苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析2

苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析第1页，共46页。第一节、结构与性质一、典型药物和结构特点R1:R2:-H;-CH3;-CH(CH3)2;-C(CH3)3;;

R3:-H;-CH3儿茶酚胺类HX:HCl;H2SO4;重酒石酸*第2页，共46页。常见苯乙胺类典型药物：肾上腺素盐酸多巴胺第3页，共46页。第4页，共46页。第5页，共46页。第6页，共46页。二、理化性质1、酚羟基特性

本类药物的一些药物分子具有邻苯二酚（或酚羟基）结构：①、与重金属配位呈色②、露置空气，遇光、热、碱易氧化，色泽变深。2、弱碱性

具有脂烃氨基侧链，氮为仲氨氮，显弱碱性。游离碱难溶于水，盐可溶于水。3、旋光性

大多数具有手性碳，具有旋光性。*具有苯环特征吸收带（λmax=254nm）。4、紫外吸收特性第7页，共46页。第二节、鉴别试验一、与铁盐的反应二、与甲醛-硫酸反应具有酚羟基的药物，与硫酸-甲醛反应，生成相应的醌式结构。第8页，共46页。与三氯化铁反应、与甲醛－硫酸反应药物三氯化铁甲醛－硫酸肾上腺素Adrenaline0.1mol/L盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色红色重酒石酸去甲肾上腺素Noradrenalinebitartrate翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色淡红色盐酸去氧肾上腺素Phenylephrinehydrochloride紫色玫瑰红→橙红→深棕红盐酸异丙肾上腺素Isoprenalinehydrochloride深绿色，滴加新制5%碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色棕色→暗紫色盐酸多巴胺Dopaminehydrochloride墨绿色，滴加1%氨溶液，显紫红色第9页，共46页。酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色肾上腺素碘或过氧化氢中性或酸性肾上腺素红放置棕红色多聚体盐酸异丙肾上腺素偏酸性条件碘异丙肾上腺素红硫代硫酸钠重酒石酸去甲肾上腺素酒石酸氢钾饱和液pH3.56碘试液放置5min硫代硫酸钠溶液为无色或仅显微红色或淡紫色淡红色溶液三、还原性反应第10页，共46页。四、氨基醇的双缩脲反应盐酸麻黄碱第11页，共46页。芳环侧链有氨基醇-双缩脲反应双缩脲试剂：0.1g/mlNaOH试剂A,0.01g/mLCuSO4试剂B检测蛋白质等物质的特异性反应，与双缩脲试剂作用,产生紫色反应.ChP(2010):鉴别麻黄碱和盐酸去氧肾上腺素

第12页，共46页。盐酸麻黄碱NaOH+CuSO4紫色乙醚水层蓝色乙醚层紫红色盐酸去氧肾上腺素NaOH+CuSO4紫色乙醚乙醚层不显色水层紫色第13页，共46页。五、脂肪伯胺的Rimini反应重酒石酸间羟胺H2O溶解亚硝基铁氰化钾丙酮（无甲醛）碳酸氢钠△紫红色第14页，共46页。六、吸收光谱特征（1）、紫外药物溶剂浓度(mg/ml)λnm(nm)吸收度(A)重酒石酸间羟胺水0.10272盐酸异丙肾上腺素水0.052800.50盐酸多巴胺0.5%硫酸0.03280盐酸芬氟拉明0.1mol/L盐酸0.25263,270盐酸苯乙双胍水0.012340.60盐酸克伦特罗0.1mol/L盐酸0.03243,296硫酸沙丁胺醇水0.08274盐酸伪麻黄碱水0.50251,257,263第15页，共46页。（2）、红外盐酸去氧肾上腺素第16页，共46页。第三节、特殊杂质检查生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。一、酮体杂质的检查（UV）310nm处杂质有吸收，样品无吸收第17页，共46页。

药物

检查的杂质

溶剂样品浓度(mg/ml)测定波长(nm)A肾上腺素

酮体HCl(9→2000)2.0310≤0.05盐酸去氧肾上腺素

酮体

水2.0310≤0.20重酒石酸去甲肾上腺素

酮体

水2.0310≤0.05盐酸异丙肾上腺素

酮体

水2.0310≤0.15盐酸甲氧明

酮胺

水1.5347≤0.06苯乙胺类药物酮体杂质的检查（UV）第18页，共46页。二、光学纯度的检查肾上腺素第19页，共46页。对于手性药物光学纯度检查的最佳方法是实现对映体分离分析色谱法电泳法第20页，共46页。三、有关物质检查TLC法：检查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每1ml含20mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，加甲醇稀释成每1ml中含0.10mg的溶液，作为对照溶液。吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇－氯仿－浓氨溶液(80:5:15)为展开剂，展开后，晾干，喷以重氮苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。例：盐酸去氧肾上腺素第21页，共46页。纸色谱法：例：盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查取本品1.00g，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，照纸色谱法（附录ⅤA）试验，精密吸取上述溶液0.2ml，分别点于两张色谱滤纸条(7.5cm×50cm)上，并以甲醇作空白点于另一色谱滤纸条，样点直径均为0.5～1cm；照下行法，将上述色谱滤纸条同置展开室内，以醋酸乙酯－乙醇－水(6:3:1)为展开剂，展开至前沿距下端约7cm处，取出，晾干，用显色剂（取10％铁氰化钾溶液1ml，加10％亚硝基铁氰化钠溶液与10％氢氧化钠溶液各1ml，摇匀，放置15min，加水10ml与丙酮12ml，混匀）喷其中一张点样纸条（有关双胍显红色带，Rf值约为0.1），参照此色谱带，在另一张点样及空白纸条上，剪取其相应部分并向外延伸1cm，并分剪成碎条，精密吸取甲醇各20ml分别进行萃取后，照分光光度法（附录ⅣA），在232nm的波长处测定吸收度，不得过0.48。第22页，共46页。色谱柱：C18流动相:硫酸四甲基铵溶液：甲醇（95：5）检测波长:205nm供试品溶液：1mg/ml对照品溶液：2mg/mlHPLC法例：肾上腺素对照品溶剂峰样品峰供试品单个杂质不得大于对照溶液主峰面积（0.2%），各杂质峰面积和不大于主峰面积的2.5倍（0.5%）第23页，共46页。调灵敏度：对照品进样20μl,主峰高为满量程的20%～25%

