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DB63本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件起草单位:中国科学院西北高原生物研究所、青海省国家公园科研监测评估姚占山、江峰、顾海峰、李斌、梁程博、张萌、郭凡、陈晓苑、1普氏原羚个体识别分子技术规程GB/T6682分析实验室用水规格GB/T43650野生动物及其制品DNA物种普氏原羚的多个特定的基本重复单元为4碱基的微卫星序列,其多态性用于普氏原羚个体对DNA样品进行微卫星位点PCR扩增后,利用毛细管电泳技术测定生物样本采用微卫星标记技术,对同一时间或不同时间,某一区域或多个区域的两个或多个DNA样品是否4缩略语DNA:脱氧核糖核酸(DeoxyribonucleicAcid)dNTPs:脱氧核糖核苷三磷酸(Deoxy-ribonucleosideTriphosDTT:二硫苏糖醇(DithiothrEDTA:乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraacetic2PBS:磷酸盐缓冲溶液(PhosphateBufferedSalinPCR:聚合酶链式反应(PolymeraseChainReactioSDS:十二烷基磺酸钠(SodiumDodecylTaq酶:耐热DNA聚合酶(Taq-DNAPolymTE:含乙二胺四乙酸的三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris-EDTABufferSolTris:三(羟甲基)氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomet根据检测样本类型,基因组DNA提取按照SF/T0134执行或选择对一个月内使用的DNA样品保存于4℃冰箱,长期保存的DNA样品保根据附录C的微卫星标记的引物序列合成引物,并对正向引物的5’端进行荧光标记。操作过程应避选用PCRTaq酶进行微卫星扩增,反应体系见附录3DNA样品的微卫星位点扩增在PCR仪上进行获取的微卫星长度数值减去附录C参考长度最小值的差除4A.1主要仪器设备A.2主要试剂液、3mol/LNaCl溶液、吸附液、硅珠悬液(富含二氧化硅微粒)、漂洗液、SE缓冲液、5mol/LNaCl5溶液配方),),),),),),),Tris碱242g和冰醋酸57.1mL,用纯水定容到1L。2HPO46引物序列5’-3’1234567897用量(μL)12234567-最适退火温度(℃)123
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