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2011-06-11实施2011-06-11实施工1抗虫玉米MON810及其衍生品种实时荧光PCR检测方法件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。转基因植物及其产品检测抽样3术语和定义2是3～15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。4原理5试剂与材料5.270%乙醇(V/V)。5.310mg/mLRNaseA:将胰RNA酶(RNaseA)溶于10mmol/LTris-HCl(pH7.5)、15mmol/LNaCl至8.0,加水定容到100mL,在103.4kPa(121℃)灭菌20min。36.1分析天平：感量0.1g和0.1mg。7.5对照设置按农业部869号公告-9-2007规定的执行。4或空白对照荧光值低于阴性对照和阳性对照荧光值的15%,表明反应体系正常工作；在扩增检测转化36或空白对照和阴性对照的荧光值低于阳性对照荧光值的15%,表明反应体系正常工作。否则，表明仅供学习交流使用，请勿传播或其他用途5表A.1被检测基因引物或探针序列zSSIIb-F:5′-CGGTGGATGCTAAGGCTGzSSIIb-R:5′-AAAGGGCCAGGTTCATTATCCTCzSSIIb-P:5′-FAM-TAAGGAGCACTCGCCGCCGCATCTG-TAMRAMON810-F:5′-CACCACAGCCACCACTMON810-R:5′-ATTCGGAAATGAAAGAAGGCTACCMON810-P:5′-FAM-CTCGTTCAGGTCGGTGCAGCCCA-6终浓度水10Hmol/L探针总体积注1:如果PCR缓冲液中含有氯化镁，则不加氯化镁溶液，加等体积无菌水。注2:玉米内标准基因PCR检测反应体系中，上下游引物和探针分别为zSSIIb-F/R和zSSIIb-P;转基转化体PCR检测反应体系中，上下游引物和探针分别为MON8

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