ISO 206812026 鞋类和鞋类部件 评估抗微生物活性的试验方法 琼脂扩散试验标准立项发展报告

鞋类和鞋类部件评估抗微生物活性的试验方法琼脂扩散试验标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:Footwearandfootwearcomponents—Testmethodtoassessantimicrobialactivity—Agardiffusiontest摘要关键词：鞋类；抗微生物活性；琼脂扩散试验；国际标准；抗菌性能；标准化AbstractWiththecontinuousimprovementofglobalpublichealthawarenessandtheincreasinglyseverechallengeofmicrobialdrugresistance,themarketdemandforantimicrobialfunctionalfootwearproductshasgrownrapidly.Ascientific,unified,andcomparableevaluationmethodforantimicrobialperformancehasbecomethecoresupportforthestandardizeddevelopmentoftheindustry.ISO20681:2026"Footwearandfootwearcomponents—Testmethodtoassessantimicrobialactivity—Agardiffusiontest"wasofficiallyreleasedbytheInternationalOrganizationforStandardization(ISO),providingaunifiedqualitativeantibacterialperformancetestingmethodfortheglobalfootwearindustry.Thisreportsystematicallyreviewstheprojectbackground,compilationprocess,coretechnicalcontent,andindustryapplicationvalueofthestandard,withemphasisonanalyzingtheprinciples,applicablescope,andoperationalkeypointsoftheagardiffusionmethodasaqualitativeantibacterialtestingapproach.Thereportalsointroducestheprofileofthemaindraftingorganizationanditstechnicalcontributionstothestandarddevelopment.Thereportpointsoutthatthereleaseofthisstandardfillsthegapininternationalmethodologicalstandardsforantimicrobialtestinginthefootwearfield,complementsdomesticstandardssuchasGB/T38018-2019,andisofgreatsignificanceforimprovingthequalityandsafetyoffootwearproducts,promotinginternationaltradefacilitation,andguidinghigh-qualityindustrydevelopment.Lookingforward,asantimicrobialfootwearproductcategoriescontinuetoexpandandtestingtechnologieskeepinnovating,standardizationeffortswillfurtheradvancetowardquantitative,multi-straincoverage,andintelligentdirections.Keywords:Footwear;Antimicrobialactivity;Agardiffusiontest;Internationalstandard;Antibacterialperformance;Standardization一、引言1.1立项背景随着全球公共卫生事件的频发和消费者健康意识的显著提升，具有抗菌、防霉、除臭等功能特性的鞋类产品日益受到市场青睐。在鞋类产品的生产和使用过程中，鞋腔内部的温热潮湿环境极易成为微生物繁殖的温床，不仅可能导致产品本身出现霉变、老化等质量问题，更可能对穿着者的足部健康构成潜在威胁。因此，在鞋类产品的设计研发、生产制造及质量控制环节中，建立科学有效的抗微生物活性评价方法显得尤为关键。然而，在国际标准化层面，长期以来缺乏专门针对鞋类和鞋类部件抗微生物活性评价的统一定性试验方法标准。不同国家和地区、不同企业各自采用不同的检测方法，导致检测结果缺乏可比性，严重制约了抗微生物鞋类产品的国际贸易和技术交流。