第十一章吩噻嗪类抗精神病药物分析(2)

1、第 十一 章,吩噻嗪类抗精神病药物的分析,吩噻嗪类(硫氮杂蒽类，Phenothiazines)药物能够阻断多巴胺受体，在保持意识清醒的情况下控制幻觉及妄想等症状，主要用于治疗型精神分裂症，属于抗精神病药(Antipsychotics)。抗精神病药又称抗精神分裂症药(Antischizophrinics)或神经安定药(Neuroleptics)。,抗精神病药还包括：噻吨类(硫杂蒽类，Thioxanthenes)、丁酰苯类(Butyrophenones)及其他类。,第一节 基本结构与主要性质,一、结构与性质,硫氮杂蒽母核 （1）含S、N的三环共轭的大体系，S、N与苯环形成p-共轭UV、IR （2）

2、S原子为-2价，具有还原性，易被氧化呈色，避光 （3）S原子有两对孤对电子，易与金属离子络合呈色() 取代基 R：脂烃胺基、哌嗪基，具碱性 R：卤素(可有机破坏，X-),奋乃静,癸氟奋乃静,二、代表药物,盐酸异丙嗪,盐酸氯丙嗪,盐酸氟奋乃静,盐酸三氟拉嗪,第二节 鉴别试验,吩噻嗪类药物可依据其不同性质采用化学法、光谱法、色谱法及其他方法进行鉴别。,各国药典一般选用24种不同原理的分析方法组成一组鉴别试验，对所收载的吩噻嗪类药物进行鉴别。,盐酸异丙嗪片 （ ChP2010）,氧化显色反应,氯化物的鉴别反应,薄层色谱法(TLC)或高效液相色谱法(HPLC),提取后红外分光光度法(IR),盐酸氯丙嗪

3、 （ USP32-NF27）,红外分光光度法(IR),薄层色谱法(TLC),氯化物的鉴别反应,奋乃静 （ EP7）,熔点测定,红外分光光度法(IR),盐酸硫利达嗪 （ JP15）,氧化显色反应,红外分光光度法(IR),氯化物的鉴别反应,一、化学法,（一）与生物碱沉淀剂反应：10-N弱碱性 与生物碱沉淀剂(三硝基苯酚)形成衍生物，测定熔点,（二）氧化显色反应：S原子为-2价，具有还原性 与 氧化剂 氧化显色 氧化剂: 硫酸、硝酸、过氧化氢、FeCl3,（三）与钯离子配合呈色：Pd2+与S配合,（四）含卤素取代基的反应 焰色反应：Cl，绿色 显色反应：有机破坏，F-，H+/茜素锆，显色,（五）氯化

4、物的鉴别反应：盐酸盐 AgNO3沉淀反应；MnO2氧化还原反应,（一）与生物碱沉淀剂反应,【示例11-1 】,盐酸氯丙嗪鉴别 （JP15 ）,取本品约0.1g，加水20ml溶解后，加稀盐酸3滴与三硝基苯酚试液10ml，静置5小时，生成沉淀，滤过；沉淀用水洗涤后，以少量丙酮重结晶，于105干燥1小时，熔点为175179。,【示例11-2 】,盐酸氯丙嗪片鉴别 （JP15 ）,取本品，除去包衣，研细，称取细粉适量(约相当于盐酸氯丙嗪0.2g)，加0.1mol/L盐酸溶液40ml，振摇使盐酸氯丙嗪溶解，滤过；取滤液20ml，滴加三硝基苯酚试液10ml，照盐酸氯丙嗪项下的鉴别项试验，显相同的反应。,片

5、剂示例通过提取与过滤，排除片剂辅料对分析的干扰。,表11-3 常用吩噻嗪类药物的氧化显色反应,注1：1为ChP2010；2为EP7；3为JP15。 注2：有多部药典收载同一反应时，表中内容为ChP2010的描述，其他药典的描述请查阅相应药典。,颜色随氧化剂 不同而不同,（三）与钯离子配合呈色反应,硫氮杂蒽母核与钯离子配合呈色。 该反应不受氧化产物亚砜和砜的干扰，专属性强。,【示例11-7 】,癸氟奋乃静的鉴别 ChP（2010）,取本品约 50mg，加甲醇2ml 溶解后，加 0.1% 氯化钯溶液 3ml，即有沉淀生成，并显红色，再加过量的氯化钯溶液，颜色变深。,（四）含卤素取代基的反应,1、焰

