CN119395003A 用于进行生物素测定的试剂盒、微流体装置和方法 （美国西门子医学诊断股份有限公司）

201980049810.72019.07.24公开了含有化学发光检测系统的试剂盒和微流体装置以及用于测定样品中生物素的浓度够在其激发态下生成单线态氧并且具有与其直接或间接结合的抗生物素蛋白或其类似物的敏21.含有用于测定样品中生物素的浓度的化学发光检测系统的试剂盒，所述试剂盒包4.权利要求1的试剂盒，其中(b)的组合物具有与所述敏化素蛋白类似物，且其中所述抗生物素蛋白类似物选自抗生物素蛋白、链霉抗生物素蛋白、5.权利要求1的试剂盒，其中所述单线态氧可激活的化学发光化合物是经历与单线态6.权利要求1的试剂盒，其中包含化学发光化合物的组合物进一步包含至少一种被激激发态下生成单线态氧并且具有与其直接或间接结合的抗生物素蛋白或其类似物的敏化(c)至少一个能够与所述第一隔室流体连所述组合物包含具有与其直接或间接结合的生物素或其类似物的单线态氧可激活的化学白类似物，且其中所述抗生物素蛋白类似物选自抗生物素蛋白、链霉抗生物素蛋白、3合的抗生物素蛋白或抗生物素蛋白类似物的敏(f)通过分析如此产生的化学发光的量来检测生物素的存在和/或浓度，其中化学发4[0002]本申请根据35USC§119(e)提供了将抗体或药物固定在固体支持物上的[0006]用于处理当前可用的生物素测定的窄检测范围的唯一方法是进行测试样品的系氧通道测定(LOCI®)技术。LOCI®先进化学发光测定描述于例如美国专利号5,340,716(Ullman等人)，其全部内容明确地通过引用并入本文。当前可[0009]因此，在本领域中需要克服现有技术的缺点和缺陷的新的和改进的生物素测5[0015]术语“至少一个/种”的使用将被理解为包括一个/种以及多于一个/种的任何数在)且B为假(或不存在)，A为假(或不存在)且B为真(或存在)，并且A和B两者均为真(或存6[0017]如本文所用，对“一个实施方案(oneembodiment)”、“一个实施方案(an举的要素或方法步骤。括两个部分彼此直接缔合/结合以及两个部分彼此间接缔合/结合二者。缔合/偶联的非限72物样品。可利用的流体生物样品的实例包括但不限于：全血或其任何部分(即，血浆或血[0025]本公开的某些非限制性实施方案涉及生物素测定组合物以及含有其的试剂盒及[0026]本公开的某些非限制性实施方案涉及含有用于测定样品中生物素的浓度的化学间接结合的抗生物素蛋白或其类似物(诸如但不限于链霉抗敏化剂，其中所述抗生物素蛋白/抗生物素蛋白类似物能够结合样品中的生物素或结合[0027]化学发光化合物(化学发光剂)是化学可激活且作为这种激活的结果而发射特定态氧或过氧化物反应以形成可以分解成酮类或羧酸衍生物的氢过氧化物或二氧环丁烷所述组合物可进一步包含至少一种荧光分子，所述荧光分子由激活的化学发光化合物激8[0029]敏化剂是生成用于激活化学发光化合物的反应性中间产物(诸如例如单线态氧)0构型中的也落入本公开和要求保护的发明构思的范围内的敏化剂物质和组合物的进一步公开内容：(1989)；Böhme和Brauer,Inorg.Chem.,31:3468_3471(1992)；Niu和Foote,Inorg.和Bouttemy,J.Am.Chem.Soc.,119:5286_5294(1997)；和Almeida等人,Anal.Chim.12_四苯基萘5,12_内过氧化物。加热这些化合物或这些化合物直接吸收光而释放单线态够在其激发态下生成单线态氧并且具有与其直接或间接结合的traptavidin的敏化剂，其物能够结合样品中的生物素或结合(a)。在还有其他非限制性实施方案中，所述试剂盒包9[0033]可以根据本公开利用的包含化学发光化合物的组合物和/或包含敏化剂的组合物据本公开利用的颗粒的一个具体(但非限制性)实例是乳胶颗粒，诸如(但不限于)乳胶珠能。可以根据本公开利用的生物素类似物的实例包括但不限于Athappilly等人(ProteinLevert等人(JBiolChem(2002)277:16347一16350)，Yamamoto等人基生物素甲酯和3'一N甲氧基羰基生物素甲酯)，双生物素(例如但不限于双生物素磷酸[0036]根据本公开，可以利用本领域已知或本文另外考虑的任何抗生物素蛋白类似物，存在的任何生物素；和(3)还能够结合与单线态氧可激活的化学发光化合物缔合的生物素另外考虑的任何特定测定的其他试剂。这些额外的试剂的性质将取决于特定的测定形式，[0039]所述试剂盒中的各种组分/试剂的相对量可以广泛变化，以提供组分/试剂的浓具有用于进行根据本公开的方法或测定的适当浓度的试剂溶液。