测定：进对照品和供试品各20μl，记录谱图的保留时间是主成分出峰时间的2倍，供试品各杂质峰的面积的和不得大于对照品溶液主峰的面积2.5。第24页，共46页。原料药：非水溶液滴定法溴量法亚硝酸钠法制剂：比色法提取容量法紫外分光光度法高效液相色谱法第四节、含量测定第25页，共46页。

1、非水溶液滴定法(15种)原料药

脂烃胺基侧链，显弱碱性，在水溶液中用酸直接滴定没有明显突跃；在非水酸性溶剂中，能被冰醋酸均化到溶剂醋酸根水平，相对碱强度显著增强。第26页，共46页。

脂烃胺基侧链，显弱碱性，在水溶液中用酸直接滴定没有明显突跃；在非水酸性溶剂中，相对碱强度显著增强。当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。第27页，共46页。供试品+冰醋酸10ml~30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml结果高氯酸滴定液滴定以空白试验校正指示剂：结晶紫，或电位法确定终点第28页，共46页。一、一般方法

精密称取供试品适量，加冰醋酸10~30ml溶解（可温热，放冷），加各品种项下规定的试液、指示剂1~2滴（或电位滴定法指示终点），用高氯酸滴定液滴定。需做空白试验。第29页，共46页。二、问题讨论1.适用范围

pKb8~10冰醋酸做溶剂

10~12冰醋酸与醋酐混合溶液＞12醋酐做溶剂第30页，共46页。2.酸根影响醋酸介质中，酸性如下：HClO4＞

HBr＞

H2SO4

＞

HCl＞

HNO3

＞

H3PO4

＞有机酸有机弱碱的盐均用高氯酸滴定第31页，共46页。3.滴定剂的稳定性非水滴定所用醋酸，具有挥发性，温度和贮存条件会影响滴定剂的浓度。冰醋酸的体积膨胀系数为1.1×10-3/℃药典规定标定时和测定试样时温差超过10℃时，标准溶液应重新标定，若未超过10℃则可根据下式将高氯酸浓度加以校正：第32页，共46页。4.终点指示方法常用电位滴定法和指示剂法

结晶紫(或萘酚苯甲醇),蓝绿色(黄绿色)

第33页，共46页。

结晶紫：0.5％的冰醋酸溶液；酸式色为黄色，碱式色为紫色

在滴定不同强度的碱时，终点颜色变化不同。滴定较强的碱时，蓝色为终点；滴定较弱的碱时，蓝绿色或绿色为终点；滴定极弱碱（如咖啡因）时，黄色为终点。为确定终点的颜色，事先常辅以电位滴定加以判定。pH减小5.其他干扰第34页，共46页。例：盐酸沙丁胺醇的含量测定

取本品约0.4g，精密称定，加冰醋酸10mL，微温使溶解，放冷，加醋酐15mL与结晶紫1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定结果用空白试验校正。—《中国药典》2010（1）、有机弱碱可直接用高氯酸滴定的有机弱碱有：胺类、氨基酸类、含氮杂环、有机碱盐、弱酸盐应用示例：样品在不同比例酸酐-冰醋酸中的滴定曲线酸性第35页，共46页。第36页，共46页。第37页，共46页。2、溴量法盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺反应摩尔比为1∶3第38页，共46页。Br2＋2KI＝2KBr＋I2I2＋2Na2S2O3＝2NaI＋Na2S4O6第39页，共46页。第40页，共46页。3、亚硝酸钠法适用于：具有芳伯胺结构的药物第41页，共46页。4、紫外分光光度法UV法:盐酸甲氧明注射液,重酒石酸间羟胺注射液注意：由于偶合剂（N-(1-萘基)-乙二胺）与亚硝酸也能显色干扰测定，所以在重氮化后，应加入氨基磺酸铵分解剩余的亚硝酸。比色法：盐酸克仑特罗栓，盐酸异丙肾上腺素气雾剂芳伯胺重氮化-偶合反应第42页，共46页。盐酸多巴胺测定:显色剂:硫酸亚铁-酒石酸盐测定波长:520nm分子结构中的酚羟基可与Fe2+配位显色第43页，共46页。5、高效液相色谱法盐酸肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射液、硫酸沙丁醇片、缓释片、盐酸氨溴口服、片剂、胶囊、缓释胶囊等