QBT 8139-2025 饮料中维生素B12的测定 高效液相色谱法标准立项发展报告

饮料中维生素B12的测定高效液相色谱法标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:DeterminationofVitaminB12inBeverages—HighPerformanceLiquidChromatographyMethod摘要维生素B12作为一种人体必需的微量营养素，在饮料强化与营养标识监管中具有重要的检验意义。现行QB/T8139-2025《饮料中维生素B12的测定高效液相色谱法》由行业标准—轻工归口发布，计划于2025年11月1日正式实施。本报告在系统梳理该标准立项背景、技术内容、试验方法及适用性的基础上，重点分析了标准修订的必要性、与相关食品安全国家标准及国际检验方法的协调关系，并对标准实施后的行业影响进行了展望。报告指出，该标准的发布填补了我国轻工行业饮料基质中维生素B12高效液相色谱检测方法的空白，完善了营养强化饮料的质量控制链条，有助于推动饮料产业营养声称的规范化发展，为食品安全监管和企业质量保障提供了重要技术支撑。关键词：维生素B12；饮料；高效液相色谱法；轻工行业标准；食品检验；营养强化食品；标准修订一、引言1.1研究背景维生素B12（Cobalamin，钴胺素）是唯一含金属元素的B族维生素，在人体DNA合成、红细胞生成及神经系统功能维持中发挥着不可替代的作用。人体自身无法合成维生素B12，必须通过膳食摄入满足生理需求。随着消费者健康意识的不断提升，富含维生素B12的功能饮料、能量饮料及营养强化饮料在市场上快速增加，饮料已成为维生素B12膳食补充的重要载体之一。然而，饮料基质成分复杂，维生素B12含量通常较低（μg/L级别），且对光、热及酸碱环境敏感，在样品提取与净化过程中易发生降解或转化，测定难度较大。传统的微生物法虽灵敏度高，但操作繁琐、周期长、重现性差，难以满足现代食品工业快速质量控制的需求。因此，发展灵敏度高、选择性好、操作便捷的仪器分析方法成为行业亟需解决的技术问题。1.2标准修订的必要性当前，我国涉及维生素B12测定的标准主要包括GB5413.14—2010《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定》（微生物法）以及GB5009.285—2022《食品安全国家标准食品中维生素B12的测定》（高效液相色谱法）。然而，上述标准在样品基质适配性上各有侧重，GB5009.285—2022虽已建立液相色谱方法，但在饮料类样品的前处理细节、净化方式及色谱条件的系统优化等方面仍有待细化。轻工行业迫切需要一份专门针对饮料基质、兼顾操作效率与检测精度的行业标准，以服务于饮料生产企业原料验收、过程控制及成品检验的实际需求。QB/T8139-2025的制定正是对这一行业需求的直接回应。二、标准基本信息概述2.1标准编号及基本信息QB/T8139-2025《饮料中维生素B12的测定高效液相色谱法》是由中华人民共和国工业和信息化部发布推荐的轻工行业标准。该标准于2025年4月10日发布，并将于2025年11月1日起正式实施。标准ICS分类号归属于“食品试验和分析的一般方法”，国别为中国，语种为中文（简体），目前状态为“现行”。2.2标准的技术定位该标准定位于饮料基质中维生素B12的高效液相色谱定量分析方法，适用于各类饮料产品，包括但不限于维生素功能饮料、营养素强化饮料、果汁饮料、植物蛋白饮料、乳味饮料及运动饮料等。标准规定了样品前处理、色谱分离条件、定量方式及方法性能指标等内容，旨在为行业提供统一、规范、可比的检测依据。2.3标准的主要内容框架QB/T8139-2025在结构编排上遵循GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求，涵盖范围、规范性引用文件、术语和定义、原理、试剂和材料、仪器和设备、分析步骤（含试样制备、提取净化、色谱条件）、结果计算、精密度和回收率、允许差等内容。标准附录部分提供了方法验证数据，包括检出限、定量限、加标回收率及重复性标准差等关键技术参数。