试剂盒也可以包括阳性具有与其直接或间接结合的任何抗生物素蛋白或其类似物的敏化剂；和(c)至少一个能够其直接或间接结合的生物素或其类似物的单线态氧可激活的化学发traptavidin，和/或(c)的单线态氧可激活的化学发光化合物具有与其直接或间接结合的[0047]本公开的微流体装置可以提供有本领域中已知的或本文另外考虑的任何其他期者，如本文所述的测定可以与本领域已知的能够包含在本公开的试剂盒/微流体装置内的4[0049]当多个测定存在于单个微流体装置中时，多个入口通道可以连接至样品应用[0050]某些非限制性实施方案还涉及用于检测样品中生物素的存在和/或浓度的方法。复合物中存在的敏化剂的激活引起所述复合物中存在的化学发光化合物的激活；(d)测定析如此产生的化学发光的量来检测生物素的存在和/或浓度，其中化学发光的量与所述样[0051]可以利用期望针对其进行生物素的存在测定的任何样品可以用作根据本公开的有与其直接或间接结合的HABA，和/或步骤(a)(3)的敏化剂具有与其直接或间接结合的合物组合并将其孵育，所述组合物包含具有与其结合的抗生物素蛋白/抗生物素蛋白类似物的敏化剂，然后添加包含具有与其结合的生物素/生物素类似物的单线态氧可激活的化[0059]在本文描述或另外考虑的试剂盒、微流体装置或方法的任何非限制性实施方案[0060]在本文描述或另外考虑的试剂盒、微流体装置或方法的任何非限制性实施方案1.含有用于测定样品中生物素的浓度的化学发光检测系统的试剂盒，与其直接或间接结合的traptavidin的敏化[0068]7.含有用于测定样品中生物素的浓度[0072]11.项目7的试剂盒，其中[0073]12.项目7的试剂盒，其中包含化学发氧并且具有与其直接或间接结合的traptavidin的敏化剂。第一隔室含有能够在其激发态下生成单线态氧并且具有与其直接或间接结合的抗生物素素蛋白类似物，且其中所述抗生物素蛋白类似物选自抗生物素蛋白、链霉抗生物素蛋白、[0081]20.项目15的微流体装置，其中(c[0083]22.用于检测样品中生物素的存在和/或浓度的方法，所述方法包括以下步骤：其直接或间接结合的生物素或生物素类似物的单线态氧可激活的化学发光化合物；和(3)物素蛋白或抗生物素蛋白类似物的敏化剂；(b)使(3)与样品中存在的生物素或与(2)结化学发光的量来检测生物素的存在和/或浓度，其中化学发光的量与所述样品中生物素的素蛋白类似物，且其中所述抗生物素蛋白类似物选自抗生物素蛋白、链霉抗生物素蛋白、[0095]图2图示描绘根据本公开构建的生物素LOCI®测定法的一个非限制性实施方案的标准曲线，其中所述测定法利用生物素包被的chemibead和链霉抗生物素蛋白包被的[0096]图3图示描绘根据本公开构建的生物素LOCI®测定法的另一个非限制性实施方案的标准曲线，其中所述测定法利用生物素包被的chemibead和traptavidin包被的[0098]图5图示描绘根据本公开构建的生物素LOCI®测定法的又另一个非限制性实施方[0099]图6图示描绘根据本公开构建的生物素LOCI®测定法的又另一个非限制性实施方案，其中所述测定法利用亚氨基生物素包被的chemibead和抗生物素蛋白包被的苯2羧酸(HABA)或本文公开或另外考虑的任何其他生物素类似物)包被的chemibead(CB)；和(ii)用抗生物素蛋白或抗生物素蛋白类似物(诸如但不限于链霉抗生物素蛋白、traptavidin或本文公开或另外考虑的任何其他抗生物素蛋白类似物)包被的sensibead已经证实使用生物素/生物素类似物包被的chemibead和抗生物素蛋白/抗生物素蛋白类似定的第一步涉及将过量的抗生物素蛋白/抗生物素蛋白类似物包被的sensibead(诸如但不限于traptavidin包被的sensibead)与样品一起孵育，使得可以通过sensibead“锁入(locked一in)”样品中存在的任何游离生物素。然后添加生物素/生物素类似物包被的似物包被的sensibead结合生物素/生物素类似物包被的ch09.90.190.562.84一5.7%3.2%3.7%3.9%限制性地)，在生物素LOCI®测定中使用HABA包被的chemibead和/或traptavidin包被的“锁定”到位，并具有最少生物素解离，且因此添加的chemibead不与样品生物素竞争物素类似物的使用组合)的独特特征来产生具有稳健精确度和扩展动态范围的生物素测在本实施例中，使用用生物素包被的chemibead(CB)和用traptavidin包被的sensibead(SB)进行实施例3中描述的生物素LOCI®测定。从该生物素LOCI®测定获得的09.40.540.982.345.39__5.7%2.8%2.8%2.6%sensibead(SB)进行实施例3中描述的生物素LOCI®测定。从该生物素LOCI®测定获得的