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文档简介

免疫学检验专题超敏反应性疾病的免疫学检验概念·分型·检验·解读2026年课程导览01总论与分类概念界定与四型框架建立02I型超敏反应IgE介导机制与速发型检验03II型与III型抗体介导与免疫复合物检验04IV型超敏反应T细胞介导与皮试判读05临床解读结果判读要点与前沿共识01总论与分类四型分类,纲举目张从概念到分型,搭建知识骨架超敏反应的概念与核心特征已致敏机体再次接触相同抗原后发生的异常免疫应答定义已致敏机体再次接受相同抗原刺激,所引起的以生理功能紊乱或组织损伤为主的异常适应性免疫应答;别称变态反应、过敏反应。发生两条件必要条件特应性体质由先天遗传决定抗原接触再次接受相同抗原刺激核心特征特异性记忆性遵循免疫应答普遍规律按适应性免疫的一般规律发生具特异性与记忆性应答具有特异性与记忆性须再次接触相同抗原必须再次接触相同抗原方能触发Gell-Coombs四型分类1963年由Gell与Coombs按发生速度、机制与临床特点划分分型别称主要介导物典型疾病I型速发型IgE过敏性鼻炎、哮喘、荨麻疹II型细胞毒型IgG、IgM输血反应、新生儿溶血症III型免疫复合物型IgG、IgM、IgA血清病、系统性红斑狼疮IV型迟发型T细胞接触性皮炎、移植排斥反应1963年由Gell与Coombs按发生速度、机制与临床特点划分02I型超敏反应速发速退,IgE主导机制与检验并行,掌握速发型诊断I型超敏反应的三阶段机制速发型反应的本质,是IgE与肥大细胞的两次相遇反应特点发作

迅速、反应

强烈、消退

较快,一般不破坏组织细胞,有明显个体差异1阶段01致敏阶段变应原诱导B细胞产生特异性

IgEIgE以Fc段结合肥大细胞、嗜碱性粒细胞表面的高亲和力

FcεR2阶段02激发阶段相同变应原再次进入机体与已结合在细胞表面的IgE发生

桥联结合3阶段03效应阶段靶细胞

脱颗粒

并合成新介质作用于效应组织与器官,引起局部或全身过敏反应参与I型反应的关键要素因变应原与抗体变应原植物花粉、屋尘、尘螨、食物、药物、异种血清等,种类繁多抗体以IgE为主,主要由鼻咽部、扁桃体、气管与胃肠道黏膜下固有层淋巴组织中的B细胞产生效效应细胞核心肥大细胞与嗜碱性粒细胞为核心效应细胞,表面有大量FcεR,胞浆内含嗜碱性颗粒调节嗜酸性粒细胞对I型超敏反应起负反馈调节作用介生物活性介质组胺使毛细血管扩张、通透性增强,作用短暂白三烯对支气管平滑肌产生强烈而持久的收缩PAF血小板活化因子,参与炎症反应趋化嗜酸性粒细胞趋化因子,趋化嗜酸性粒细胞I型常见疾病谱反应发生在哪个器官,症状就出现在哪里I型超敏反应依靶器官不同,呈现四大类常见疾病谱:全身性、呼吸道、消化道与皮肤过敏反应全身性过敏反应药物过敏性休克以青霉素最为常见血清过敏性休克常见于破伤风抗毒素与白喉抗毒素治疗或紧急预防时呼吸道过敏反应吸入花粉、尘螨、真菌孢子、动物毛屑等引起表现为过敏性鼻炎与过敏性哮喘消化道过敏反应进食鱼、虾、蟹、蛋、乳等食物引起表现为恶心、呕吐、腹痛、腹泻等过敏性胃肠炎症状皮肤试验——体内检测主方法皮内试验敏感性更优,点刺试验假阳性更少01皮内试验注射量0.01至0.03毫升速发型15至30分钟

内观察迟发型48至72小时

内观察02点刺试验抗原与对照液分别滴于皮肤针尖透过液滴轻挑,刺破皮肤而不出血为度1分钟后拭去抗原液敏感性稍低但假阳性较少,皮试液浓度需比皮内试验高

10至100倍禁禁忌皮肤患湿疹、感染、皮炎或外伤用药正在或近日服用免疫抑制剂、抗组胺药物因假阴性常见原因皮试液浓度过低或失效人群老年人或过敏性休克、哮喘大发作之后用药皮试前用过抗组胺药操作注射过深或注入量过少血清IgE检测IgE仅占Ig总量的0.002%,检测必须依靠高灵敏方法检测方法双轨并行:总IgE