美国纺织品染化师协会（AATCC）制定的AATCC147标准主要针对纺织材料，虽可参考应用于鞋类材料，但并非鞋类专用方法；国内虽有GB/T38018-2019《鞋类鞋类和鞋类部件抗菌性能试验方法》等标准，但在国际互认层面仍存在壁垒。在此背景下，国际标准化组织ISO/TC216（鞋类标准化技术委员会）适时启动了ISO20681的制定工作。1.2标准基本信息ISO20681:2026《鞋类和鞋类部件评估抗微生物活性的试验方法琼脂扩散试验》由国际标准化组织（ISO）于2026年5月5日正式发布，标准状态为现行，文件语言为英语，采用电子版加密PDF格式发行。该标准归属于ISO/TC216（鞋类）技术委员会，适用于各类鞋类和鞋类部件的抗微生物活性定性评价，核心技术路线为琼脂扩散试验法。标准电子版售价为808.0元人民币，可通过ISO官方平台下载。二、标准编制的必要性分析2.1行业发展的现实需求近年来，全球抗菌鞋类市场规模持续扩大，抗菌鞋垫、抗菌袜、抗菌运动鞋等产品品类不断丰富。根据相关行业数据，抗菌功能鞋类产品在亚太地区增长尤为迅速，消费者对抗菌、防臭等功能的需求已从"可选项"逐渐转变为"必选项"。与此同时，市场上抗菌鞋类产品质量参差不齐，部分企业宣称的抗菌效果缺乏可靠数据支撑，亟需统一、权威的检测方法标准予以规范和引导。2.2标准缺失带来的挑战在国际标准缺失的情况下，各国和地区在鞋类抗菌性能检测领域各自为政：有的参照纺织品抗菌检测标准（如AATCC147、ISO20645），有的参照塑料制品抗菌检测标准（如JISZ2801），还有的参照行业自律性规范。由于不同方法的原理、菌种、培养条件等关键参数存在差异，同一产品在不同方法下的检测结果可能截然不同。这不仅使消费者无所适从，也对生产企业造成了额外的检测成本负担，更在跨境贸易中构成技术性贸易壁垒。2.3政策层面的支撑三、标准主要技术内容3.1适用范围ISO20681:2026标准适用于各类鞋类和鞋类部件，包括但不限于鞋帮、鞋垫、内衬、鞋底等部件，以及成品鞋的整体评价。该标准侧重于材料或产品表面的抗菌活性定性评价，适用于经过抗菌整理或具有天然抗菌功能的鞋类材料。3.2方法原理琼脂扩散试验（Agardiffusiontest）是一种经典的抗菌性能定性评价方法。其基本原理为：在凝固的琼脂培养基表面接种特定浓度的测试菌液，将待测样品（鞋材或鞋部件）裁剪为规定尺寸的圆形或方形试样，紧密贴附于接种后的琼脂培养基表面，在规定的温度（通常为37℃±1℃）和湿度条件下培养一定时间（通常为18~24小时）。培养结束后，观察试样周围是否出现抑菌圈（ZoneofInhibition），并通过测量抑菌圈的宽度来定性评价样品的抗菌活性。该方法的显著优势在于操作简便、直观性强、成本较低，适合作为产品抗菌性能的快速筛查手段。需要注意的是，该方法为定性方法，适用于判定材料是否具有抗菌活性，但不适用于精确量化抗菌率。对于需要精确定量评价的场合，应结合液体振荡法等定量试验方法进行综合评估。3.3测试菌种标准中规定了试验所采用的代表性微生物菌种，主要包括：-金黄色葡萄球菌（*Staphylococcusaureus*，如ATCC6538）：作为革兰氏阳性菌的代表，也是人体皮肤表面的常见条件致病菌，与鞋内异味和皮肤感染密切相关。-肺炎克雷伯氏菌（*Klebsiellapneumoniae*，如ATCC4352）：作为革兰氏阴性菌的代表，广泛存在于环境中，是衡量抗菌广谱性的重要指标菌。-白色念珠菌（*Candidaalbicans*，如ATCC10231）：作为真菌的代表，用于评估样品对真菌的抑制能力，对鞋类防霉性能评价尤为重要。标准同时允许根据产品的宣称用途选择其他菌种，但需在检测报告中明确注明实际采用的菌种及其标准编号。3.4培养基与试剂标准详细规定了试验所需培养基的配方和配制方法，包括：-营养琼脂培养基（NutrientAgar）：用于细菌的培养和抑菌圈试验；-沙氏葡萄糖琼脂培养基（SabouraudDextroseAgar）：用于真菌的培养试验；-磷酸盐缓冲液（PBS）等稀释液和洗涤液的配制要求。所有培养基和试剂的纯度、pH值、灭菌条件等技术参数均在标准中以规范性附录的形式予以明确规定，以确保不同实验室之间检测结果的可比性和可重复性。3.5样品准备标准的第6章对试验样品的准备提出了详细要求，主要包括：样品应具有代表性，取样位置应避开明显缺陷区域；规定试样尺寸通常为直径约12mm的圆形样片，每一样品需准备多个平行试样；对于多层结构的鞋类部件，应分层取样或根据需要测试复合结构；对于吸水性强的材料需特别注意试验条件的一致性，必要时可采用特定预处理措施。3.6试验步骤标准规定的试验操作流程包括以下关键步骤：1.菌液制备：将冻干菌种复苏后，接种于适宜的斜面培养基上活化，培养后制备成浓度约为1×10⁸CFU/mL的菌悬液；2.接种：用无菌棉拭子或移液器将菌悬液均匀涂布于凝固的琼脂平板表面，确保菌苔均匀覆盖；3.贴样：将制备好的试样轻压贴附于接种后的琼脂表面，确保试样与培养基紧密接触，避免气泡产生；4.培养：将平板置于恒温培养箱中，在37℃±1℃条件下培养18~24小时；5.观察测量：培养结束后，用游标卡尺测量试样周围抑菌圈的直径，计算抑菌圈宽度；6.结果判定：依据抑菌圈宽度评价样品的抗菌活性等级。3.7结果表述与试验报告标准规定，试验结果以抑菌圈的宽度（mm）进行表述，并按预设判定标准将抗菌活性分为不同等级。