6、色反应,【示例11-8 】,奋乃静 （ JP15）,卤化物的焰色反应取1.5cm5cm的铜网(网孔0.25mm，丝径0.174mm)，将一段铜线的一端缠绕于铜网上。在无色火焰中剧烈加热铜网，直至火焰不再显示绿色或蓝色，冷却。重复此操作数次，使铜网表面完全被氧化铜覆盖。除另有规定外，置约1mg供试品于铜网上，点火燃烧。重复此操作3次后，在无色火焰中检视铜网。,本品火焰显绿色,2、显色反应,吩噻嗪类药物2位的含氟取代基，可经有机破坏使成氟化物，在酸性条件下与茜素锆试液反应显色，鉴别。,【示例11-10 】,盐酸氟奋乃静注射液 （ ChP2010）,取本品适量(约相当于盐酸氟奋乃静20mg)，加碳酸

7、钠及碳酸钾各约100mg，混合均匀，先用小火小心加热，并蒸干，然后在600灰化，加水2ml使溶解，加盐酸溶液(12)酸化，滤过，滤液加茜素锆试液0.5ml，溶液由红变黄。,通过小火加热蒸干，排除注射液中溶剂对分析的干扰。,【示例11-9 】,癸氟奋乃静 ChP（2010）,取本品 1520mg，加碳酸钠与碳酸钾各约0.1g，混匀，在 600 炽灼 1520分钟，放冷，加水2ml 使溶解，加盐酸溶液（12）酸化，滤过，滤液加茜素锆试液 0.5ml，应显黄色。,（五）氯化物的鉴别反应,吩噻嗪类药物的盐酸盐及其制剂进行氯化物的鉴别。,鉴别反应,与AgNO3的沉淀反应,与MnO2等氧化剂的氧化还原反应

8、,与AgNO3沉淀反应鉴别时，由于硫氮杂蒽母核具有还原性，稀HNO3的加入使该类药物发生氧化显色反应。可在供试品溶液中加氨试液使成碱性，吩噻嗪类药物析出，滤除沉淀，取滤液进行试验。,注意：,【示例11-11 】,盐酸氯丙嗪鉴别（ JP15）,取本品0.5g，加水5ml溶解后，加氨试液2ml，水浴加热5分钟，冷却，滤过；滤液用稀硝酸酸化，溶液显氯化物的鉴别反应。,【示例11-12 】,盐酸氯丙嗪(糖衣)片鉴别 （ChP2010）,取本品，除去包衣，研细，称取细粉适量(约相当于盐酸氯丙嗪50mg)，加水5ml，振摇使盐酸氯丙嗪溶解，滤过；滤液照盐酸氯丙嗪项下的鉴别项试验，显相同的反应。,说明：,C

9、hP2010和USP32-NF27采用氯化物的鉴别反应鉴别吩噻嗪类药物盐酸盐的片剂，且均采用过滤法排除辅料的干扰。,MnO2等氧化剂的氧化还原反应进行鉴别：,注意：硫氮杂蒽母核和氯离子均被氧化 鉴别方法：具有挥发性的氧化产物氯气使用水湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色 吩噻嗪类药物的存在不干扰氯化物的鉴别反应。,二、光谱法,（一）紫外分光光度法,由母核三环的系统产生，一般具有三个峰值。 205 nm附近、254 nm附近和300 nm附近。,最强峰多在 250265nm,2位上的取代基（R）不同，会引起吸收峰发生位移。,本类药物的紫外光吸收特性可用于鉴别和含量测定。,其结构中-2 价的硫，易氧化，氧化

10、产物砜及亚砜产生第四个吸收峰。,【示例11-16 】,盐酸氯丙嗪鉴别 （ChP2010）,取本品，加盐酸溶液(91000)制成每1ml中含5g的溶液，在254nm与306nm的波长处有最大吸收，在254nm的波长处吸光度约为0.46。,ChP2010和EP7在用紫外分光光度法鉴别盐酸氯丙嗪时，由于205nm为紫外末端波长，其最大吸收未作为鉴别的依据；又因为306nm波长处的吸光度及吸收系数较低，也未作为鉴别的依据。,【示例11-18 】,奋乃静(糖衣或薄膜衣)片鉴别 （ChP2010）,（避光操作）,取含量测定项下的供试品溶液避光操作。取本品20片，除去包衣后，精密称定，研细，精密称取适量(约

11、相当于奋乃静10mg)，置100ml量瓶中，加溶剂(取乙醇500ml，加盐酸10ml，加水至1000ml，摇匀)约70ml，充分振摇使奋乃静溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，在255nm的波长处有最大吸收。,取续滤液作为供试品溶液，排除了片剂中不溶性辅料对光谱测量的影响。,（二）红外分光光度法,ChP2010收载的吩噻嗪类原料药均采用红外分光光度法(IR)鉴别。本类药物的制剂可采用提取后红外分光光度法(IR)鉴别。,图11-1A 盐酸氯丙嗪的红外光吸收图谱,图11-1B 盐酸异丙嗪的红外光吸收图谱,三、色谱法,

