




版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1、1,流式细胞术基本原理及应用,漆冬梅,2,流式细胞仪(flow cytometer) 是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、 电子计算机以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。,台式机、临床型,大型机、科研型,3,目前最新型流式仪,4,流式细胞术(flow cytometry) 利用流式细胞仪对处于快速直线流动状态中的单列细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定性、定量分析或分选的技术。,5,流动室与液流系统,光源与光学系统,信号收集与信号转换系统,计算机与分析系统,分选系统,流式细胞仪基本结构,6,流式细胞仪的液流系统,7,激光器,流动室,检测点,流式细胞仪的光学系统,
2、光电转换器件,8,流式细胞仪的光信号,1. 散色光信号 前向角散色(Forward Scatter,FSC) 小角散色,与细胞直径成近似直线关系。 侧向角散色(Side Scatter, SSC) 90散色,与细胞内颗粒结构的质量成近似直线关系。,物理属性:用来区分不 同细胞群体的基本形态 上的差异,9,利用FSC/SSC可将混合细胞分群,R1 粒细胞群 R2 淋巴细胞群 R3 单核细胞群 R4 红细胞裂解碎片和少 量血小板,图注:为外周血白细胞分群情况。由于淋巴细胞体积较小,细胞内颗粒较少,故其分布处于FSC、SSC都较小的区域,即R2区;粒细胞体积较大,细胞内颗粒较多,故其分布处于FSC、
3、SSC最大的区域,即R1区;单核细胞体积较大,细胞内颗粒较粒细胞少,淋巴细胞多,故其分布于二者之间。,10,2. 荧光信号 荧光素与特异抗体结合 荧光素吸收激光能量,发生能量跃迁,产生荧光 荧光信号被特定波长的光学元件传递到信号收集器中(PMT),形成信号脉冲。 每种颜色的荧光占用一个特定波长的检测器,即荧光通道。,化学属性,荧光标记抗体与细胞结合原理模式图,11,常用抗体标记荧光染料的特性及其应用,12,13,BD LSR ,四种激光器355nm 405nm 488nm 633nm,可进行多达10色以上的多色荧光分析,14,流式细胞术的应用,细胞表面分子 细胞内或细胞核内抗原 细胞凋亡 DNA含量检测与细胞周期的分析 细胞增殖 细胞毒的检测与分析 可溶性蛋白分子 报告基因 其它,15,样品处理,全血直接标记法 溶血:红细胞裂解液 膜表面抗原染色:孵育温度、时间、对照 固定与透膜:固定剂、透膜剂 细胞内抗原染色:透膜 上机检测:加入PBS 200-500l,上机检测。如不能及时上机检测
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 高能粒子在线诊断装备市场需求趋势分析
- 摄影之旅世界著名摄影地推 荐
- 2025至2030中国自充气复苏器行业发展趋势分析与未来投资战略咨询研究报告
- 2025至2030中国脱模膜行业市场深度研究及发展前景投资可行性分析报告
- 2025年节日期间农林水利系统纠治“四风”监督检查报告范文
- 2025至2030中国胃肠(GI)设备行业发展趋势分析与未来投资战略咨询研究报告
- 八年级体育教学评价体系计划
- 幼儿园用工管理法律法规贯彻计划
- 2025至2030中国美容院行业发展分析及投资前景与战略规划报告
- 2025至2030中国罗茨风机行业深度研究及发展前景投资评估分析
- 实验活动2 水的组成及变化的探究说课稿-2024-2025学年九年级化学人教版(2024)上册
- 网络舆情分析操作手册
- 2024年《认识大熊猫》课件:大熊猫保护的明天
- 团员发展纪实簿
- DB11-T 1952-2022 地理国情监测技术规程
- 记忆有方 过目不忘 课件
- 3D三维可视化BIM模板安全施工方案
- GB/T 15843.2-2024网络安全技术实体鉴别第2部分:采用鉴别式加密的机制
- 餐饮场所装修安全协议模板
- 附件3:微创介入中心评审实施细则2024年修订版
- 译林版初中英语九年级上册全册教学课件-译林版初中英语课件app
评论
0/150
提交评论