植物细胞工程的基本技术33553.ppt

1、a,1,专题2 细胞工程,细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过 水平或 水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。,细胞,细胞器,a,2,概念：,按操作对象分,植物细胞工程,动物细胞工程,a,3,理论基础,植物细胞工程,植物组织培养 （最基本）,植物体细胞杂交,植物细胞的全能性,基本技术,a,4,大多数植物都是由受精卵（有性生殖）发育而来的，那么由植物的体细胞如叶子、花瓣，甚至一粒花粉能发育成一棵完整的植株吗？为什么？应该如何操作？,a,5,一、细胞的全能性,具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能,即每

2、个细胞都具有全能性。,A、植物细胞动物细胞 B、受精卵生殖细胞体细胞; C、幼嫩组织细胞成熟组织细胞,1、概念：,2、细胞全能性大小:,规律：发育时间越早，细胞全能性越高，分裂能力越强，分化程度越低。,a,6,4、生物体内细胞并没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织器官的原因：,3、细胞具有全能性的原因:,生物体的每一个细胞都含有该物种个体生长发育所需要的全套基因。.,细胞中的基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。,a,7,怎样才能由一块组织通过培养得到一株完整植株,应该如何操作?,科学家利用菊花花瓣培养的菊花,1.概念： 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组

3、织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。,二、植物组织培养技术（无性繁殖）,2.原理：植物体细胞具有全能性,a,9,3、过程：,离体的植物组织、器官或细胞（外植体，消毒）,脱分化,无菌接种、诱导（一定的营养、植物激素、避光）,愈伤组织,再分化,试管苗,移栽大田,胚状体或丛芽（具生根芽能力）,二、植物组织培养技术（无性繁殖）,（含有不同激素的分化培养基，需光）,a,10,（1）愈伤组织：,排列疏松、高度液泡化而无定形状的薄壁细胞。无叶绿体，蔗糖供能，代谢类型为异养需氧型，进行有丝分裂。,a,11,（2）植物细胞的脱分化：,（3）植物细

4、胞的再分化：,就是让已分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程，又称去分化。实质是提高细胞的全能性过程，结果是形成愈伤组织,脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化形成胚状体或丛芽的过程。,（避光）,（需光，自养需氧型）,a,12,（4）决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么？,植物激素的种类和比例。,适中：诱导愈伤组织,高：利于根的分化、抑制芽的形成（胚状体）,低：利于芽的分化、抑制根的形成（丛芽）,a,13,（5）两个阶段：脱分化和再分化,a,14,4、植物细胞表现出全能性的条件：,离体（前提） 一定的营养物质（蔗糖、水和无机机盐等）、植物激素（细胞分裂素、生

5、长素）。 适宜的温度、pH、无菌、光照的控制等外界条件,a,15,试管苗大规模培养,a,16,1、在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？,无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键。原因是防止杂菌污染，杂菌繁殖快，会和培养物争夺营养和空间，并产生代谢废物毒害培养物。,讨论,(P35),a,17,2、为什么切取胡萝卜根的形成层，其他部分（如茎、叶、花）也能培养成小植株吗？,因为这部分容易诱导形成愈伤组织；胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）也能培养再生形成小植株，只是诱导愈伤组织比较困难。,讨论,外植体的选取：生长旺盛的幼嫩组织（全能性高、分裂能力强、分化程度低），易诱导脱

6、分化和再分化。,脱分化,再分化,植物组织培养的过程,（离体的,已分化组织或细胞）,幼芽或幼根？,条件？,优点？,特点？,繁殖速度快 不受季节限制 工厂化生产 . . .,适宜温度、 pH、避光、无菌环境。 适宜的营养和植物激素,高度液泡化、排列疏松、无规则的薄壁细胞。无叶绿体。,分化程度低去分化较易,植物激素： 生长素、细胞分裂素,小结：,理论基础：,细胞的全能性,a,19,知识拓展,当细胞分裂素和生长素共同使用时，能刺激愈伤组织的形成，而通过调节二者的浓度比，就可以调控植物细胞培养过程中芽和根的形成，称为“激素杠杆”。 具体内容详见P42拓展视野,生长素,细胞分裂素,根,愈伤组织,芽,a,2

7、0,三、植物体细胞杂交技术：重点 理解,不能 存在生殖隔离,尝试用这两种植物的体细胞进行杂交,这幅番茄马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？,a,21,蕃茄,马铃薯,三、植物体细胞杂交技术：,番茄-马铃薯植株,a,22,1你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合，遇到的第一个障碍是什么？ 植物细胞外面有一层细胞壁，这层细胞壁阻碍着细胞间的杂交。 2有没有一种温和的去壁方法呢？ 纤维素酶和果胶酶去除细胞壁（酶解法） 3、植物细胞去掉细胞壁后叫什么？ 原生质体 4为什么两个原生质体能发生融合，这与细胞膜的什么特性有关？(细胞融合的基础),请思考：,细胞膜具有一定的流动性,a,23,7如何将杂