12、（一）薄层色谱法 供试品溶液主斑点与对照品溶液主斑点的Rf值应一致。,（二）高效液相色谱法 以药物对照品制备对照品溶液的外标法。,四、其他方法,吩噻嗪类药物还可以通过熔点测定进行鉴别。,【示例11-22】,EP7奋乃静鉴别法： 照毛细管法测定，本品的熔点为96100。,第三节 有关物质检查,吩噻嗪类药物的有关物质主要包括：,残留的原料及中间产物,副产物,药物的氧化产物,检查方法,高效液相色谱法（HPLC）,薄层色谱法（TLC）,一、盐酸氯丙嗪及其制剂的有关物质检查,（一）合成路线与有关物质,1、 合成路线,2、有关物质及其编号代码,残留的中间产物：,贮藏不当或存放时间过长而产生的有关物质：,（

13、二）有关物质检查方法,1、 盐酸氯丙嗪的有关物质检查,【示例11-23】,ChP2010,检查方法：,HPLC高低浓度法,色谱条件,色谱柱：C8(0.25m4.0mm，5m),流动相：乙腈-0.5%三氟乙酸(pH5.3)(5050),检测波长：254nm,判断标准：,供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.5%)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(1.0%)。,2、 盐酸氯丙嗪(糖衣)片的有关物质检查,【示例11-26】,ChP2010检查法,检查方法：,HPLC 高低浓度对比法,判断标准：,供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大

14、于对照溶液主峰面积(0.5%)。,采用过滤法排除片剂辅料的干扰；,说 明：,取消了对杂质总量的控制，在一定程度上减弱了控制。,第四节 含 量 测 定,一、酸碱滴定法,（一）非水溶液滴定法,（二）乙醇-水溶液中的氢氧化钠滴定法,二、分光光度法,（一）直接分光光度法(原料药),（二）提取后分光光度法(制剂),（三）提取后双波长分光光度法(去除氧化物干扰),（四）二阶导数分光光度法(自学),（五）钯离子比色法,（三）提取后双波长分光光度法,提取后分光光度法能够除去一些干扰物质，但却不能除去吩噻嗪类药物的氧化物。提取时，氧化物随游离碱进入有机相；测定时，因结构相近，氧化物在吩噻嗪类药物的测定波长处产生

15、吸收，干扰测定。,【示例11-37】,盐酸氯丙嗪注射液的含量测定 （ USP32-NF27）,测定波长：,254nm（最大吸收波长）及277nm（等吸收波长）,空白对照液：0.1mol/L盐酸溶液,计算公式：,式中：C(mg/ml)为对照品溶液的浓度； V(ml)为所取供试品的体积； 括号内的公式分别为供试品溶液(U)和对照品溶液(S)在下标所 示波长处的吸光度差。,（四）二阶导数分光光度法(自学),吩噻嗪类药物制剂中其他成分对含量测定的干扰，虽然可以采用提取后分光光度法或提取后双波长分光光度法消除，但操作烦琐。,盐酸氯丙嗪注射液,抗氧剂维生素C的二阶导数光谱近似为接近基线的一条直线，不干扰盐

16、酸氯丙嗪的测定.,因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数光谱量取峰266nm谷254nm距离，标准曲线法定量,（五）钯离子比色法,吩噻嗪类药物在pH 20.1的缓冲溶液中，与钯离子(Pd2+)形成红色配合物，在500nm波长附近具有最大吸收，,由于钯离子仅与未被氧化的硫元素配合显色，消除了药物中氧化物对测定的干扰。,比色液的浓度：50 250 g/mL,显色稳定性：10分钟后可稳定约2小时,盐酸异丙嗪片的含量测定（ USP32-NF27）,【示例11-38】,取3支试管，分别精密加入对照品溶液、供试品溶液与0.1mol/L盐酸溶液(空白溶液)各2ml，再分别加入氯化钯缓冲溶液各3.0ml，摇匀。取对照品管溶液和供试品管溶液，以空白管溶液为参比，照紫外-可见分光光度法，分别在最大吸收波长470nm处测定吸光度。,操作步骤：,计算公式：,式中：C(mg/ml)为对照品溶液的浓度； AU和AS分别为供试品溶液及对照品溶液的吸光度。,三、高效液相色谱法,（一）反相高效液相色谱法,在流动相中加入含氮碱性竞争试剂(扫尾剂：醋酸铵、三乙胺、二乙胺、乙腈等)，以抑制碱性药物与未硅烷化的硅醇基作用。,（二）离子对高效液相色谱法,常用的离子对试剂：烷基磺酸盐阴离子对试剂，如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷磺酸钠等。,影响离子对形成的条件,pH,反离子的性质与浓度,流动相