CN119403959A 目标分子的还原方法、还原装置及电极 （松下知识产权经营株式会社）

2024.12.13PCT/JP2023/0239392023.06.28WO2024/005059JA2024.01.04态在氧化型及还原型之间发生变化且处于还原子中的二硫键进行还原的第1工序；和通过对在第1工序中被二硫键氧化而状态变化成氧化型的硫氧还蛋白的状态变化成还原型的第2工序，其2通过状态在氧化型及还原型之间发生变化且处于所述还原型的硫氧还蛋通过对在所述第1工序中被所述二硫键氧化而状态变化成所述氧化型的所述硫氧还蛋所述第2工序不经由所述电子传递体而从所述电极对所述氧化型的所述硫氧还蛋白供7.一种还原装置，其是将存在于反应体系在所述电极的表面，直接或经由接头而固定有状态在氧化8.一种电极，其是将存在于反应体系中的目标分子中的3[0002]已知通过将酶固定于电极而能够将电极与酶之间的电子的传递利用于各种用[0007]专利文献1中记载的酶电极能够作为观测从酶到电极的电子移动并测量电流值的4[0028]为了通过使用从电极供给的电子将目标分子所具有的二硫键还原而切断等目标[0029]硫氧还蛋白还原酶具有将氧化型的硫氧还蛋白使用电子进行还原而变化成还原原(产生过敏反应的原因物质)的二硫键切断这样的用途。如果能够将过敏原的二硫键切5[0036]本公开的第1方案涉及的目标分子的还原方法包含以下工序：通过状态在氧化型分子的还原方法中，上述第1工序及上述第2工序在上述反应体系大于pH8.5的pH条件下实[0039]由此，能够在反应体系大于pH8.5的pH6白之间的电子传输的电子传递体，上述第2工序不经由上述电子传递体而从上述电极对上[0048]此外，本公开的第7方案涉及的还原装置是将存在于反应体系中的目标分子中的[0050]此外，本公开的第8方案涉及的电极是将存在于反应体系中的目标分子中的二硫7[0063]切断装置100通过对电极施加电压来进行电极与硫氧还蛋白之间的电子传输。例100通过在包含目标分子的试样(例如样品溶液)为非流动状态下对电极施加电压，从而在8[0074]固定于电极的表面(所谓的阴极基板13)的硫氧还蛋白是将目标分子还原的蛋白化的一部分如接头那样起作用的情况也包含在不经由阴极电极1及参比电极2的第1空间与配置有对电极3的第2空间经由连接部4a而连接。在连[0077]控制部30进行用于电源20的电压施加及控制搅拌部40的马达(未图示)的动作的[0079]在硫氧还蛋白固定电极的制造方法中，将硫氧还蛋白的固定用接头固定于电极[0084]目标分子所具有的二硫键的切断方法通过使用具备作为阴极电极1的硫氧还蛋白固定电极、作为对电极3的阳极电极和参比电极2的三电极方式的电压施加部10将试样9中所含的目标分子还原，从而将二硫键切断(S101)。步骤S101是第1工序的一个例子。步骤9可以按照阴极电极1相对于参比电极2的电位成为硫氧还蛋白的氧化电位的[0091]对于硫氧还蛋白固定电极的制作，通过在金基板上添加将硫氧还蛋白溶解于了将所制作的硫氧还蛋白固定电极作为工作电极、将Pt(铂)电极作为对电极、将Ag/AgCl一边使搅拌子8以规定的旋转速度(rpm)旋转，一边对目标分子溶液施加后述的规定的电通过图像解析来算出将其设定为100％的情况的相对的二[0102]将实施例1的验证结果示于图6中。图6是表示实施例1的验证结果的图表。在图6在能够维持约pH10的体系中进行二硫键的切断的情况与在能够维持约pH8以下的体系中进行二硫键的切断的情况进行比较来说明。图7是表示在能够维持pH10的体系中进行二硫键的体系中进行二硫键的切断时的二硫键的相对切断量的经时变化的图表。需要说明的是，理成反应体系的pH与二硫键的相对切断量的关合而构筑的另外的实施方案也包含在本公开的