色谱分析技术标准化实验指引课件

GUIDE色谱分析技术标准化实验指引前处理·校准·操作·质控·标准2026年内容导览01标准筑基色谱标准化实验的认知框架与SOP体系02前处理规范样品与试剂准备中的关键控制点03仪器校准仪器状态核查与校准的量化标准04操作流程液相与气相色谱的标准化操作要点05数据质控数据分析、定量验证与异常处理06标准演进国家标准体系与未来趋势CHAPTER标准筑基标准化是数据可信的基石色谱分离原理、SOP体系与标准化实验四大支柱01色谱分离原理与分类利用不同物质在固定相与流动相之间分配系数的差异，实现混合物的逐一分离GC气相色谱适用对象挥发性物质分离依据固定相与流动相间分配系数差异HPLC液相色谱适用对象非挥发性或大分子化合物分离依据固定相与流动相间分配系数差异标准化SOP体系架构完整色谱分析SOP文件涵盖23个章节，覆盖从目的、适用范围到培训与文件管理的全周期核心环节7项环境要求安全防护仪器设备准备色谱柱准备试剂溶液配制样品前处理标准品准备前置准备流程环节6项系统开机检查仪器参数设置系统平衡校准曲线建立系统适用性检查分析操作流程分析执行收尾环节5项数据采集结果计算与判定异常情况处理记录填写培训管理结果与归档标准化实验四大支柱实验前准备Pillar01明确实验目的，选择合适色谱方法与仪器，备足试剂样品，确保环境洁净安全。样品处理Pillar02对复杂样品进行预处理，如去杂、纯化、提取，避免污染与交叉污染。色谱条件选择与优化Pillar03根据样品性质选定色谱柱与流动相，通过反复实验调整参数改善分离度。数据分析与处理Pillar04记录图谱，利用峰面积法或内标法定量，排除异常数据，得出结论。CHAPTER前处理规范前处理决定成败上限样品净化、试剂配制与标准品管理的规范要点02样品前处理通用规范前处理是最易引入误差的环节，需根据样品性质设计提取、净化、浓缩流程前处理是误差的主要来源，全流程规范化操作是保障数据可靠的前提。实验条件一致性全程保持实验条件一致性，减少误差和偏差，确保结果可比。回收率试验要求

80%～120%

为合格，依行业标准调整。平行样相对标准偏差平行样相对标准偏差（RSD）需≤5%，复杂样品可放宽至10%。空白对照样同批次处理空白对照样，验证前处理过程无污染。液态固态气态分型处理液体样品澄清样品直接经

0.22μm

滤膜过滤复杂基质需萃取或稀释，避免柱过载固体样品溶解处理粉碎后选择兼容溶剂溶解过滤过滤后按液体流程处理挥发性组分可采用顶空进样气体样品采集用采样袋或吸附管采集进样方式可通过阀进样、顶空进样或直接注射极性羟基化合物可做衍生化处理，增强挥发性便于气相分析流动相三必须与缓冲盐三忌流动相三必须，缓冲盐三忌流动相三必须必须使用色谱纯溶剂和超纯水，严禁分析纯与普通纯水必须经0.45μm或0.22μm滤膜过滤，去除颗粒杂质必须超声脱气，避免气泡引发压力波动与基线跳动忌缓冲盐三忌忌存不冲用后冲洗30分钟以上再切换有机相忌现配不用盐溶液放置过久易生菌、沉淀忌直接混合需梯度过渡，防止盐结晶堵柱试剂与标准品管理试剂纯度

HPLC级纯度需满足分析要求，使用

HPLC级

溶剂。配制后标注

配制人、日期、有效期。标准品溯源

国家有证标准物质标准品需具备

溯源性，优先使用国家有证标准物质。使用前核查

有效期与储存条件。现配现用

稳定性验证混合标准溶液应

现配现用。或按

稳定性验证结果确定有效期。双人复核

关键参数记录配制过程采用

双人复核。记录

溶剂批号、移液体积

等关键参数。存放要求

避光冷藏试剂与样品存放遵循

避光、冷藏

要求。不超方法规定的

稳定期。CHAPTER仪器校准量化阈值是判定标尺仪器状态核查、校准流程与周期管理03仪器状态量化核查量化阈值是判定标尺以可量化指标替代主观判断，为四大系统设定明确合格线与动作触发值，确保仪器状态核查客观、可复现。01系统一色谱柱标准样测试分离度与理论塔板数分离度低于1.5须冲洗或更换02系统二柱温箱温度波动需控制在±0.5℃以内03系统三进样系统衬管无残留、石英棉无脱落多次进样标准品验证重复性