三、标准技术内容分析3.1方法原理QB/T8139-2025所规定的方法基于高效液相色谱—紫外检测（或二极管阵列检测）原理。试样经提取、免疫亲和柱净化或固相萃取净化后，注入高效液相色谱仪，经C18反相色谱柱分离，在特定波长（通常为361nm或550nm，视维生素B12衍生物形态而定）下检测，以色谱保留时间定性、外标法（或内标法）峰面积定量。维生素B12在紫外—可见光区具有特征吸收光谱，其最大吸收波长位于361nm附近（氰钴胺形态），该方法利用该特征实现选择性检测。对于部分含量较低或基质干扰严重的样品，标准中也规定了可供选用的富集步骤以提高方法灵敏度。3.2样品前处理饮料样品种类繁多，基质差异显著。对于成分相对简单的透明饮料，标准规定了直接稀释、过滤后进样的简化处理程序；对于含有蛋白质、脂肪、色素及胶体成分的复杂基质饮料，则规定了酶解处理、蛋白质沉淀、固相萃取（SPE）净化等多步前处理方案。通过酶解作用释放结合态维生素B12，使其转化为游离态氰钴胺，有利于后续色谱分析。此外，考虑到维生素B12见光易分解的特性，标准中对操作环境的避光要求、样品存储条件及操作时限做出了明确规定，以保证检测结果的准确性。3.3色谱条件的系统优化在色谱分离方面，标准推荐采用C18反相色谱柱（粒径3~5μm，柱长150~250mm），以乙腈—磷酸盐缓冲液体系作为流动相，流速设定为0.8~1.2mL/min，柱温控制在25~40°C范围内。标准对流动相pH值、缓冲液浓度、有机相比例等关键参数进行了系统优化，确保维生素B12在复杂基质中实现良好分离，与共存组分达到基线分离（分离度R≥1.5）。3.4方法性能指标根据标准编制说明中的验证数据，该方法在饮料基质中的检出限（LOD）约为0.05μg/L，定量限（LOQ）约为0.2μg/L，在0.5~100μg/L范围内呈现良好线性关系（r≥0.999）。在三个添加水平下的加标回收率范围为85%~110%，批内精密度（RSD）不大于5%，批间精密度（RSD）不大于8%。各项技术指标均满足或优于GB/T27404—2008《实验室质量控制规范食品理化检测》的相关要求。四、标准修订的行业背景与政策驱动4.1我国饮料行业发展现状近年来，我国饮料行业持续保持稳健增长态势。据中国饮料工业协会统计数据，2024年全国饮料总产量已突破2亿吨，其中功能饮料和营养强化饮料的增长速度明显高于行业平均水平。伴随消费升级，饮料产品正从“解渴”向“营养补充”“健康功能”等方向转型，维生素强化类饮料的市场规模逐年扩大。饮料中维生素添加量的准确检测是保障产品质量和合规性的前提。QB/T8139-2025的制定恰逢其时，适应了行业产品结构调整和技术升级的需要。4.2政策法规对标准修订的驱动近年来，我国食品安全监管力度持续加大。《中华人民共和国食品安全法》明确规定，食品生产经营者应当建立食品安全管理体系，保证食品安全。GB13432—2013《食品安全国家标准预包装特殊膳食用食品标签》和GB28050—2011《食品安全国家标准预包装食品营养标签通则》对食品中维生素的声称（如“含有”“富含”“来源”等）提出了明确的量化要求，即产品中维生素实际含量必须达到标签标示值的一定比例。若缺乏科学可靠的检测方法，营养声称的真实性和监管的有效性将无从保证。此外，《国家标准化发展纲要》明确提出要“优化标准化治理结构，增强标准化治理效能，提升标准国际化水平”，并要求“加强食品消费品领域标准制定”。QB/T8139-2025的发布正是贯彻落实该纲要精神的具体举措之一。4.3与国际标准的协调在国际层面，ISO20632:2015《乳品和乳制品—维生素B12含量的测定—高效液相色谱法》以及AOAC2014.02等方法已在国际上广泛应用。QB/T8139-2025在技术路线设计上充分参考了国际同类标准的方法学框架，同时在样品前处理细节和基质适配性方面针对我国饮料产品特点进行了适当调整，体现了“国际接轨、中国特色”的标准化思路。五、标准实施的技术支撑与应用前景5.1对食品检验检测机构的技术支持对于各级食品检验检测机构而言，QB/T8139-2025提供了一套具有明确操作步骤和性能指标的方法依据。相较于通用国家标准，该行业标准更贴近饮料行业的实际样品类型，可为政府监督抽检、风险监测及食品安全评价提供技术支撑。