筛查过敏体质,特异性IgE

锁定致敏原方法不断升级灵敏度持续提升总IgE测定放射免疫单项扩散法双抗体夹心酶标记法反向间接血凝法免疫比浊法化学发光法总IgE反映过敏体质倾向特异性IgE测定用纯化变应原代替抗IgE进行检测放射性过敏原吸附试验ELISA免疫印迹法ImmunoCAP过敏原检测系统临床定位:总IgE反映过敏体质倾向特异性IgE定位具体致敏原特异性IgE分级判读分级越高,致敏风险越大,越需严格规避级别浓度(kU/L)判读建议0级阴性低于

0.35阴性,提示不致敏1级低敏0.35

至

0.70低敏,可观察2级中敏0.71

至

3.50中敏,需避免接触3级及以上高敏3.51

及以上高敏,建议治疗检测样本为外周血,无需空腹,但需避免剧烈运动与饮酒。激发试验与筛查策略模拟自然发病条件,用少量超敏原诱发一次较轻发作以确定超敏原激发试验通过吸入或接触少量刺激物,诱发可控的较轻反应,以确定致敏原与机体敏感性。两者均为阴性,基本可排除过敏激发试验两类方法3项非特异性激发采用组胺等刺激物雾化吸入,观察患者对I型超敏反应的敏感性特异性激发采用尘螨等抗原做试验,对明确超敏原有一定价值适用范围用于I型与IV型超敏反应性疾病的检查筛查工具与组合策略2项Phadiatop常见吸入性过敏原花粉、尘螨、动物皮屑、霉菌等常见吸入性过敏原阳性检出率

40%灵敏度

91%特异性

93%食物混合组fx5常见食物过敏原鸡蛋白、牛奶、小麦、鱼、花生、大豆与Phadiatop联合使用03II型与III型抗体与复合物,各显其道两类抗体介导反应,检验路径分明II型超敏反应机制与疾病抗体直接锁定靶细胞表面抗原,触发溶解与吞噬补体溶解经典途径激活补体,形成膜攻击单位引起细胞溶解炎症招募补体活化产物C3a、C5a招募并活化中性粒细胞与单核细胞调理吞噬IgG的Fc段与巨噬细胞Fc受体结合,发挥调理吞噬作用ADCCNK细胞与中性粒细胞活化后,非吞噬性杀伤靶细胞常见疾病输血反应新生儿溶血症(Rh血型不符)自身免疫性溶血性贫血药物过敏性血细胞减少症II型核心检验方法抗球蛋白试验(Coombs试验)直接法检测红细胞表面已结合抗体,间接法检测血清中游离不完全抗体。流式细胞术荧光素标记识别并量化细胞表面或内部抗原抗体复合物,灵敏度与特异性高。ELISA已知抗原固定于固相载体,加待测样品与酶标二抗显色,检测血清特异性

IgG

或

IgM

抗体。补体依赖的细胞毒性试验测定抗体与补体共同作用下的靶细胞杀伤能力,以乳酸脱氢酶等指标评估损伤程度。淋巴细胞毒交叉配型试验以供者淋巴细胞为靶细胞加入受者血清,用于器官移植前检测供受者

