DNA的转录ppt.ppt

1、ribonucleic acid-RNA,在RNA聚合酶的催化作用下，以DNA为模板，四种核糖核苷三磷酸(NTPs)为原料合成RNA的过程。,一、转录的相关概念：,1. 转录(Transcription),转录过程中碱基配对差异：,模板链(template strand)：在转录过程中直接参与指导RNA合成过程的DNA链，其序列与新合成的RNA链互补。 编码链(coding strand)：在RNA合成过程中不直接参与指导RNA合成的DNA链，其序列与新合成的RNA链对应。,二、参与转录的酶类,1. 原核细胞RNA聚合酶,核心酶(core enzyme)：2 全酶(holoenzyme)：2

2、,大肠杆菌RNA聚合酶各亚基的性质与功能,2. 真核细胞RNA聚合酶,线粒体中的RNA聚合酶与原核生物相似。,三、转录过程,转录可分三阶段：起始、延伸和终止。 真核生物中还需转录后加工过程。,1. 原核生物的转录过程 （1）转录起始 启动子(promoter),位于结构基因5端上游的一段DNA序列，可被RNA聚合酶识别并结合，以启动基因转录，又称启动基因。,原核生物启动子特点：,10 Box：也称为Pribnow盒，一致序列为TATAAT，有利于转录时双链的解开。 35 Box：一致序列为TTGACA，提供聚合酶结合时的识别为点。, RNA聚合酶与模板DNA的结合, RNA合成的起始,起始位点

3、的嘌呤碱基与模板+1位碱基配对,(2) 转录延伸,因子的脱落，促进了RNA合成速度： 约50核苷酸/秒.分子酶,大肠杆菌RNA聚合酶催化 RNA聚合反应的起始与延伸,大肠杆菌trp操纵子终止位点序列(富含GC的反向重复序列形成茎环结构促进RNA从模板上脱落),(3) 转录终止, 不依赖因子的终止, 依赖 因子的终止,因子( factor)：由50kD亚基组成的六聚体，是一种ATP依赖型解链酶，可解开RNA:DNA和RNA:RNA双链。,2. 真核生物基因转录 （1）真核生物启动子 真核生物包括三类启动子：,真核生物启动子由转录因子识别。 转录因子(transcription factor)：能

4、识别启动子并与之发生相互作用的蛋白质，影响转录过程。 前起始复合物(preinitiation complex)：多种转录因子与RNA聚合酶在转录起点处形成的复合物。,真核生物的类启动子：,包括四种控制元件： 基本启动子(basal promoter ，即TATA Box) 起始子(initiator) 上游元件(upstream element) 应答元件(response element)。,GC Box: GGGCGG CAAT Box: GGC(T)CAATCT,(2) 真核生物增强子(enhancer)：,增强子：真核细胞中能增强启动子活性的核苷酸序列，称为增强子。,增强子的特点：

5、可远距离作用(可大于几个kb)； 位于启动子上游或下游都可发挥作用； 可在模板链上或也可位于编码链上； 功能与序列方向性无关； 具有组织特异性。,(2) tRNA前体的加工,(3) mRNA前体的加工,原核生物mRNA一般无需加工，但少数的多顺反子需要 通过核酸内切酶剪切成较小的单位后再进行翻译。,(1) 加帽(Capping),2. 真核细胞的转录后加工,(2) 加poly(A)尾巴(Polyadenylation),RNA-pN-OHnATP,多聚腺苷 酸聚合酶,RNA-pN-pApApA+nPPi,Mg2+/Mn2+,多聚腺苷酸化在核内完成，可以增加mRNA的稳定性。并非所有的真核mRNA都具有poly(A)尾巴，如组蛋白、呼肠孤病毒及一些植物病毒mRNA。,(3) 剪切与拼接(Splicing),外显子(exon)：外显子是指编码区的DNA序