标准的实施有助于统一各实验室之间的检测结果，减少因方法差异导致的判定分歧。5.2对饮料生产企业的质量控制价值对饮料生产企业而言，该标准为维生素B12强化饮料的研发、配方设计、原料验收及成品出厂检验提供了可靠的方法学基础。企业可依据该标准建立内部质量控制体系，在保证产品营养声称准确性的同时，有效降低检测成本和时间周期。尤其是在线快速质量控制场景中，HPLC方法相较于传统微生物法的效率优势极具实用价值。5.3对标准化体系建设的贡献从标准化体系建设角度看，QB/T8139-2025填补了我国轻工行业饮料基质中维生素B12检测标准的空白，与GB5009.285—2022形成了“通用标准+行业标准”的多层次标准架构，进一步完善了食品维生素检测标准体系。六、主要起草单位介绍QB/T8139-2025的制定工作汇聚了我国食品检验领域和饮料行业的优势技术力量。主要起草单位包括中国食品发酵工业研究院有限公司、中国饮料工业协会、多家省级食品检验检测研究院以及行业龙头饮料企业的研发中心。其中，中国食品发酵工业研究院有限公司（以下简称“研究院”）在标准制定中发挥了核心作用。研究院成立于1955年，是我国食品发酵领域成立最早、规模最大的综合性研究开发机构之一，长期承担轻工行业标准化技术归口管理工作，是全国食品发酵标准化中心、全国饮料标准化技术委员会秘书处挂靠单位。研究院设有国家食品质量检验检测中心，在食品营养成分分析、食品安全检测技术开发及标准物质研制等方面拥有雄厚的科研积累和丰富的工作经验。在QB/T8139-2025的研制过程中，研究院牵头组织了全国范围内多家实验室进行协同验证实验，系统考察了方法的再现性和稳健性，为标准中关键技术参数的确定提供了翔实的实验依据。研究院团队在维生素B12的提取效率优化、色谱条件筛选以及基质效应消除等方面进行了大量基础性研究工作，确保所建立的方法既满足科学性要求又兼顾实际操作的便捷性。此外，研究院还积极推动该标准与食品安全国家标准体系的衔接与协调，在术语定义、方法原理表述及结果计算方式等方面严格遵循国家标准的统一规范，为标准发布后的顺利实施奠定了坚实基础。七、结论与展望QB/T8139-2025《饮料中维生素B12的测定高效液相色谱法》是我国轻工行业在食品维生素检测领域的一项重要标准成果。该标准的发布填补了饮料基质中维生素B12液相色谱检测方法的标准空白，对完善我国营养强化食品标准体系、规范饮料行业营养声称行为、提升食品安全监管技术能力具有重要的现实意义。展望未来，随着饮料行业的持续创新发展，新型植物基饮料、功能性气泡水、个性化营养定制饮料等产品不断涌现，对检测方法的适应性和扩展性提出了更高要求。建议在标准实施过程中持续收集行业反馈和应用数据，适时开展标准的复审和修订工作。同时，建议相关技术机构积极推进免疫亲和柱等核心耗材的国产化进程，降低检测成本，增强标准的可及性和推广应用效果。KeywordsVitaminB12;Beverages;HighPerformanceLiquidChromatography(HPLC);LightIndustryStandard;FoodInspection;Nutrient-fortifiedFoods;StandardizationDevelopment;QualityControl参考文献[1]GB/T1.1—2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则[S].[2]GB5009.285—2022食品安全国家标准食品中维生素B12的测定[S].[3]GB5413.14—2010食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定[S].[4]GB28050—2011食品安全国家标准预包装食品营养标签通则[S].[5]GB13432—2013食品安全国家标准预包装特殊膳食用食品标签[S].[6]GB/T27404—2008实验室质量控制规范食品理化检测[S].[7]国家市场监督管理总局.食品中维生素B12的测定高效液相色谱法（编制说明）[Z].2022.[8]ISO20632:2015Milkandmilkproducts—DeterminationofvitaminB12content—Highp