HLA

相容性。III型超敏反应机制与疾病中等大小可溶性免疫复合物沉积于血管基底膜,激活补体引发炎症可溶性抗原与抗体形成中等大小免疫复合物,沉积于血管基底膜,激活补体引发炎症损伤机制与参与成分机制可溶性抗原与抗体在循环中形成中等大小免疫复合物,沉积于局部或全身多处毛细血管基底膜参与抗体IgG、IgM参与细胞中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、肥大细胞、血小板病理表现与疾病病理特征以充血水肿、局部坏死和中性粒细胞浸润为主的炎症反应与组织损伤常见疾病血清病、系统性红斑狼疮、链球菌感染后肾小球肾炎III型检验与免疫复合物检测明确复合物在哪里,就明确了该查什么从循环免疫复合物到组织固定免疫复合物,再以自身抗体筛查与辅助指标全面评估循环免疫复合物检测2项检验六法聚乙二醇沉淀法、补体结合试验、C1q固相试验、免疫比浊法、流式细胞术、ELISA参考值散射比浊法低于300微克每升组织固定免疫复合物检测3项标本处理从适当病理部位取组织标本做冰冻切片染色标记用荧光标记抗人IgG或抗人C3染色阳性判读荧光显微镜下见相应部位显示荧光为阳性II型与III型检验路径对比抗体相同,靶点不同,检验路径由此分野核心对比·机制与检测对比项II型超敏反应III型超敏反应致病抗体IgG、IgMIgG、IgM损伤机制抗体与细胞表面抗原结合致细胞溶解免疫复合物沉积激活补体致炎症核心检测Coombs试验、流式细胞术、ELISA循环免疫复合物测定、免疫荧光染色主要受累器官对比项II型超敏反应III型超敏反应主要受累红细胞、白细胞、血小板血管壁、肾小球基底膜、关节滑膜II型细胞表面抗原结合致细胞溶解III型免疫复合物沉积激活补体致炎症04IV型超敏反应迟发反应,细胞为要T细胞主导,皮试判读是关键IV型超敏反应机制与疾病无抗体参与,由致敏T淋巴细胞独立完成的迟发反应细胞免疫介导的迟发型超敏反应:单个核细胞浸润为核心病变机制特征3项细胞介导由致敏T淋巴细胞介导,抗原刺激后引发以单个核细胞浸润为主的炎症反应时间高峰接触抗原后24至72小时达高峰,故称迟发型超敏反应无抗体参与全程无抗体参与,属细胞免疫应答范畴诊疾病与诊断常见疾病接触性皮炎、结核菌素试验阳性反应、移植排斥反应辅助诊断淋巴细胞增殖试验可辅助IV型超敏反应的诊断斑贴试验检测IV型反应把抗原留在皮肤上,等待迟发反应慢慢浮现斑贴试验是检测

IV型超敏反应

的主要体内试验方法,将试验物贴敷于皮肤观察迟发反应原理与定位试验方式将试验物贴敷于皮肤,观察迟发型超敏反应试验地位检测IV型超敏反应的主要体内试验方法判读时间节点第一次判读48小时打开斑试器,间隔30分钟待压痕消失后判定结果第二次判读第3天或第4天光过敏情形在斑贴试验基础上给予紫外线照射,操作过程相似结核菌素试验的原理与方法PPD试验是IV型超敏反应最经典的临床应用范例结核菌素试验基于IV型超敏反应原理,以菌素致敏T细胞激活为核心原理与试剂2项原理结核分枝杆菌初次感染后,机体产生特异性致敏T淋巴细胞;再次接触结核菌素时,致敏T细胞释放干扰素、肿瘤坏死因子等细胞因子,引起局部单核细胞与淋巴细胞浸润试剂结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)法方法与判读方法常规消毒后于前臂屈侧皮内注射

0.1毫升,局部形成皮丘,48至72小时

观察结果判读要点测量

硬结直径,以最长径与垂直径均值判断,不可单独以红晕为标准假阴性风险提示免疫抑制(糖皮质激素治疗、HIV感染)、重症结核病、疫苗接种后

4至8周内结核菌素试验结果判读阳性提示感染,但不等于患病;强阳性需高度警惕活动性结核由上表可知,PPD分级与临床提示存在明确的对应关系。结果硬结直径临床提示阴性小于5毫米未感染或免疫功能缺陷弱阳性5至9毫米曾感染结核或卡介苗接种成功阳性10至19毫米提示结核分枝杆菌感染强阳性20毫米及以上或伴水疱坏死高度提示活动性结核,需进一步检查卡介苗接种依据:阴性者为接种对象,阳性者无须再接种免疫效果评估:接种卡介苗3个月后试验阳性,提示接种成功05临床解读读懂报告,精准诊疗从数据到决策,检验服务临床严重过敏反应发病率新趋势严重过敏反应发病率十年上升2.8倍

,儿童负担尤为突出儿童年发病率约为成人的

2.7倍,过敏性疾病负担正在快速加重总IgE的临床意义总IgE是过敏风险的预警指标,而非确诊依据升高提示过敏风险增高,为查

特异性IgE

提供依据解读需结合年龄参考区间升高见于4类I型变态反应性疾病:特发性哮喘、皮炎、荨麻疹、过敏性皮炎寄生虫感染自身免疫与肿瘤:急性或慢性肝炎、系统性红斑狼疮、嗜酸性粒细胞增多症、霍奇金病、真菌感染IgE型骨髓瘤降低见于4类原发性无丙球蛋白血症

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