刺参人工繁育技术规范》以及山东省地方标准《DB37/T703-2007刺参苗种生产技术规程》等,均为普通刺参的繁育技术规程,且制定的时间也较久远,已经无法满足当前刺参苗种扩繁尤其是刺参“鲁海1号”扩繁的技术要求。本
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