8、种细胞培育成杂种植株？,5、人工诱导原生质体融合的方法有哪些？,物理法,化学法,离心、振动、电激等,PEG,植物组织培育技术,6原生质体融合的标志是什么？,产生新的细胞壁,8植物体细胞杂交技术完成的标志是什么？,获得杂种植株,9、植物体细胞杂交的原理是什么？,细胞膜的流动性、植物细胞的全能性,a,24,三、植物体细胞杂交技术（无性繁殖）,1.过程：如图所示,（1）去壁方法：,（2）诱导原生质体融合的方法：,（4）原生质体融合完成的标志：,（3）原生质体融合的基础：,纤维素酶和果胶酶（酶解法）,物理法：离心、振动、电刺激 化学法：PEG,细胞膜具有一定的流动性,产生新的细胞壁,脱分化,再分化,植

9、物组织培养,a,25,三、植物体细胞杂交技术（无性繁殖）,脱分化,再分化,植物组织培养,1.过程：如图所示,(5)在诱导剂的作用下形成的杂种细胞有3种（AA型、BB型、AB型），可用选择培养基筛选出AB型杂种细胞。,（6）植物体细胞杂交技术完成的标志：,获得杂种植物,(7)杂种植物的特征：具备两种植物的遗传性状。原因是杂种植物中含有两种植物的遗传物质。,a,26,杂种植株,融合的原生质体AB,再生出细胞壁,脱分化,愈伤组织,再分化,1、过程,植物细胞的融合,植物组织培养,植物细胞A,原生质体B,原生质体A,杂种细胞AB,去 壁,去 壁,人 工 诱 导,植物细胞B,三、植物体细胞杂交技术无性繁殖

10、,a,27,2、概念,将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。,4、意义：,5、未解决的问题： 未能让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状，如蕃茄马铃薯。,（1）克服远缘杂交不亲和的障碍（2）扩大基因重组的范围,3、原理：,细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性,三、植物体细胞杂交技术无性繁殖,a,28,1.为什么“番茄马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样，地上长番茄、地下结马铃薯？,主要原因是：细胞中基因选择性表达的结果。生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，所以马铃薯番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质

11、，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达，杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。,课本38页 思考与讨论,a,29,嫁接获得的番茄马铃薯,a,30,1、有关全能性的表述中，不正确的是（ ） 受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完 整个体，因此全能性最高 生物体内细胞由于分化全能性不能表达 卵细胞和受精卵一样，细胞未分化，全能 性很高 在一定条件下,植物细胞离体培养能表现出 全能性,C,反馈练习,a,31,2、下列有关细胞全能性含义的叙述，正确的是：,A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能,B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全

12、部功能,C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体 的潜能,D、 生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、 生长、衰老、死亡的全过程,C,a,32,3.下列属于组织培养的是：（ ） A.花粉培养成单倍体植株 B.芽发育成枝条 C.根尖分生区发育成成熟区 D.未受精的卵发育成雄蜂,A,想一想：判断全能性的标志是什么？,a,33,4、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤 组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的？ A、适宜的营养物质 B、适宜的温度 C、消毒灭菌 D、适宜浓度的生长激素,D,a,34,5、植物组织培养过程中的脱分化是指 （ ） A植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B未成

13、熟的种子经过处理培育出幼苗的过程 C植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程 D. 取植物的枝芽培育成一株新植物的过程,C,a,35,6、植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入特定培养基中培养，获得了许多完整的植株，这些植株的特点是（ ） A彼此性状极为相似 B都是单倍体植株 C植株的变异频率较高 D都是纯合体的植株,A,a,36,同一株绿色开花植物的不同部位细胞，经组织培养获得的植株的基因型一定相同吗？所有的花粉细胞形成的植株的基因型一定相同吗？所有的体细胞形成的植株的基因型一定相同吗？,不一定，花粉作为外植体发育成单倍体，体细胞作为外植体发育成二倍体。 由于花粉

14、基因型不一定相同，所以所有的花粉细胞形成的植株的基因型不一定相同；由于所有的体细胞基因型相同，所以所有的体细胞形成的植株的基因型相同。,想一想,？,a,37,6、某株名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离。为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用该植物的一部分器官或组织进行离体培养，发育出完整的植株。进行离体培养时不应采用该植株的（ ） A、茎尖 B、子房壁 C、叶片 D、花粉粒,D,a,38,下图是植物组织培养的简略表示。据此回答： 脱分化 再分化 （1）表示 ，它能被培养成为的根本原因是 。 （2）表示 ，它与相比分化程度 ，全能性 。 （3）若是花药，则是 ，继续对 其使用 处理可获得 正常植株，该过程称为 。 （4）若是胡萝卜根尖细胞，则培养成的的叶片的颜色是 ，这说明根尖细胞 。 （5）若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物紫草素，培养将进行到（填编号） 。,离体的植物器官、组织或细胞,植物细胞的全能性,愈伤组织,低,高,单倍体植株,秋水仙素,纯合,单倍体育种,绿色,含有与叶绿体形成相关的基因,a,39,1.在植物组培过程中，