RSD≤2%04系统四检测系统基线噪声≤方法检出限的1/2，漂移≤2%每小时空白溶剂运行1小时验证环境与气源质控环境控制温度

23±2℃，相对湿度

50%±10%，避免强光、震动、电磁干扰仪器须可靠接地，放置于防震平台，减少基线噪声与漂移气源管理载气纯度需≥99.999%，配套水、氧、烃三合一净化捕集阱，定期更换或再生定期全流程检漏，用皂液或电子检漏仪排查减压阀、管路接头泄漏气路管路选用惰性管材，减少吸附与杂质释放校准曲线建立与验证采用外标法建立线性校准曲线，相关系数要求R²≥0.999标准物质配制使用有证标准物质，在有效期内用洁净匹配溶剂配制，做好梯度校准。5点校准至少准备5个不同浓度标准物质进行多点校准。空白测试每日做空白基线与溶剂空白测试，排查基线漂移、鬼峰与残留。单点核查定期核查单点中间浓度标液，验证曲线有效性，防止曲线漂移。校准流程与实施周期1前期准备2系统设置3进样校准4数据处理5质量控制6后期维护校准后复核与记录校准后复核：需重新注入标准样复核，偏差超允许范围须重新调整并再次校准记录要求：校准结果须完整记录并生成

校准报告周期管理与防漂移周期建议：离子色谱建议

每3个月

全面校准一次，高频使用可缩短周期参数校验：定期校验流量、压力、温度参数，防止系统漂移CHAPTER操作流程规范操作延长仪器寿命HPLC与GC的开机、进样、关机全流程要点04液相开机与系统平衡开机与平衡四步流程1低流速启动初次使用或更换流动相时，先以

0.2～0.5mL/min

低流速启动，确认无漏液后升至目标流速2排空气泡启动泵运行约

5分钟

排空系统气泡，完成后关闭排气阀3走平基线以固定流速运行流动相走基线，直至

基线平稳

再开始进样4清洗柱残留每次进样前留出

5～10分钟

清洗色谱柱残留，确认基线稳定后进行下一次注射开机原则开机遵循

先外设后主机、先辅助后核心：检测器、柱温箱自检完成后再开泵与自动进样器气相开机预热与点火开机顺序：载气→燃气→升温程序

依次完成载气流量调至方法要求›氢气与空气再开启燃气›升温程序最后设置方法温度温度设定依方法调整进样口250℃FID检测器280℃TCD检测器150℃FID点火要点点火条件检测器温度

≥150℃

后按点火键，基线突降即点火成功失败处理增大氢气流量至

50mL/min

重新点火，成功后调回原流量气路检查钢瓶压力需

≥0.4MPa，管路肥皂水检漏，无气泡为合格进样操作规范过滤与稀释2项滤膜过滤液体样品经

0.22μm

滤膜过滤稀释防超载高沸点样品稀释至

1%～5%

避免柱超载润洗与插入2项提前润洗进样针需提前润洗

3次垂直插入垂直插入进样口，深度保持一致匀速推注1项匀速同步手动进样推注速度需匀速同步，避免峰形拖尾体积控制2项微量进样进样体积≤1μL（微量进样器）固体预处理固体样品需超声提取后过滤防残留1项玻璃内衬管挥发性有机物分析需在进样口加装玻璃内衬管，防止样品残留色谱柱维护与老化维护方法页，给出色谱柱老化程序与保存规范气相柱老化程序适用场景新柱或久置柱，去除残留溶剂与低沸点杂质初始升温初始

