人白介素6(IL-6)试剂盒的操作说明书

1、人白细胞介素-6试剂盒操作说明人白细胞介素-6试剂盒操作说明这个工具包仅用于研究。检测范围：96T0-8纳克/升使用目的：该试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样品中白细胞介素6的含量。实验原理该试剂盒采用双抗体夹心法测定样品中人白细胞介素6的水平。微孔板包被有纯化的人白细胞介素6(IL-6)抗体以制备固相抗体。将白细胞介素6(IL6)依次加入包被有单克隆抗体的微孔中，然后与辣根过氧化物酶标记的IL6抗体结合，形成抗体-抗原-酶标记的抗体复合物。彻底清洗后，加入基质TMB进行显色。TMB在辣根过氧化物酶的催化下变成蓝色，在酸的作用下变成黄色。颜色的深度与样品中的白细胞介素-6呈正相关。用酶标仪

2、在450纳米波长下测定吸光度(吸光度值)，用标准曲线计算样品中人白细胞介素6(IL-6)的浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml1瓶7停液6ml1瓶2酶标试剂6毫升1瓶8标准(16纳克/升)0.5毫升1瓶3酶标涂布板12孔8 9标准稀释液1.5ml1瓶4样品稀释剂6ml1瓶10说明15显影液6毫升，1瓶，11个密封板，2片6显影剂b液体6ml1/瓶12密封袋1样本要求1.样品收集后应尽快提取，提取应根据相关文件进行。提取后应尽快进行实验。如果不能立即进行试验，可将样品储存在-20下，但应避免反复冻融。2.含有NaN3的样品无法检测，因为NaN3抑制辣根过氧化物酶(HRP)活性。操作步骤1.

3、标准物质的稀释：该试剂盒提供一种原始标准物质。用户可以根据下图将其稀释在小试管中。将150l标准物质稀释液添加到150l 8 ng/L5标准物质的原始标准物质中4ng/L4标准150l标准5添加150l标准稀释剂2ng/L3标准150l标准4添加150l标准稀释剂将150l标准稀释液添加到150l 1 ng/L2标准的3号标准中0.5纳克/150微升标准L1，将150微升标准稀释剂加入标准22.样品添加：设置空白孔(空白对照孔不含样品和酶标试剂，其他步骤相同)、标准孔和待测样品孔。将50l标准物质准确加入酶标包被板，将40l样品稀释液加入待测样品孔，然后加入10l待测样品(样品最终稀释5倍)。

4、添加样品将样品添加到酶标板孔的底部，尽量不要接触孔壁，轻轻摇动并混合。3.孵育：用密封膜密封平板，然后在37孵育30分钟。4.配液：用20倍蒸馏水稀释20倍浓缩洗涤液备用5.清洗：小心地去除密封膜，丢弃液体，甩干，用清洗液填充每个孔，静置30秒后丢弃，重复5次，拍干。6.酶添加：除空白孔外，每孔添加50l酶标试剂。7.孵化：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：先加入50l显色剂，再加入B50l显色剂，轻轻摇匀，在37避光15分钟显色。10.终止：向每个孔中加入50l终止溶液以终止反应(此时蓝色变成黄色)。11.测定：依次测量空白空调在0和450纳米波长下各孔的吸光度(外径值)。应在添加终止

5、液后15分钟内进行测定。人白细胞介素-6试剂盒注意事项1.试剂盒应在使用前从冷藏环境中取出，并在室温下平衡15-30分钟。如果酶标涂层板在打开后没有用完，应将其放入密封袋中储存。2.浓缩的洗涤溶液中可能会有结晶和沉淀，可以在水浴中加热以在稀释时有助于溶解，并且在洗涤时不会影响结果。3.加样的每一步都应使用加样器，并定期检查其准确度，以避免测试误差。一个样本广告的时间7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。有关注意事项1.从冷藏环境中取出的试剂盒在使用前应在室温下保持平衡15-30分钟，酶联免疫吸附涂层板打开后如果板条耗尽应装入密封袋中保存。2洗涤缓冲液会结晶，加热的水会溶解稀释，洗涤不影响结果。3样品的每一步都应与进样器一起使用，并校对其准确性以避免测试误差。一个样本时间控制在5分钟以内，如果样本量很大，建议使用齐射式。4每次测量同时以标准曲线做多个孔。如待测样品中物质含量过高（样品外径大于标准孔外径)，请先将样品稀释倍数(n倍)进行测量和计算，然后再乘以总稀释倍数(n * * 5).5 .封板膜只能一次性使用，避免交叉污染。储存6个基板。7严格按照操作说明，将测定结果以微量滴定板读数器为标准。8 .所有样品、洗涤液和各种被