检测细胞中的DNA和RNA

1、检测细胞中的DNA和RNA1、分析学习任务检测细胞中的DNA与RNA是浙必需的第1章第3节的提案活动，在实验操作上，可以锻炼使用该显微镜的高倍率物镜的学生的能力。与此同时，该活动还能提高学生对核酸种类和性质的认识，为以后相关内容的学习打下基础。这项活动将科学知识与实际操作相结合，突出了所学内容的一定实际应用性。二、学员分析这个活动以二年级学生为对象。从知识的起点来看，学生们通过上节课的学习已经对核酸有了一定的了解，自然会对“细胞内DNA和RNA检测方法、过程、原理感兴趣”，这就是促使学生进行这部分活动的兴趣。另外，学生们通过中学实验掌握了显微镜的使用方法，为开展这项活动奠定了知识基础。在认知思

2、维的起点上，高二学生的思维方式已经开始从具体思维向抽象思维的转变，具有一定的理论分析能力和逻辑思维能力。因此，该活动应集中在学生和教师之间的互动交流上，引导学生积极思考，获取信息，从现象中挖掘本质，构建知识体系的能力。三、教学难点1、教育重点：实验原理，使用显微镜2，教学难点：甲基绿使DNA呈绿色，肌钙蛋白使RNA呈红色。四、教育目标1、知识和技术目标：(1) DNA和RNA可以分析结构上的不同点(2)熟悉显微镜的使用2、流程和方法目标：(1)掌握制作长板的方法(2)可以用试剂染料。(3、情感态度和价值目标：在实践能力方面培养，在学习态度上提高，变得积极乐观。5、课程体系1、实验原理分析(1)

3、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质内。(2)甲基格林和帕罗宁两种染发剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基格林DNA亲和力强，DNA呈绿色，特罗宁对RNA的亲和力强，RNA呈红色。DNA和RNA的分布用甲基绿、丙氨酸混合染色剂染色。(3)盐酸的作用盐酸可以改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜转运；盐酸将染色体的DNA从蛋白质中分离出来，方便了DNA和染色剂的结合。2、实验材料器具(1)材料：新鲜动物(青蛙)肝脏。(2)仪器：恒温水浴、100毫升燃烧器、1000毫升燃烧器、量筒、滴管、平衡机、幻灯片、封面幻灯片、吸水纸、显微镜。(3)试剂和制备方法试剂：盐酸1mol/L、蒸

4、馏水(装入滴瓶)、石蜡甲基绿混合粉、醋酸。如果实验室没有混合石蜡甲基绿，则可以分别使用甲基绿和法洛宁g，然后用染发剂a溶液的方法2配制。染色剂的制备型染发剂液体的两种制备方法方法1:取1g法罗宁甲基绿粉，加入100毫升蒸馏水中溶解，然后用滤纸过滤，在棕色瓶子中加入多余物。方法2:在98mL蒸馏水中溶解甲基绿2g，在95mL蒸馏水中溶解法宁G 5g。将6mL甲基绿溶液和2mL法洛宁溶液添加到16mL蒸馏水后，a溶液将装入棕色瓶子中准备。染色剂b溶液制备方法：b溶液是缓冲液，与乙酸钠混合。首先取16.4g醋酸钠，用蒸馏水溶解成1000毫升备用。用蒸馏水稀释12mL乙酸为1000mL储备。用30毫升

5、醋酸钠溶液和20毫升稀释醋酸、50毫升蒸馏水、pH 4.8 b液体(缓冲液)制造。染色剂的制备染色剂是a液和b液混合制造的。将A-20mL和b-80mL混合后，成为实验用甲基绿-帕罗宁染料溶液。要注意，这种试剂要使其活性。3、实验阶段(1)涂层切开新鲜动物肝脏，在干净的幻灯片中央涂抹部位，使其干燥。(2)水解将含有60mL 1mol/L盐酸溶液的小烧杯放入30 的恒温水浴中。倾斜在锁定在30 的盐酸溶液中干燥的滑道，进行10分钟水解(温度由30 控制为1 )。(3)冲洗用镊子取出洒有血的幻灯片，用滴管在稍微倾斜的幻灯片上喷水，使血液膜在一端慢慢流动，反复冲洗2-3次。(4)染色用吸墨纸去除血液

6、膜周围的水分后，放入含有幻灯片60mL甲基绿-法洛宁染料溶液的燃烧器，冲洗剩余的染料，再用吸墨纸吸收干血膜周围的水分。(5)观察低：在低倍率物镜下，染色均匀，找到颜色浅的区域，移动到视野中心，清晰地调节事物像。高：转到高倍率物镜，调整细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色。在显微镜下，含有RNA的区域染成红色，含有DNA的区域染成蓝绿色或浅绿色。注意RNA、细胞内DNA的分布。4、注意事项(1)选择材质使用实验材料应该容易获得，易于观察。常用观察物质：新鲜动物肝脏(2)采访要点动物肝脏要新鲜。(3)冲洗幻灯片时，要尽量慢水的流速，不要直接用水龙头冲洗。(4)用高倍率镜看材料时，只能用细准焦螺旋对焦，不能切割移动的粗糙准焦螺旋。5、实验相关知识(1)添加1mol/L盐酸水解的目的是改变细胞膜通透性，将染色剂注入细胞。从蛋白质中分离染色剂的DNA。杀死细胞有助于DNA和染色剂的结合。(2)为什么要水解：甲基格林和法洛宁不是活细胞需要的物质，正常情况下不能通过细胞膜进入细胞，因此使用盐酸破坏细胞膜，增加细胞膜的通透性，使染色剂更容易进入细胞。盐酸还可以从细胞内的染色体中分离DNA和蛋白质，有助