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文档简介
2011-06-11实施2011-06-11实施工1NY/T673转基因植物及其产品检测抽样3外源插入载体3”端与玉采基因组的连接区序列,包括外源基因部分序列和玉米基因组部分序列。2实时荧光PCR中以PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底是3~15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。4原理5试剂与材料5.270%乙醇(V/V)。5.5500mmol/L乙二铵四乙酸二钠溶液(pH8.0):称取乙二铵四乙酸二钠(EDTA-Na2)18.6g,加入70mL水中,再加入10mol/LNaOH溶液,加热溶解后,冷却至室温,再8.0,加水定容到100mL,在103.4kPa(121℃)灭菌20min。36.1分析天平:感量0.1g和0.1mg。7.5对照设置按农业部869号公告-10-2007规定的执行。4或空白对照荧光值低于阴性对照和阳性对照荧光值的15%,表明反应体系正常工作;在扩增检测转化36或空白对照和阴性对照的荧光值低于阳性对照荧光值的15%,表明反应体系正常工作。否则,表明仅供学习交流使用,请勿传播或其他用途5表A.1被检测基因引物或探针序列zSSIIb-F:5′-CGGTGGATGCTAAGGCTGzSSIIb-R:5′-AAAGGGCCAGGTTCATTATCCTCzSSIIb-P:5′-FAM-TAAGGAGCACTCGCCGCCGCATCTG-TAMRAMON863-F:5′-GTGCTGAGTCCTTCGTCMON863-R:5′-GCAAGAACTCGCACACACATMON863-P:5′-FAM-CATTCAGGTTGGAGCCAATT-TAMRA6终浓度水10Hmol/L探针总体积注1:如果PCR缓冲液中含有氯化镁,则不加氯化镁溶液,加等体积无菌水。注2:玉米内标准基因PCR检测反应体系中,上下游引物和探针分别为zSSIIb-F/R和zSSIIMON863转化体PCR检测反应体系中,上下游引物和探针分别为M
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