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文档简介
1、11基准分:基准分:60%60%22实验原理(不能简单拷贝):实验原理(不能简单拷贝):5%5%33实验步骤(如实记录):实验步骤(如实记录):10%10%44结果与结果与讨论讨论:20%20%55绘图(拍照及图片处理):绘图(拍照及图片处理):5%5%实验报告的批改实验报告的批改实验三、实验三、植物原生质体植物原生质体的制备及融合的制备及融合原生质体原生质体制备制备取新鲜展开花瓣,以自来水、蒸馏水清洗,用吸水纸吸干多余水分。注:手手镊子镊子原生质体的分离原生质体的分离用尖头镊剥取材料的下表皮(带有有色的叶肉细胞),将下表皮创面朝下创面朝下浸在酶液中,26酶解1hr(振荡)。(多)(多)注:3
2、5mm皿用于消化,实验技术实验技术原生质体分离原生质体分离机械切割机械切割酶酶法法细胞融合细胞融合自发融合(同种细胞)自发融合(同种细胞)人工诱导融合人工诱导融合背背景景细胞融合细胞融合19世纪世纪30年代年代,在,在肺结核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的肺结核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞病理组织中观察到多核细胞。19世纪世纪70年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的的现象。现象。1912年,年,Lambert报道在组织培养中观察到细胞合并。报道在组织培养中观察到细胞合并。1958年日本学者冈田(年日本学者冈田(Oka
3、da)发现仙台病毒具有触发动物)发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应细胞融合的效应。60年代初法国学者年代初法国学者G.巴斯基等发现体外培养的小鼠细胞能自巴斯基等发现体外培养的小鼠细胞能自发发融合。融合。1962年年,日本日本科学家科学家发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合的现象。细胞融合的现象。1965年,英国年,英国科学家证实灭科学家证实灭活的病毒在适当的条件下也可以活的病毒在适当的条件下也可以诱发动物细胞融合诱发动物细胞融合。背背景景植物细胞杂交发展历史植物细胞杂交发展历史1960年,年,Cocking用用酶法酶法制制备高等植物原生质体获得成功备高等植物原生质体获得成功1970年,年,Power首次用首次用硝酸钠硝酸钠为诱导剂实现原生质体融合为诱导剂实现原生质体融合1972年,年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种1974年,年,Kao将将PEG(聚乙二醇)(聚乙二醇)诱导融合法应用于植物细诱导融合法应用于植物细胞融合胞融合1978年,年,Melchers获得了第一个属间细胞杂种(番茄马铃获得了第一个属间细胞杂种(番茄马铃薯)薯)1981年,年,Zimmerman发明了电融合仪,建立了发明了电融合仪,
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