50℃

保持

5分钟程序升温以

5℃/min

升至低于最高使用温度20℃，保持

2～4小时载气保护流量保持

1～3mL/min，全程通载气保护，断开检测器防污染安装规范安装遵循柱体箭头流向，禁止反接，反接会致柱效快速下降保存规范长期不用时用纯甲醇或乙腈冲洗，两端密封保存，防止柱体干裂污染1234关机流程与日常保养液相关机分析结束后先用高比例水相冲洗

30分钟以上

置换盐分，再切有机相保存气相关机柱温降至

50℃

以下后，再关闭检测器与进样口，避免高温氧化通用关机顺序遵循“检测器→泵→软件”，禁止直接断电损伤硬件载气缓慢降压至

0.05MPa，防止钢瓶内残留空气进入系统日常保养每运行

1000次

样品后，用纯溶剂反冲色谱柱；隔垫、衬管定期更换防止鬼峰CHAPTER数据质控数据可信源于全程质控方法验证、定量计算、质控样与异常处理05数据采集与积分参数积分参数阈值≥3倍噪声峰宽匹配目标峰半高峰宽基线排除斜率干扰峰宽匹配斜率排除阈值≥3倍采集频率UV检测器采样频率≥20Hz峰形保障无失真捕获UV检测器≥20Hz采集监控与数据管理采集监控：实时观察基线平稳性与峰形对称性异常处理：立即记录并暂停采集数据命名：样品编号-检测日期-方法代码数据保存：不可修改路径+离线备份保留期限：通常3年实时监控唯一命名离线备份3年保留方法验证关键指标方法验证以量化阈值界定合规边界，四项核心指标缺一不可。≥1.5分离度目标峰与相邻峰分离度≥1.5阈值界定合规边界，低于此值判定不达标S/N≥3灵敏度信噪比

S/N≥3

为检出限，S/N≥10

为定量限检出限与定量限双阈值分级判定RSD≤3%重复性6次

平行进样，峰面积

RSD≤3%多次进样验证峰面积一致性r≥0.999线性相关系数

r≥0.999验证数据需归档，作为合规性判定依据质控样与加标回收每批样品需带空白溶剂监控基线干扰、质控样品验证方法稳定性质控样验证空白溶剂监控基线干扰质控样品验证方法稳定性允许范围回收率

90%～110%

方可继续分析加标回收核查加标回收试验核查回收率常规范围70%～130%执行要求按方法要求执行平行样平行样前处理评估前处理误差控制峰面积RSD符合方法要求基质匹配基质匹配校准消除基质干扰必要时采用内标法定量异常情况排查处理高频异常现象与排查方向对照异常现象排查方向基线频繁波动载气纯度不足、检测器未通载气、气路泄漏压力异常管路堵塞、密封垫磨损、流路不通峰形拖尾或分叉色谱柱污染、进样推注过快、衬管残留鬼峰隔垫流失、进样口污染、流动相杂质保留时间漂移柱温波动、流动相比例变化、气泡干扰CHAPTER标准演进标准引领技术升级标准色谱柱国标、2026新标准与未来趋势06标准色谱柱国标GB/T30433标准柱定位：计量器具，非普通耗材标准柱定位：计量器具，非普通耗材2项GB/T30433-2021将标准柱定义为计量器具，具溯源性与法定意义仪器性能合格判定的基准摆脱“普通耗材”定位标准依据《液相色谱仪测试用标准色谱柱》2021版核心更新3项新增1.8μm粒径色谱柱规定适应超高效液相色谱普及需求细化测定条件柱效与对称因子，提高检定可操作性与国际接轨与USP、EP、JP理念相通，配套JJG7052026年新标准动态2026年色谱标准体系持续升级，多项新国标发布实施20项2026上半年发布气相色谱新标准4大覆盖领域石化·环境·食品·材料GB/T11060.14-2026离子色谱法测定天然气中硫化氢发布2026-08-28实施2027-03-01GB/T14550-2026土壤有机氯农药气相色谱及串联质谱法检出限

0.002mg/kg定量限

0.005mg/kgGB/T23739-2026土壤有效态铅镉测定新增

ICP-MS

方法替代旧版原子吸收法HJ34-2026固定污染源废气氯乙烯与丙烯醛气袋采样/气相色谱法实施2026-08-01色谱标准化趋势展望技术趋势向自动化、痕量化、专用