例如，抑菌圈宽度小于或等于1mm时判为无抗菌活性；大于1mm时判为具有抗菌活性，并按实际宽度予以分级表述。试验报告应包含以下信息：样品名称和规格、试验菌种及其标准编号、培养基配方和批号、培养条件和时间、抑菌圈测量数据、结果判定结论，以及任何偏离标准规定的试验条件和可能影响结果的因素。3.8精密度与实验室间比对为保证标准的科学性和可操作性，标准编制过程中组织了国际实验室间比对试验（InterlaboratoryComparisonTest），涉及来自欧洲、亚洲和北美多个国家的实验室。比对结果显示，该试验方法在不同实验室间具有良好的重复性和再现性，为标准的推广应用奠定了可靠的数据基础。四、主要起草单位介绍ISO20681:2026标准由国际标准化组织ISO/TC216（鞋类）技术委员会组织制定，具体起草工作由该技术委员会下属的工作组（WG）牵头实施。在标准的制定过程中，多国标准化机构和技术专家积极参与，其中在推动标准制定和关键技术研究方面发挥了重要作用，以下重点介绍之一。4.1主要起草单位概况作为ISO/TC216的积极成员和重要技术支撑单位，中国皮革制鞋研究院有限公司（以下简称"研究院"）在ISO20681:2026的制定过程中发挥了关键作用。研究院成立于1959年，是国家级皮革制鞋行业综合性科研机构，长期承担全国制鞋标准化技术委员会（SAC/TC305）秘书处工作，在鞋类标准化领域具有深厚的技术积淀和丰富的实践经验。研究院设有标准化研究所、检测中心、技术研发中心等部门，拥有国家鞋类质量检验检测中心（北京）和博士后科研工作站等平台，具备完善的鞋类物理机械性能、化学安全性能和生物安全性能检测能力。建院以来，研究院牵头和参与制定国际标准、国家标准、行业标准共计200余项，其中牵头制定的GB/T38018-2019《鞋类鞋类和鞋类部件抗菌性能试验方法》为该领域的核心基础标准，为ISO20681的立项和编制提供了重要的技术参考和国内实践基础。4.2研究院在标准制定中的主要贡献在ISO20681:2026的编制过程中，研究院主要承担了以下工作：（1）方法研究与验证。研究院基于GB/T38018-2019的实施经验和长期积累的检测数据，系统比较了琼脂扩散法、液体振荡法等不同抗菌检测方法的优缺点和适用范围，为ISO20681中试验方法的选定提供了翔实的实验依据和技术支撑。研究院独立完成了方法验证试验，积累了数百组抑菌圈测量数据，有力推动了标准技术指标的合理性论证。（2）标准文本起草。研究院派遣资深标准化专家作为项目负责人和注册专家，全程参与ISO/TC216工作组会议，负责起草标准工作草案（WD）、委员会草案（CD）和国际标准草案（DIS），并对各成员国提出的意见逐条进行处理和回复。（3）国际协调与沟通。研究院积极协调国内相关企业和检测机构的意见，在国际标准化舞台上充分反映中国制鞋行业的技术诉求和产业关切，推动形成了兼顾各方利益和不同技术路线的国际共识。（4）实验室间比对试验的组织实施。研究院联合国内外多家知名实验室开展了协同验证试验，有效验证了标准方法的再现性和重复性，为标准技术内容的最终确定提供了坚实的数据支撑。4.3其他参与单位除上述主要起草单位外，来自德国、日本、意大利、法国、美国等国家的标准化机构和行业组织也深度参与了标准的制定工作。德国标准化学会（DIN）在方法学完善和文本规范性方面提供了专业支持；日本制品安全协会在菌种选择和培养条件优化方面贡献了丰富的实验数据。此外，法国鞋类技术中心（CTC）、意大利制鞋工业联合会（ANCI）等机构也在各自专业领域提供了技术支持，共同保障了标准的科学性、兼容性和可操作性。五、标准与国内外相关标准的关系5.1与国际标准化组织现有标准的关系ISO20681:2026与ISO20645:2004《纺织材料抗菌活性的测定琼脂扩散板试验》在方法原理上具有相通性，但二者的适用对象和技术细节存在明显差异。ISO20645主要针对纺织材料，其样品厚度、尺寸和培养基配方等参数对鞋类材料（尤其是较厚的鞋底材料和复合材料）不完全适用。ISO20681在样品准备、培养基选择和结果判定等方面进行了针对性调整和优化，更贴合鞋类产品的材料特性和检测需求。5.2与国内标准的关系我国现行标准GB/T38018-2019《鞋类鞋类和鞋类部件抗菌性能试验方法》是鞋类抗菌性能评价的重要依据。该标准同时规定了琼脂扩散法和液体振荡法两种试验方法，其中琼脂扩散法的技术路线与ISO20681总体一致，但在菌液浓度、培养时间、样品尺寸和结果判定等细节方面存在部分差异。ISO20681:2026的发布为国内标准的后续修订提供了重要的国际参考。全国制鞋标准化技术委员会（SAC/TC305）已着手评估在GB/T38018-2019修订时与ISO20681保持技术协调的可行性，旨在最大程度减少国内外标准差异带来的重复检测负担，促进检测结果的多边互认。六、标准实施的意义与展望6.1实施意义ISO20681:2026标准的发布与实施具有多方面的重要意义：（1）填补国际标准空白。该标准是ISO在鞋类抗微生物活性检测领域的首项定性试验方法标准，填补了国际标准在该领域的方法空白，为全球鞋类行业提供了统一的技术依据。（2）促进国际贸易便利化。统一的检测方法标准有助于消除各成员国之间的技术性贸易壁垒，降低重复检测成本，促进抗微生物鞋类产品的跨境流通。（3）保护消费者健康安全。通过科学规范的抗菌性能