CN119463265A 一种用于dna合成的聚合物固定相载体及其制备方法与应用 （天津中合基因科技有限公司）

一种用于DNA合成的聚合物固定相载体及其本发明公开了一种用于DNA合成的聚合物固通过第二官能团与修饰功能性基团的聚合物基进行生物DNA合成反应，并且具有较高的收率与2所述聚合物基底表面修饰有第一官能团，所述第一官能团与聚合物基底反应共价结所述聚合物基底表面还修饰有功能性基团，所述功能性基团为可以发生所述聚合物固定相载体还包括通过所述功能性基团偶联至所述聚合物基底的引发链；所述引发链通过其含有的第二官能团与修饰功能性基团的聚合物基底表面进3.根据权利要求1或2所述的聚合物固定相载体6.根据权利要求1或2所述的聚合物固定相载7.权利要求1_6中任一项所述的聚合物固定相34一种用于DNA合成的聚合物固定相载体及其制备要冲洗掉上一步的反应溶液保证接下来的反应进行，因此需要固定相载体表面偶联引发所述聚合物固定相载体还包括通过所述功能性基团偶联至所述聚合物基底的引发链；所述引发链通过其含有的第二官能团与修饰功能性基团的聚合物基底表面进行偶5[0013]需要说明的是荧光定性是通过将带有荧光的材料放在荧光显微镜下观察荧光强[0021]更进一步地，所述修饰功能性基团是通过带有叠氮基团的NHS酯和第一官能团发[0025]所述表面修饰第一官能团的聚合物基底上的第一官能团、带有叠氮基团的NHS酯6[0028]更进一步地，所述酰胺化缩合反应是羧酸类高分子化合物和氨基化合物在溶剂、[0034]更进一步地，所述修饰功能性基团是通过带有叠氮基团的NHS酯和第一官能团发[0036]所述表面修饰第一官能团的聚合物基底上的第一官能团、带有叠氮基团的NHS酯7[0050]所述点击反应包括溶剂，所述溶剂可为水；所述点击反应的反应温度可为25_60[0060]图1为本发明实施例1中制备以聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA)为基底的固定相载体的8选择分子量为15000的PMMA制备3mm*3mm*1mm的树脂片，用200μL无水乙醇清洗将修饰第一官能团氨基的PMMA树脂片浸泡在100μL的1.5ng/mL的NHS_PEG_N3[0079]图2为PMMA树脂片杂交荧光互补链后的荧光图，从荧光图可以看出引发链成功接选择分子量为15000的PAA制备3mm*3mm*1mm的树脂片，称取20mgEDC和7.4mgNHS，使用DMSO或MES定容至1mL，将PAA树脂片浸泡在溶液中，加入2ng/mL的NH2_PEG_N39选择分子量为50000的聚氯乙烯制备3mm*3mm*1mm的树脂片，称取无水碳酸钠玻璃烧瓶中在50℃下反应48小时。反应结束后用水清洗聚氯乙烯树脂片三次，将聚氯乙烯树脂片浸泡在水中24小时后放入真空干燥箱中进行干燥，得到叠氮修饰的聚氯乙烯树脂片。[0087]图6为聚氯乙烯树脂片杂交荧光互补链后的荧光图，从荧光图可以看出引发链成选择分子量为8000的聚乙烯醇制备3mm*3mm*1mm的树脂片，称取三乙胺（5μL，[0091]图8为聚乙烯醇树脂片杂交荧光互补链后的荧光图，从荧光图可以看出引发链成利用上述偶联上引发链的聚合物固定相载体在DNA合成仪上不断重复进行DNA合轮按照GTTGGTAACATGGGTTTGTAGGTGCCATAGTGGTGTATTGGACCGTTCAGGCCTATATCGTCATTGAG反应2小时，将反应后的玻璃片用水冲洗三次，并浸泡在水中2h后放到真空干燥箱中干燥[0105]如图12所示，合成与实施例3固定相载体相同的序列，使用玻璃片作为固定相载