（正式版）DB31∕T 1150-2019 《厚叶岩白菜组培生产技术规范》

2019-03-22发布上海市市场监督管理局发布I 1 1 1 24.1水质要求 24.2容器清洗 24.3消毒液配制 24.4母液配制 24.5培养基配制 24.6废弃培养基处理 3 35.1接种准备 35.2无菌操作 3 36.1外植体采集和修切 36.2外植体消毒 4 47.1培养条件 47.2初代培养 47.3增殖培养 47.4壮苗培养 47.5生根培养 47.6组培苗摆放、检查和更新 5 58.1移栽规格 58.2温室驯化 5 58.2.2温室养护 58.2.3病虫害防治 6 69.1基质配制 69.2养护管理 6 610.1质量规格 6Ⅱ10.2种苗检验 710.2.1检验方法 710.2.2检验规则 710.3种苗包装 710.4种苗运输 8附录A(资料性附录)厚叶岩白菜组培生产培养基药品名录及配方 9附录B(资料性附录)厚叶岩白菜组培苗病虫害主要危害特征及防治 附录C(资料性附录)厚叶岩白菜种苗质量检验证书格式式样 Ⅲ1本标准适用于厚叶岩白菜的组培生产。组培苗microshoot通过植物组织培养方式形成的再生植株。组培苗苗高heightofmicroshoot注：指尚未移栽组培苗的高度。苗高heightofplantlet基质表面至最高叶片顶部的垂直距离。24.1水质要求4.3消毒液配制本标准所用消毒液按表1规定比例配制。表1配制消毒液消毒液类型消毒液浓度%定容乙醇溶液氯化汞溶液“高锰酸钾溶液b乙醇溶液由纯度99.9%的无水乙醇配制。氯化汞用精密度至少为千分之一的电子天平称取。4.4母液配制本标准所用培养基分为初代培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基四种，配方配制培养基按以下步骤操作：3a)摇匀母液；c)用1mol/L盐酸和1mol/L氢氧化钾调pH至5.7～5.9之间；注1:MS培养基干粉包含大量元素、微量元素、铁盐和有机元素，各组分药品名称分子式、相表A.2。注2:1/2MS培养基干粉是MS培养基干粉中大量元素减半，其余组分和含量不变。表2培养基高度单位为毫米培养基类型4.6废弃培养基处理5.1.1工作间应清洁干燥。工作间地面和墙面每20d～40d用浓度为10%～20%苯扎溴铵溶液擦拭，每天开启风机6h～8h。5.1.3工作台使用应规范。每次使用超净工作台前，台面、四周和外壳用浓度为10%～20%苯扎溴铵无菌操作接种时按以下步骤：外植体采集和修切按以下步骤操作：4a)修切好的外植体在2h～5h内，先用浓度为5%～15%洗洁精溶液浸泡外植体2min~b)在超净工作台上，先用浓度为72%～75%的乙醇溶液浸泡外植体30s～60s,再用加有2滴~4滴聚山梨酯-80的0.1%～0.2%的氯化汞溶液浸泡15min～30min,无菌水冲洗3次～5次，每次1min～2min;c)消毒后的外植体，在无菌显微镜下继续修切为0.2mm～0.5mm的芽点，接种于初代培养基。——培养温度为22℃~26℃,培养周期为25d～35d;——光培养时，光周期为10h/d～14h/d,光照强度为15001x～2——培养容器高度为6cm～8cm,底部直径为4cm～6cm;5 生根培养的容器，高度为8cm~17cm,底部直径为6cm~8cm,每瓶6个~8个组培苗。—组培苗高2cm～3cm,具有3—生根3条～6条，平均组培苗根长0.5cm,总根长为1.5cm～3.0cm。8.2.1温室移栽b)用清水洗净黏附于根部的培养基，用500倍～600倍托布津水溶液浸泡根部10s~d)种植完叶面喷雾状水，浇透基质放入苗床，苗床上面搭60cm～100cm高塑料薄膜覆盖的拱棚；8.2.2温室养护 移栽初期光照强度小于20001x,后期逐渐加强光照，最终稳定为55%～75%的自然光照注：硫酸钾复合肥，总养分含量不小于45%,氮(N)、磷(P)和钾(K)的有效成分含量各为15%。6表3移栽时间与揭开时长揭开时长指每天揭开塑料拱棚的时间。8.2.3病虫害防治注：“大生80%”主要成分是代森锰锌，“58%雷多米尔”是10%瑞毒霉和48%代森锰锌复合配制剂。穴盘苗移至容器中培育时，种苗规格应符合表4规定。选用草炭、珍珠岩、黄心土和粗木屑按10.1质量规格表4种苗规格冠福叶片数目片叶片颜色翠绿，层次分明；同一5注：琼脂苗高度指组培苗苗高；穴盘苗、容器苗高度指苗高。·琼脂苗应无污染及畸形，3条以上不定根，色白健壮，根处无愈伤组穴盘苗和容器苗根系应发达，无病虫害。7报检单应符合GB/T23473—2009中附录A规定。表5包装方式和包装数量单位为棵穴盘苗整盘包装时，每盘的种苗数。种苗使用较小塑料容器或报纸包装的数量。8用厢式货车运输，运输途中温度保持15℃~25℃;3d～7d内到达目的地。9药品类别中文名称磷酸二氢钾硝酸钾碘化钾乙二胺四乙酸二钠有机质2222糖防褐变剂一一一吲哚丁酸一一药品类别中文名称硝酸钾乙二胺四乙酸二钠有机质糖防褐变剂吲哚丁酸注：6-苄氨基腺嘌呤、萘乙酸、吲哚丁酸通常分别缩写为6-BA、NAA,IBA。(资料性附录)厚叶岩白菜组培苗病虫害主要危害特征及防治表B.1厚叶岩白菜组培苗病虫害主要危害特征及防治防治方法蚜虫发病初期，用50%～70%的艾美乐原液稀释(3000倍~5000倍)或10%～20%的吡虫啉原液稀释(800倍~1000倍)喷雾锈斑病发病初期，用10%～20%的粉锈宁原液稀释(1500倍~2500倍)或10%～12.5%烯唑醇原液稀释(2000倍~3000倍)喷雾心腐病原液稀释(800倍～1000倍),加65%～75%百菌清可湿性粉剂原液稀释(600倍～800倍),连续防治2次～3次，间隔7d~10d种苗检疫母株来源_检验日期：[13]危险化学品安全管理条例(中华人民共和国国务院令第591号)[14]特种设备安全监察条例(中华人民共和国国务院令第549号)[16]杨丽云，陈翠，汤王外，等.药用植物岩白菜种子发芽特性研究[J].种子，2010,29(12):科学，2009,37(8)